HEK293 adaptovaný na suspenzi
500,00 €*
Produkty jsou dodávány zmrazené v suchém ledu v kryotrubkách. Každá kryotrubka obvykle obsahuje 3 × 10 6 buněk pro adhezivní linie nebo 5 × 106 buněk pro suspenzní linie (podrobnosti najdete v certifikátu analýzy šarže).
Obecné informace
| Popis | Buněčná linie HEK293 adaptovaná na suspenzi je variantou buněk lidské embryonální ledviny 293 (HEK293), která byla upravena tak, aby rostla v suspenzi namísto v adherentní kultuře. Tato úprava je důležitá pro průmyslové aplikace, kde je vyžadována rozsáhlá produkce proteinů. Buňky si zachovávají mnoho vlastností původní linie HEK293, včetně robustní účinnosti transientní transfekce a schopnosti posttranslačně modifikovat exprimované proteiny podobně jako nativní lidské buňky. Tyto buňky jsou ceněny zejména v biotechnologickém a farmaceutickém průmyslu pro výrobu rekombinantních proteinů a virů pro genovou terapii a vývoj vakcín. Přizpůsobení suspenzní kultuře umožňuje snadnější škálovatelnost a zjednodušuje proces sklizně, což je vhodnější pro komerční bioprocesy. Buněčná linie HEK293 adaptovaná na suspenzní kulturu podporuje různé systémy produkce virů, včetně adenoviru, lentiviru a adenoasociovaného viru (AAV), které jsou klíčové pro terapeutické aplikace a výzkum. Celkově je buněčná linie HEK293 adaptovaná na suspenzi klíčovým nástrojem v oblasti molekulární biologie a bioprocesingu, který poskytuje univerzální platformu pro produkci různých biologicky aktivních molekul. Její snadná genetická manipulace a schopnost produkovat proteiny, které jsou správně složené a posttranslačně modifikované podle vzorů lidských buněk, z ní činí nepostradatelný zdroj v mnoha pokročilých terapeutických a výzkumných prostředích. |
|---|---|
| Organismus | Člověk |
| Tkáň | Ledviny |
| Aplikace | Transfekční hostitel |
Charakteristika
| Věk | Plod |
|---|---|
| Pohlaví | Ženy |
| Morfologie | Kulaté |
| Růstové vlastnosti | Zavěšení |
Regulační údaje
| Citace | HEK293 adaptovaná suspenze (katalogové číslo Cytion 300686) |
|---|---|
| Úroveň biologické bezpečnosti | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0045 |
| Status GMO | GMO-S1: Tato buněčná linie HEK293 přizpůsobená pro suspenzi obsahuje sekvence E1 odvozené od adenoviru 5 z rodičovské linie HEK293, které podporují vysokou proliferační schopnost a expresi proteinů. Modifikace je stabilně přítomna v transformovaných embryonálních ledvinových buňkách. Tato klasifikace platí pouze v Německu a jinde se může lišit. |
Biomolekulární data
| Exprese receptorů | Vitronektin |
|---|---|
| Exprese bílkovin | CEA negativní, p53 pozitivní |
| Tumorigenní | U nahých myší |
| Vnímavost k virům | Transformované pomocí adenovirusové 5 DNA adenovirusové 5 DNA |
Zpracování
| Kultivační médium | Panserin 293S (PanBiotech, Německo) |
|---|---|
| Doplňky | Nejsou nutné žádné doplňky |
| Disociační činidlo | Není vyžadováno |
| Subkultivace | Udržujte suspenzní buňky v hustotě mezi 5 x 105 a 2-3 x 106 buněk/ml v Eppendorfových lahvích na buněčné kultivaci na třepačce v inkubátoru při teplotě 37 °C/5 % CO2. Jakmile hustota buněk dosáhne 2-3 x 106 buněk/ml, proveďte subkultivaci. Buňky opatrně uvolněte, aby nedošlo k jejich shlukování. Jakmile je dosaženo buněčné hustoty 1–2 x 106 buněk/ml, buňky se odeberou centrifugací při 200 x g po dobu 5 minut a supernatant se zlikviduje. Zřeďte v odpovídajícím objemu čerstvého, předehřátého kultivačního média a spočítejte buňky, abyste získali informace o životaschopnosti a počtu buněk. Buňky se shromáždí centrifugací při 200xg po dobu 5 minut a supernatant se zlikviduje. Buňky se resuspendují v odpovídajícím objemu mrazicího média a znovu se spočítají. Životaschopnost buněk by měla být >>80 %, doporučuje se hustota buněk 5–10 milionů buněk/ml. Pipetujte buňky do předem označených kryovialek. Použijte buď mrazicí nádobu CoolCell, nebo mrazák s řízenou rychlostí, aby byla zajištěna rychlost ochlazování 1 °C/min. |
