اختبار الميكوبلازما السريع

الميكوبلازما الميكوبلازما هي كائنات صغيرة بدائية النواة صغيرة جداً بحيث لا يمكن رؤيتها في الفحص المجهري ولا يمكن القضاء عليها بواسطة كواشف المضادات الحيوية الشائعة. وقد تؤثر الميكوبلازما على النمو الخلوي وتكاثر ومورفولوجيا خطوط الخلايا مما قد يؤدي إلى نتائج تجريبية غير موثوقة. لذلك، يوصى بإجراء مراقبة متكررة لضمان بيئة خالية من الميكوبلازما.

طريقة التحليل

تقدم CLS اختبارات قصيرة الأجل وطويلة الأجل للكشف عن الميكوبلازما. في الحالة الأولى، يتم اختبار العينات فور وصولها بينما في الحالة الثانية يتم البدء في زراعة الخلايا ويتم اختبار الخلايا بعد 14 يومًا من الزراعة الخالية من المضادات الحيوية. يتم إجراء اختبار الميكوبلازما باستخدام نظام كشف من نقطتين باستخدام كل من PlasmoTest™ - مجموعة أدوات الكشف عن الميكوبلازما (Invivogen) ومجموعة أدوات الكشف عن الميكوبلازما (Certus QC - mycoADVANCED).

العينات

• بالنسبة للاختبار السريع، يُرجى توفير ما لا يقل عن 50 ميكرولتر من المعلق الخلوي الذي يحتوي على 50.000 خلية. يمكن شحن المعلق الخلوي في درجة الحرارة المحيطة.
• بالنسبة للاختبار المتميز، يُرجى توفير ما لا يقل عن مليون خلية في وسط تجميد مناسب لضمان مزرعة قوية وصحية لزراعة الخلايا واختبارها لاحقًا. يُرجى شحن العينات على ثلج جاف.
• يُرجى ملء نموذج عينة اختبار الميكوبلازما وإرفاقه مع شحنة العينة الخاصة بك.

فحص المراسل اللوني

هذا الاختبار هو اختبار قياس لوني قائم على الخلايا. في وجود الميكوبلازما، يستحث خط خلية المراسل سلسلة من الإشارات التي تؤدي إلى تغير اللون في الوسط من الأحمر إلى الأزرق. يتم إجراء الفحص في ألواح متعددة الخلايا ذات 96 خلية. يتم الكشف عن الإشارات في مقياس الطيف الضوئي للصفائح عند 620-655 نانومتر. يتم الكشف عن جميع أنواع الميكوبلازما والميكوبلازما الميكوبلازما، وكذلك الملوثات الأخرى في مزرعة الخلية مثل البكتيريا.

التضخيم المتساوي الحرارة

التضخيم المتساوي الحرارة هو اختبار سريع وموثوق به يعتمد على التضخيم المتساوي الحرارة للحمض النووي الخاص بالميكوبلازما مع الكشف في الوقت الحقيقي باستخدام صبغة تقطير الحمض النووي. الفحص قادر على الكشف عن ستة من الأنواع الأكثر شيوعًا التي تمثل >95% من حالات التلوث: M.orale وM.hyorhinis وM.arginini وM.fermentans وM.hominis وA.laidlawii. نظرًا لتماثل التسلسل، سيتم الكشف عن أنواع أخرى من الميكوبلازما أيضًا (M.pneumoniae وM.gallisepticum وM.synoviae). ولتحديد ما إذا كانت العينة إيجابية أو سلبية للميكوبلازما، تتم دراسة درجة حرارة الانصهار (Tm).