EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 مللي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS
أحد أكثر وسائط زراعة الخلايا الاصطناعية استخدامًا على نطاق واسع هو وسط إيجل الأساسي الأدنى (MEM). تم تطوير هذا الوسيط الذي طوره هاري إيغل، وتم تقديمه لأول مرة في عام 1959 وأصبح منذ ذلك الحين خيارًا شائعًا لأنواع مختلفة من الخلايا التي تنمو في طبقات أحادية وخطوط خلايا ملتصقة.
ماذا يوجد في EMEM؟
EMEM هو نسخة معدلة من وسط إيجل الأساسي الأدنى، ويحتوي على محلول الملح المتوازن من إيرل والأحماض الأمينية غير الأساسية وL-الجلوتامين وبيروفات الصوديوم وبيكربونات الصوديوم. من المهم ملاحظة أن هذا المستوى من بيكربونات الصوديوم مخصص للاستخدام في الهواء بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون. وللحفاظ على فعاليته، يوصى بتخزين الوسط في درجة حرارة تتراوح بين 2 درجة مئوية و8 درجات مئوية في الظلام عند عدم الاستخدام.
فيما يُستخدم EMEM؟
وسط إيجل الأساسي الأدنى (EMEM) هو وسط زراعة الخلايا الذي يمكنه الحفاظ على الخلايا في مزرعة الأنسجة. يحتوي هذا الوسط على تركيزات أعلى من الأحماض الأمينية، مما يسمح بتقريب أكثر دقة للتركيب البروتيني لخلايا الثدييات المستزرعة. يمكن استخدام EMEM لزراعة خلايا مختلفة، بما في ذلك الخلايا الليفية وخلايا خط خلايا سرطان الكبد البشري (HepG2) وخلايا الخلايا النجمية المشتقة من الخلايا الجنينية المشتقة من الدماغ البشري (PDA). ويُستخدم عادةً في وجود مصل بقري جنيني (FBS) أو مصل العجل أو مصل الحصان.
كيف يختلف EMEM عن وسائط زراعة الخلايا الأخرى؟
بينما يتشارك كل من وسط EMEM ووسط النسر المعدل (DMEM) في دولبيكو في بعض أوجه التشابه، إلا أنهما يختلفان أيضًا. فكلا الوسطين يفتقران إلى البروتين ويحتويان على الأحماض الأمينية والأملاح والجلوكوز والفيتامينات اللازمة لتزويد الخلية بالطاقة والحفاظ عليها في مزرعة الأنسجة. ومع ذلك، يتم تعديل تركيبة DMEM لتحتوي على ما يصل إلى أربعة أضعاف الفيتامينات والأحماض الأمينية وما بين ضعفين إلى أربعة أضعاف الجلوكوز مقارنةً بالوسط المتغير المتنوع EMEM. ومن الجدير بالذكر أن EMEM يختلف أيضًا عن تركيبة MEM الأصلية.
مراقبة الجودة
- معقمة ومفلترة
التخزين ومدة الصلاحية
- يُحفظ في درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية، مع حمايته من الضوء.
- بمجرد فتحه، يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية ويستخدم خلال 6-8 أسابيع.
ظروف الشحن
- درجة الحرارة المحيطة
الصيانة
- يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأنه يقلل من جودة المنتج.
- لا تقم بتسخين الوسيط أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير منضبطة مثل أجهزة الميكروويف.
- في حالة استخدام جزء فقط من الوسيط، يجب إزالة الكمية المطلوبة وتسخينه إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.
التركيب
| الفئة | المكونات | التركيز (ملغم/لتر) |
| الأحماض الأمينية | إل-أرجينين حمض الهيدروكلوريك | 126.00 |
| إل-سيستين 2 حمض الهيدروكلوريك | 31.30 | |
| ل-جلوتامين | 292.00 | |
| إل-هيستيدين H2OH2O | 42.00 | |
| ل-إيسولوسين | 52.00 | |
| ل-ليوسين | 52.00 | |
| ل-ليسين حمض الهيدروكلوريك | 72.50 | |
| ل-ميثيونين | 15.00 | |
| ل-فينيل ألانين | 32.00 | |
| ل-ثريونين | 48.00 | |
| ل-التريبتوفان | 10.00 | |
| ل-تيروزين 2 صوديوم 2 ه2و2أو | 51.90 | |
| ل-فالين | 46.00 | |
| فيتامينات | كلوريد الكولين | 1.00 |
| فيتامينات | بانثوثينات الكالسيوم د-كالسيوم | 1.00 |
| حمض الفوليك | 1.00 | |
| ميو-إنوزيتول | 2.00 | |
| نيكوتيناميد النيكوتيناميد | 1.00 | |
| البيريدوكسال حمض الهيدروكلوريك | 1.00 | |
| ريبوفلافين | 0.10 | |
| ثيامين حمض الهيدروكلوريك | 1.00 | |
| أملاح غير عضوية | CaCl2 2 H2O | 265.00 |
| أملاح غير عضوية | كلوريد الكالسيوم | 400.00 |
| MgSO4 | 97.67 | |
| كلوريد الصوديوم | 6800.00 | |
| NaHCO3 | 2200.00 | |
| NaH2PO4 | 122.00 | |
| مكونات أخرى | د-الجلوكوز | 1000.00 |
| مكونات أخرى | ملح الصوديوم الفينول الأحمر الفينول | 11.00 |