| Hustota výsevu | 5 x 105 buněk/ml |
| Obnova tekutin | 2 až 3krát týdně |
| Obnova po rozmrazení | Kultury zahajte při hustotě 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk na úrovni 2–3 x 106 buněk/ml. Inkubujte při teplotě 37 °C/5 % CO2 na buněčném třepačce při 100–150 ot./min. |
| Zmrazovací médium | Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení. |
| Rozmrazování a kultivace buněk |
|
| Inkubační atmosféra | 37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra. |
| Povlak baňky | Pro optimální uchycení a životaschopnost po rozmrazení doporučujeme používat baňky nebo destičky potažené kolagenem. |
| Postup zmrazování | Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu. |
| Přepravní podmínky | Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu. |
| Podmínky skladování | Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku. |
Kontrola kvality / Genetický profil / HLA
| Sterilita | Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy. Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám. |
|---|---|
| Profil STR |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,14
D16S539: 9
D5S818: 8,9
D7S820: 11,12
TH01: 7,9.3
TPOX: 11
vWA: 16,19
D3S1358: 15,17
D21S11: 28,30.2
D18S51: 18
Penta E: 7,15
Penta D: 9,10
D8S1179: 12,14
FGA: 23
|
Certifikát o analýze (CoA)
| Číslo pozemku | Typ certifikátu | Datum | Katalogové číslo |
|---|---|---|---|
| 300686-171125 | Certifikát o analýze | 15. Jan. 2026 | 300686 |
Dohoda o převodu materiálu
Pokud máte v úmyslu používat buněčné linie Cytion výhradně pro interní výzkum na jednom výzkumném pracovišti, vyplňte a podepište naši smlouvu o převodu materiálu (MTA) a přiložte ji k vaší objednávce.
Pro jakékoli komerční použití – včetně, ale nejen, práce za úplatu, testování kontroly kvality, uvolňování produktů, diagnostické použití nebo regulační studie – vyplňte prosím formulář zamýšleného použití, abychom mohli připravit vhodnou smlouvu přizpůsobenou vašemu projektu.
Upozornění: MTA se vztahuje pouze na určité buněčné linie. Pokud se toto oznámení a dokument MTA objeví na stránce produktu, smlouva je platná. U buněčných linií, na které se MTA nevztahuje, nebude odkaz na smlouvu zobrazen. MTA není platná pro zákazníky v Americe, Číně nebo na Tchaj-wanu. Chcete-li obdržet příslušnou smlouvu, kontaktujte naši americkou pobočku.
-
Požadované produkty
Požadované produkty
Mrazicí médium CM-1 - 50 mlVarianty kryokonzervačních médií: 50 mlMrazicí médium CM-1 společnosti Cytion je nejmodernější kryokonzervační médium určené k zajištění nejvyšší úrovně životaschopnosti a funkčnosti buněk po rozmrazení. Toto univerzální médium je vhodné pro široké spektrum buněčných typů, včetně lidských i zvířecích buněk, což z něj činí základní nástroj pro různé výzkumné aplikace. Médium Freeze Medium CM-1, jehož složení obsahuje pečlivě vyváženou kombinaci kryoprotektantů a základních živin, minimalizuje tvorbu ledových krystalů a buněčný stres během procesu zmrazování, čímž zachovává buněčnou integritu.
