وسط مكويز 5 أ (معدّل)، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر صوديوم هيدروكسيد الصوديوم
يعد McCoy's 5A Medium وسطًا موصى به للغاية ومتخصصًا مصممًا لتسهيل نمو وتكاثر الفيروسات في مزارع الخلايا الأولية. وقد اكتسب شهرة كبيرة لأدائه الاستثنائي في مختلف تطبيقات الأبحاث البيولوجية.
أحد التطبيقات البارزة لوسط McCoy's 5A Medium هو استخدامه في زراعة خطوط خلايا سرطان القولون البشري. على وجه التحديد، تم استخدامه في دراسة مستقبلات G-protein-coupled receptor (LGR5) الغنية بالليوسين ودورها في ورم خبيث سرطان القولون. وقد استخدمت هذه الوسيلة بشكل فعال في زراعة العديد من سلالات خلايا سرطان القولون، بما في ذلك HCT116 و RKO و FET و CBS و HCT116b و TENN، مما مكن الباحثين من التعمق في الآليات الكامنة وراء ورم خبيث سرطان القولون.
بالإضافة إلى تطبيقه في أبحاث السرطان، أثبتت وسط McCoy's 5A أنه لا غنى عنه في دراسة الخلايا العظمية. استخدم الباحثون الذين يدرسون تفاعل أيونات الهيدروكسيباتيت الناقص الكالسيوم في وسائط زراعة الخلايا القياسية هذا الوسط لزراعة الخلايا العظمية. ساعد هذا التطبيق على فهم التفاعلات بين الخلايا العظمية والهيدروكسيباتيت الناقص الكالسيوم بشكل أفضل، مما ساهم في إحراز تقدم في مجال أبحاث العظام.
تمت صياغة وسط ماكوي 5A بدقة عن طريق تعديل الأحماض الأمينية الموجودة في وسط إيجل الأساسي لتوفير الدعم الأمثل لخلايا أورام الكبد. هذه الصيغة المخصبة تجعله مناسبًا لمجموعة متنوعة من سلالات الخلايا المعمول بها، وكذلك الخلايا الأولية، مما يعزز من تنوعه وقابليته للتطبيق في مختلف بيئات البحث.
يمتد تأثير وسط ماكوي 5A البيوكيميائي والفسيولوجي إلى ما وراء خلايا أورام الكبد. وقد تم استخدامه بنجاح لدعم النمو في المزارع الأولية لنخاع العظام والجلد واللثة والكلى والغشاء البطني والغدة الكظرية والرئة والطحال وأجنة الفئران وأنواع أخرى من الخلايا. تشهد هذه المجموعة الواسعة من التطبيقات على الفائدة الكبيرة لوسط ماكوي 5A في دعم نمو وصيانة أنواع مختلفة من الخلايا من أجل إجراء أبحاث بيولوجية شاملة.
التركيب
يحتوي وسط ماكوي 5A (المعدل) على 3.0 جم/لتر من الجلوكوز، والجلوتامين المستقر، و 2.0 مليمول من بيروفات الصوديوم، و 2.2 جم/لتر من NaHCO3.
مراقبة الجودة
- الرقم الهيدروجيني = 7.2 +/- 0.02 عند 20-25 درجة مئوية.
- تم اختبار كل دفعة للتأكد من تعقيمها وخلوها من الميكوبلازما والبكتيريا.
الصيانة
- يحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية في مكان مظلم. يؤدي التجميد والتسخين إلى +37 درجة مئوية إلى تقليل جودة المنتج.
- لا تسخن الوسط إلى أكثر من 37 درجة مئوية ولا تستخدم مصادر حرارة لا يمكن التحكم فيها (مثل أجهزة الميكروويف).
- إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بإزالة هذه الكمية من الزجاجة وقم بتسخينها في درجة حرارة الغرفة.
- مدة الصلاحية لأي وسط باستثناء الوسط الأساسي هي من 6 إلى 8 أسابيع من تاريخ الفتح.
التركيب
| المكونات | مليغرام/لتر | |
| أملاح غير عضوية | كلوريد الكالسيوم × 2H2O | 132 |
| كبريتات المغنيسيوم | 97 | |
| كلوريد البوتاسيوم | 400 | |
| كلوريد الصوديوم | 6,460 | |
| هيدروجين فوسفات الصوديوم (لا مائي) | 504 | |
| مكونات أخرى | D(+)-جلوكوز (لا مائي) | 3,000 |
| الجلوتاثيون (مخفض) | 0 | |
| بيبتون اللحم | 600 | |
| ملح الصوديوم الأحمر الفينولي | 11 | |
| الأحماض الأمينية | L-ألانين | 13 |
| L-أرجينين × HCl | 42.14 | |
| L-أسباراجين × H2O | 45 | |
| حمض L-أسبارتيك | 19.9 | |
| L-سيستين × HCl × H2O | 31.7 | |
| L-جلوتامين (مستقر) | 219.1 | |
| حمض L-جلوتاميك | 22 | |
| جلايسين | 7 | |
| L-هيستيدين × HCl × H2O | 20.9 | |
| L-هيدروكسيبرولين | 19.6 | |
| L-إيسولوسين | 39 | |
| L-لوسين | 39.36 | |
| L-ليسين × HCl | 36.54 | |
| L-ميثيونين | 14.9 | |
| L-فينيل ألانين | 16.5 | |
| L-برولين | 17.27 | |
| L-سيرين | 26.28 | |
| L-ثريونين | 17.87 | |
| L-تريبتوفان | 3 | |
| ملح ثنائي الصوديوم L-تيروزين | 26.10 | |
| L-فالين | 17.5 | |
| فيتامينات | حمض p-أمينوبنزويك | 1 |
| حمض الأسكوربيك | 0 | |
| D(+)-بيوتين | 0 | |
| D-بانتوثينات الكالسيوم | 0 | |
| كلوريد الكولين | 5 | |
| حمض الفوليك | 10 | |
| ميو-إينوزيتول | 36 | |
| نيكوتيناميد | 0 | |
| حمض النيكوتينيك | 0 | |
| بيريدوكسال هيدروكلوريد | 0 | |
| بيريدوكسين هيدروكلوريد | 0.5 | |
| ريبوفلافين | 0 | |
| ثيامين هيدروكلوريد | 0 | |
| فيتامين ب12 | 2 |