توثيق خط خلايا الفأر (التكرار الترادفي القصير (STR))
ونظراً لانتشار التلوث المتبادل والتعرّف الخاطئ، فإن أصالة الخلايا المستخدمة في مشاريع البحث العلمي تشكل مصدر قلق كبير. وتشير التقديرات إلى أن حوالي 15-20% من جميع الأبحاث القائمة على خطوط الخلايا تعمل مع سلالات خلوية تم تحديدها بشكل خاطئ. ولذلك، فإن تحديد مواصفات خط الخلية باستخدام تحليل STR أمر بالغ الأهمية لإجراء أبحاث موثوقة وقابلة للتكرار. وبالإضافة إلى ذلك، يطلب عدد متزايد من المجلات العلمية التحقق من خط الخلية قبل قبول مقال ما.
تشمل خدماتنا ما يلي
- مصادقة خط الخلية
- المقارنة مع قواعد البيانات على الإنترنت
- تقرير تحليل جاهز للنشر
سهلة الاستخدام
- يُرجى تنزيل نموذج طلب مصادقة خط الخلية وإ ضافة الورقة المعبأة والمطبوعة إلى شحنة العينات الخاصة بك.
- يرجى إرسال العينات إلينا في مظروف مبطن في درجة حرارة الغرفة.
- بالنسبة للحمض النووي الجيني gDNA، يرجى تزويدنا ب ≥ 50 ميكرولتر من 50 ميكروغرام/ميكرولتر من الحمض النووي الجيني في تريس أو EDTA (10 ملي مولار من تريس، 0.1 ملي مولار من EDTA).
- بالنسبة إلى كريات الخلايا، يرجى تزويدنا بـ 1.0-5.0 مليون خلية ككريات خلية. يُرجى الغسل مرتين بمحلول PBS وإعادة الإرواء في 0.5 مل من الإيثانول بنسبة 70-90%.
العلامات
- تُطبع الخلايا البشرية باستخدام نظام PowerPlex من Promega باستخدام 16 علامة STR.
- تُطبع خلايا الفأر باستخدام 18 علامة من علامات STR.
- تُطبع خلايا الفئران باستخدام 14 علامة STR وعلامة واحدة خاصة بالجنس.
- تُطبع خلايا الكلاب باستخدام 11 علامة STR.
- طُبعت خلايا الهامستر باستخدام 10 علامات STR.
النتائج
ستحصل على النتائج في غضون أسبوعين عبر البريد الإلكتروني. تتضمن النتائج مقارنة البيانات مع قاعدة بيانات سيلوسورس. سيتم تصنيف خط الخلية على أنه أصلي أو خاطئ.
التكرارات الترادفية القصيرة (STRs)
يشكل شكل الحمض النووي المكون من 2-13 قاعدة والذي يتكرر حتى عدة مئات من المرات تكرارًا ترادفيًا قصيرًا (STR). ويؤدي التباين الفردي في عدد التكرارات في السلالة القصيرة الترادفية إلى اختلافات في طول الأجزاء المنتجة عند استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل. يتم تحديد سمات خطوط الخلايا باستخدام هذه الاختلافات في أطوال الأجزاء في عدة مواقع.
الكشف عن مخاليط الخطوط الخلوية
من الممكن تحديد تلوث خط خلوي واحد بواسطة خط خلوي إضافي واحد أو أكثر حتى نسبة 10% من الخط الخلوي الملوث. توفر مجموعات خطوط الخلايا عادةً ملفات تعريف STR مع ثلاث قمم أو أكثر لموضع واحد أو عدة مواضع.