Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3
Představujeme médium Ham's F-12K (Kaighn's), specializovanou modifikaci média Ham's F-12 navrženou tak, aby splňovala jedinečné požadavky biologického výzkumu. Toto pokročilé médium nabízí výrazné výhody, které zlepšují kultivaci primárních lidských hepatocytů, stejně jako potkaních a kuřecích jaterních buněk, zejména v podmínkách se sníženým obsahem séra.
Médium Ham's F-12K (Kaighn's) je pečlivě sestaveno tak, aby optimalizovalo podmínky kultivace buněk. Má obohacené složení, které poskytuje zvýšené množství základních složek, jako jsou aminokyseliny a pyruvát sodný, a také dalších prvků včetně putrescinu, thymidinu, hypoxantinu a zinku. Tyto přídavky umožňují výzkumným pracovníkům doplnit médium o minimální množství séra nebo definovaných složek pro specifické typy buněk, což usnadňuje přesné experimentální podmínky.
Pozoruhodné je, že Hamovo médium F-12K (Kaighnovo) neobsahuje proteiny ani růstové faktory. V důsledku toho je často nutné doplnění růstovými faktory a fetálním hovězím sérem (FBS), což výzkumníkům umožňuje přizpůsobit médium požadavkům jejich specifických buněčných linií. Pro dosažení optimálního výkonu musí být koncentrace FBS pečlivě optimalizována pro každou buněčnou linii, čímž se zajistí optimální růst a funkčnost.
Pro udržení fyziologického pH využívá médium Ham's F-12K (Kaighn's) pufrovací systém hydrogenuhličitanu sodného (2,5 g/l), což vyžaduje kontrolované prostředí s 5-10 % CO2 během kultivace. To zajišťuje, že pH média zůstává v ideálním rozmezí pro růst a životaschopnost buněk
Kontrola kvality
- pH = 7,2 +/- 0,02 při 20-25 °C.
- Každá šarže byla testována na sterilitu a nepřítomnost mykoplazmy a bakterií.
Údržba
- Uchovávejte v chladu při teplotě +2 °C až +8 °C ve tmě. Zmrazení i zahřátí na +37 °C snižuje kvalitu přípravku na minimum.
- Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolovatelné zdroje tepla (např. mikrovlnné přístroje).
- Pokud má být použita pouze část média, odeberte toto množství z lahvičky a zahřejte jej při pokojové teplotě.
- Doba použitelnosti jakéhokoli média kromě základního média je 8 týdnů od data výroby.
Složení
| Složení | mg/l | |
| Anorganické soli | Chlorid vápenatý x 2H2O | 135,24 |
| Síran měďnatý(II) x 5H2O | 0,00 | |
| Síran železnatý x 7H2O | 0,83 | |
| Chlorid hořečnatý x 6H2O | 105,72 | |
| Síran hořečnatý x 7H2O | 394,49 | |
| Chlorid draselný | 283,29 | |
| Dihydrogenfosforečnan draselný | 58,52 | |
| Chlorid sodný | 7597,20 | |
| hydrogenfosforečnan sodný bezvodý |
115,02 | |
| Síran zinečnatý x 7H2O | 0,14 | |
| Ostatní složky | D(+)-glukóza bezvodá | 1260,00 |
| Hypoxantin | 4,08 | |
| DL-α-Lipoová kyselina | 0,21 | |
| Fenolová červeň | 3,00 | |
| Putrescin x 2HCl | 0,32 | |
| Pyruvát sodný | 220,00 | |
| NaHCO3 | 2500,00 | |
| Thymidine | 0,73 | |
| Aminokyseliny | L-Alanin | 17,82 |
| L-Arginin x HCl | 421,40 | |
| L-Asparagin x H2O | 30,02 | |
| Kyselina L-asparagová | 26,62 | |
| L-cystein x HCl x H2O | 70,24 | |
| L-Glutamin | 292,20 | |
| Kyselina L-glutamová | 29,42 | |
| Glycin | 15,01 | |
| L-histidin x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-Isoleucin | 7,87 | |
| L-leucin | 26,24 | |
| L-Lysin x HCl | 73,04 | |
| L-methionin | 8,95 | |
| L-fenylalanin | 9,91 | |
| L-Prolin | 69,06 | |
| L-serin | 21,02 | |
| L-treonin | 23,82 | |
| L-tryptofan | 4,08 | |
| L-Tyrosin | 10,87 | |
| L-Valin | 23,42 | |
| Vitamíny | D(+)-Biotin | 0,07 |
| D-pantothenát vápenatý | 0,48 | |
| Cholinchlorid | 13,96 | |
| Kyselina listová | 1,32 | |
| myo-Inositol | 18,02 | |
| Nikotinamid | 0,04 | |
| Pyridoxin x HCl | 0,06 | |
| Riboflavin | 0,04 | |
| Thiamin x HCl | 0,34 | |
| Vitamin B12 | 1,36 |