DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 je široce uznávané a hojně využívané základní médium v buněčných kulturách pro biologický výzkum. Slouží jako základní zdroj živin pro růst různých savčích buněčných linií, zejména pokud je doplněno fetálním hovězím sérem (FBS).
Tento jedinečný přípravek kombinuje Dulbeccovo modifikované orlí médium (DMEM) a Hamovu směs F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) v přesném poměru 1:1. Přídavek L-glutaminu dále vylepšuje jeho složení.
DMEM, odvozený od Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), nabízí ve srovnání se svým předchůdcem zvýšenou koncentraci aminokyselin a vitaminů. Naproti tomu Ham's F-12 vychází z média Ham's F-10 a poskytuje doplňkovou sadu základních složek.
Pro podporu optimálního růstu buněk je běžnou praxí doplnit DMEM:Ham's F12 o FBS v typické koncentraci 5 až 10 %. Tento přídavek je nezbytný, protože médium postrádá růstové hormony, lipidy a proteiny, které jsou pro vývoj buněk klíčové.
DMEM:Ham's F12 obsahuje systém pH pufru a často se doplňuje fenolovou červení, indikátorem pH. Kultivace buněk v DMEM:Ham's F12 nebo v jakémkoli jiném médiu využívajícím hydrogenuhličitanový pufrovací systém vyžaduje řízené prostředí s 5 až 10 % CO2, aby se udržely vhodné hodnoty pH.
Kontrola kvality
- Sterilně filtrovaná
Skladování a doba použitelnosti
- Skladujte při teplotě +2 °C až +8 °C, chráněné před světlem.
- Po otevření skladujte při 4 °C a spotřebujte do 6-8 týdnů.
Přepravní podmínky
- Okolní teplota
Údržba
- Uchovávejte v chladu při teplotě +2°C až +8°C v temnu. Vyhněte se zmrazování a častému zahřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu výrobku.
- Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné spotřebiče.
- Pokud má být použita pouze část média, odeberte požadované množství a před použitím jej zahřejte na pokojovou teplotu.
Složení
| Kategorie | Složky | Koncentrace (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycin | 18.75 |
| L-Alanin | 4.45 | |
| L-Arginin HCl | 147.50 | |
| L-Asparagin H₂O | 7.50 | |
| Kyselina L-asparagová | 6.65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystin 2 HCl | 31.29 | |
| Kyselina L-glutamová | 7.35 | |
| L-Glutamin | 365.00 | |
| L-histidin HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucin | 54.47 | |
| L-leucin | 59.05 | |
| L-Lysin HCl | 91.25 | |
| L-methionin | 17.24 | |
| L-fenylalanin | 35.48 | |
| L-Prolin | 17.25 | |
| L-serin | 26.25 | |
| L-Treonin | 53.45 | |
| L-tryptofan | 9.02 | |
| L-tyrosin disodná sůl | 48.10 | |
| L-Valin | 52.85 | |
| Vitamíny | D-biotin | 0.0035 |
| Cholin chlorid | 8.98 | |
| D-pantothenát vápenatý | 2.24 | |
| Kyselina listová | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nikotinamid | 2.02 | |
| Pyridoxin HCl | 0.031 | |
| Pyridoxal HCl | 2.00 | |
| Riboflavin | 0.219 | |
| Thiamin HCl | 2.17 | |
| Vitamin B12 | 0.68 | |
| Anorganické soli | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Ostatní složky | D-glukóza | 3151.00 |
| Hypoxantin | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Kyselina linolová | 0.042 | |
| Kyselina lipoová | 0.105 | |
| Sodná sůl fenolové červeně | 8.63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0.081 | |
| Pyruvát sodný | 55.00 | |
| Thymidin | 0.365 |