Mezi hlavní vlastnosti Freeze Medium CM-1 patří:
Široká kompatibilita: Účinné pro širokou škálu buněčných typů, včetně primárních buněk, kmenových buněk a zavedených buněčných linií.
Vysoká životaschopnost: Optimalizováno pro maximální obnovu a životaschopnost buněk po rozmrazení, což zajišťuje spolehlivé výsledky experimentů.
Připraveno k použití: Pohodlně připravené a sterilizované pro okamžité použití, což zkracuje dobu přípravy a snižuje riziko kontaminace.
Zvýšená stabilita: Udržuje konzistentní výkonnost za standardních podmínek kryokonzervace a zajišťuje reprodukovatelné výsledky.
Dlouhá skladovatelnost: CM-1 je médium pro kryokonzervaci obsahující sérum, připravené k použití, které lze uchovávat v chladničce až jeden rok.
Použití přípravku CM-1 ke zmrazování buněk
Chcete-li použít CM-1 ke zmrazení adherentních i suspenzních buněk, postupujte podle následujících kroků
Pro adherentní buňky je omyjte a oddělte od kultivačního substrátu. U suspenzních buněk přejděte přímo k dalšímu kroku.
Spočítejte buňky, abyste zajistili jejich správnou koncentraci.
Odstřeďte buňky, abyste je peletovali, a poté je znovu rozpusťte v mrazicím médiu CM-1.
Resuspendované buňky přeneste do kryovialek.
Před přenosem buněk do dlouhodobého skladu použijte metodu pomalého zmrazování
Metoda
Popis
Kroky
❄️
Ruční zmrazení
Postupná metoda zahrnující postupné snižování teploty pro zajištění životaschopnosti buněk
1️⃣ Umístěte buňky do mrazicího média do mrazničky o teplotě 4 °C na 40 minut.
2️⃣ Přeneste na 24 hodin do mrazničky o teplotě -80 °C.
3️⃣ Pro dlouhodobé uchování uchovávejte buňky v tekutém dusíku
❄️
Použití přístroje Mr. Frosty
Praktické zařízení, které umožňuje řízenou rychlost zmrazování bez použití elektrické energie
1️⃣ Připravte buňky do kryovialek s mrazicím médiem.
2️⃣ Umístěte kryovialy do nádoby Mr. Frosty.
3️⃣ Před přenesením do kapalného dusíku uchovávejte při teplotě -80 °C po dobu 24 hodin
❄️
Mraznička s řízenou rychlostí
Vysoce přesný mrazák od společnosti Thermo Fisher nebo jiných výrobců určený k řízenému snižování teploty
1️⃣ Zařízení naprogramujte tak, aby postupně snižovalo teplotu.
2️⃣ Vložte připravené buňky do mrazničky.
3️⃣ Po skončení mrazicího cyklu přeneste buňky do tekutého dusíku
Kryovaky skladujte při teplotě nižší než -130 °C nebo v kapalném dusíku pro dlouhodobé uchování.
Složení
Obsahuje FBS, DMSO, glukózu, soli
Pufrovací schopnost: pH = 7,2 až 7,6
Mrazicí médium CM-1 společnosti Cytion nabízí spolehlivé řešení pro kryokonzervaci, které zajišťuje vysokou životaschopnost a funkčnost buněk po rozmrazení pro širokou škálu výzkumných aplikací.59,00 €*AccutaseVarianty: 100 mlReagencie pro disociaci buněk Accutase
- šetrná alternativa trypsinu
Accutase je roztok pro oddělování buněk, který přináší revoluci v oblasti buněčných kultur. Jedná se o směs proteolytických a kolagenolytických enzymů, která napodobuje působení trypsinu a kolagenázy. Na rozdíl od trypsinu neobsahuje Accutase žádné savčí ani bakteriální složky a je mnohem šetrnější k buňkám, což z ní činí ideální řešení pro rutinní oddělování buněk od standardního plastového nádobí pro tkáňové kultury a plastového nádobí s adhezním povlakem. V tomto příspěvku na blogu se budeme zabývat výhodami a použitím přípravku Accutase a tím, jak mění pravidla hry v oblasti buněčných kultur.
