RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3
وسط RPMI 1640، المعروف أيضاً باسم وسط RPMI، هو وسط زراعة خلايا متعدد الاستخدامات يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية لزراعة خلايا الثدييات المختلفة. تم تطوير هذا الوسط من قبل جورج إي مور وروبرت إي جيرنر وإتش أديسون فرانكلين في عام 1966 في مركز روزويل بارك الشامل الشهير للسرطان، وقد استمد هذا الوسط اسمه من أصله في معهد روزويل بارك التذكاري (RPMI).
تم تصميمه في البداية لدعم نمو خلايا سرطان الدم البشري في كل من مزارع المعلقات والطبقات الأحادية الطبقة، وقد تطور هذا الوسيط RPMI 1640 من خلال التعديلات التي أجراها الباحثون والموردون التجاريون ليصبح مناسباً لمجموعة متنوعة من خلايا الثدييات. وهو متوافق بشكل استثنائي مع خطوط الخلايا مثل HeLa وJurkat وMCF-7 وPC12 وPC12 وBBC والخلايا النجمية والخلايا السرطانية.
يتميز RPMI 1640 Medium عن وسائط زراعة الخلايا الأخرى بسبب تركيبته الفريدة. فهو يحتوي على كمية كبيرة من الفوسفات والأحماض الأمينية والفيتامينات. والجدير بالذكر أنه يحتوي على البيوتين وفيتامين B12 وPABA، وهي غير موجودة في وسط النسر الأساسي الأدنى أو وسط النسر المعدل في ديلبيكو. علاوة على ذلك، يُظهر وسط RPMI 1640 تركيزات مرتفعة بشكل ملحوظ من فيتامينات الإينوزيتول والكولين. ومع ذلك، فإنه لا يحتوي على بروتينات أو دهون أو عوامل نمو. وبالتالي، يلزم عادةً إضافة 10% من مصل البقر الجنيني (FBS) لتوفير الظروف المثلى لنمو الخلايا.
يعتمد نظام التخزين المؤقت في RPMI 1640 Medium على بيكربونات الصوديوم ويتطلب بيئة من 5-10% من ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على درجة حموضة مناسبة من الناحية الفسيولوجية. كما أن تضمين عامل الاختزال الجلوتاثيون يميز هذا الوسط عن غيره.
مراقبة الجودة
- معقمة ومفلترة
التخزين ومدة الصلاحية
- يُحفظ في درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية، مع حمايته من الضوء.
- بمجرد فتحه، يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية ويستخدم خلال 6-8 أسابيع.
ظروف الشحن
- درجة الحرارة المحيطة
الصيانة
- يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأنه يقلل من جودة المنتج.
- لا تقم بتسخين الوسيط أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير منضبطة مثل أجهزة الميكروويف.
- في حالة استخدام جزء فقط من الوسيط، يجب إزالة الكمية المطلوبة وتسخينه إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.
التركيب
| الفئة | المكونات | التركيز (ملغم/لتر) |
| الأحماض الأمينية | الجلايسين | 10.00 |
| إل-ألانيل-إل-جلوتامين | 434.40 | |
| ل-أرجينين | 200.00 | |
| ل-أل-أسباراجين H2O | 56.82 | |
| ل-حمض الأسبارتيك | 20.00 | |
| إل-سيستين 2HCl | 65.20 | |
| ل-حمض الجلوتاميك | 20.00 | |
| ل-هيستيدين حمض الهيستيدين H2O | 20.27 | |
| ل-هيدروكسي-ل-برولين | 20.00 | |
| إل-إيسولوسين | 50.00 | |
| ل-لوسين | 50.00 | |
| إل-ليسين حمض الهيدروكلوريك | 40.00 | |
| ل-ميثيونين | 15.00 | |
| ل-فينيل ألانين | 15.00 | |
| ل-برولين | 20.00 | |
| ل-سيرين | 30.00 | |
| ل-ثريونين | 20.00 | |
| ل-تريبتوفان | 5.00 | |
| إل-تيروزين 2Na 2H2O | 28.83 | |
| ل-فالين | 20.00 | |
| فيتامينات | ب-حمض أمينو بنزويك | 1.00 |
| د-بيوتين | 0.20 | |
| كلوريد الكولين | 3.00 | |
| د-كالسيوم البانتوثينات | 0.25 | |
| حمض الفوليك | 1.00 | |
| ميو إينوزيتول | 35.00 | |
| نيكوتيناميد النيكوتيناميد | 1.00 | |
| البيريدوكسين حمض الهيدروكلوريك | 1.00 | |
| ريبوفلافين | 0.20 | |
| ثيامين حمض الهيدروكلوريك | 1.00 | |
| فيتامين B12 | 0.005 | |
| أملاح غير عضوية | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| كلوريد الكالسيوم | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| كلوريد الصوديوم | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| مكونات أخرى | د-الجلوكوز | 2000.00 |
| ل-جلوتاثيون مختزل | 1.00 | |
| ملح الصوديوم الفينول الأحمر الفينول | 5.30 |