Výhody přípravku Accutase
Přípravek Accutase má oproti tradičním roztokům trypsinu několik výhod. Zaprvé ji lze použít vždy, když je potřeba šetrně a účinně oddělit jakoukoli adherentní buněčnou linii, takže je přímou náhradou trypsinu. Za druhé, Accutase funguje velmi dobře na embryonálních a neuronálních kmenových buňkách a bylo prokázáno, že zachovává životaschopnost těchto buněk i po pasážování. Za třetí, Accutase zachovává většinu epitopů pro následnou analýzu průtokovou cytometrií, takže je ideální pro analýzu markerů buněčného povrchu.
Navíc Accutase nemusí být při pasážování adherentních buněk neutralizována. Přidání dalšího média po rozdělení buněk Accutase zředí, takže již není schopna buňky oddělit. Tím se eliminuje nutnost inaktivního kroku a šetří se čas techniků buněčných kultur. A konečně, Accutase se nemusí alikvotovat a lahvička je stabilní v chladničce po dobu 2 měsíců.
Použití přípravku Accutase
Accutase je přímou náhradou roztoku trypsinu a lze ji použít k pasážování buněčných linií. Kromě toho se Accutase dobře osvědčuje při oddělování buněk pro analýzu mnoha povrchových buněčných markerů pomocí průtokové cytometrie a pro třídění buněk. Další následné aplikace ošetření Accutase zahrnují analýzu povrchových markerů buněk, test růstu virů, buněčnou proliferaci, testy migrace nádorových buněk, rutinní pasážování buněk, škálování výroby (bioreaktor) a průtokovou cytometrii.
Složení přípravku Accutase
Accutase neobsahuje žádné savčí ani bakteriální složky a je směsí přírodních enzymů s proteolytickou a kolagenolytickou enzymovou aktivitou. Její složení je mnohem nižší než koncentrace trypsinu a kolagenázy, takže je méně toxická a šetrnější, ale stejně účinná.
Účinnost přípravku Accutase
Bylo prokázáno, že Accutase je účinná při oddělování primárních a kmenových buněk a udržování vysoké životaschopnosti buněk ve srovnání s enzymy živočišného původu, jako je trypsin. po 10 minutách je obnoveno 100 % buněk a díky autodigesci přípravku Accutase není na škodu ponechat buňky v přípravku Accutase až 45 minut.
Shrnutí
Závěrem lze říci, že Accutase je výkonné řešení, které mění pravidla hry v oblasti buněčných kultur. Díky své šetrnosti, účinnosti a všestrannosti je Accutase ideální alternativou trypsinu. Pokud hledáte spolehlivé a účinné řešení pro oddělování buněk, Accutase je řešením pro vás.75,00 €*Antibiotický/antimykotický roztok (100x)Přehled produktů
Objem: 100 ml Skladování: ≤-15 °C Sterilita: Sterilně filtrováno
Antibiotický/antimykotický roztok (100x ) je sterilní koncentrát připravený k použití, určený ke snížení rizika mikrobiální kontaminace v buněčných kulturách a příbuzných laboratorních aplikacích. Tento 100x roztok obsahuje osvědčenou kombinaci penicilinu, streptomycinu a amfotericinu B, která poskytuje široké spektrum antimikrobiální aktivity proti grampozitivním a gramnegativním bakteriím, kvasinkám a vláknitým houbám. Složení je vhodné pro použití v eukaryotických buněčných kulturách, bakteriálních médiích a dalších systémech citlivých na kontaminaci, což podporuje čistý a konzistentní laboratorní provoz.
Použití a výhody Tento roztok je optimalizován pro rutinní výzkumné protokoly a je široce používán k udržování aseptických podmínek v pracovních postupech buněčných kultur. Nabízí spolehlivý výkon v prostředí citlivém na kontaminaci a pomáhá výzkumníkům snížit riziko přemnožení mikroorganismů, aniž by bylo ohroženo zdraví buněk nebo reprodukovatelnost experimentů. Sterilně filtrované složení eliminuje potřebu dalších solubilizačních kroků, čímž podporuje zefektivnění přípravy médií a snižuje variabilitu každodenních laboratorních postupů.
Použití a kompatibilita Pro dosažení standardních pracovních koncentrací roztok nařeďte v poměru 1:100 do kompletního kultivačního média. Produkt je kompatibilní se širokou škálou savčích buněčných linií a základních médií. Díky stálé skladové dostupnosti mohou výzkumní pracovníci těžit ze spolehlivé kontinuity dodávek a zjednodušeného plánování logistiky. Roztok by měl být skladován při teplotě ≤ -15 °C a chráněn před opakovanými cykly zmrazování a rozmrazování, aby byla zachována jeho stabilita. Pouze pro výzkumné použití. Není určeno k použití při diagnostických nebo terapeutických postupech. Není určeno k použití u lidí nebo zvířat.45,00 €*PBSRoztok fyziologického roztoku s fosfátovým pufrem (PBS)
Fosfátem pufrovaný fyziologický roztok (PBS) je široce používaný pufrovací roztok v biologickém a chemickém výzkumu. Hraje klíčovou roli při udržování rovnováhy pH a osmolarity během různých experimentálních postupů, včetně zpracování tkání a buněčných kultur. Náš roztok PBS je pečlivě sestaven z vysoce čistých složek, aby byla zajištěna stabilita a spolehlivost při každém experimentu. Osmolarita a koncentrace iontů našeho roztoku PBS věrně kopíruje osmolaritu a koncentraci iontů v lidském těle, takže je izotonický a netoxický pro většinu buněk.
Složení našeho roztoku PBS
Náš roztok PBS je směs fosfátových pufrů a fyziologických roztoků ultračisté kvality s upraveným pH. V pracovní koncentraci 1X obsahuje:
8000 mg/l chloridu sodného (NaCl)
200 mg/l chloridu draselného (KCl)
1150 mg/L bezvodý fosforečnan sodný dvoubazický (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforečnan draselný jednobazický bezvodý (KH2PO4)
Toto složení zajišťuje optimální pH a iontovou rovnováhu vhodnou pro širokou škálu biologických aplikací.
Aplikace našeho roztoku PBS
Náš roztok PBS je ideální pro různé aplikace v biologickém výzkumu. Díky svým izotonickým a netoxickým vlastnostem je vhodný pro ředění látek a oplachování buněčných nádob. Roztoky PBS s obsahem EDTA jsou účinné pro uvolnění připojených a shlukovaných buněk. Do PBS by se však neměly přidávat dvojmocné kovy, jako je zinek, protože mohou způsobit srážení. V takových případech se doporučují Goodovy pufry. Kromě toho je náš roztok PBS přijatelnou alternativou virového transportního média pro transport a skladování RNA virů, včetně SARS-CoV-2.
Kontrola kvality
Sterilně filtrované
Skladování a doba použitelnosti
Skladujte při teplotě +2 °C až +25 °C, chráněné před světlem.
Po otevření skladujte při teplotě 2 °C až 25 °C a spotřebujte do 24 měsíců.
Přepravní podmínky
Okolní teplota
Údržba
Uchovávejte v chladu při teplotě +2°C až +8°C v temnu. Vyhněte se zmrazování a častému zahřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu výrobku.
Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné spotřebiče.
Pokud má být použita pouze část média, odeberte požadované množství a před použitím jej zahřejte na pokojovou teplotu.
Složení
Kategorie
Složky
Koncentrace (mg/l)
Soli
Chlorid draselný
200
Fosforečnan draselný monobazický bezvodý
200
Chlorid sodný
8000
Fosforečnan sodný dvoubazický bezvodý
115020,00 €* -
Související produkty
Související produkty