RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3
Médium RPMI 1640, známé také jako RPMI médium, je vysoce univerzální buněčné kultivační médium, které se hojně využívá v biologickém výzkumu ke kultivaci různých savčích buněk. Toto médium, které bylo vyvinuto Georgem E. Moorem, Robertem E. Gernerem a H. Addisonem Franklinem v roce 1966 ve známém Roswell Park Comprehensive Cancer Center, získalo svůj název podle svého původu v Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Médium RPMI 1640, původně určené k podpoře růstu lidských leukemických buněk v suspenzních i monovrstvých kulturách, se díky úpravám výzkumníků a komerčních dodavatelů vyvinulo tak, aby bylo vhodné pro nejrůznější savčí buňky. Je mimořádně kompatibilní s buněčnými liniemi, jako jsou HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyty a karcinomy.
Médium RPMI 1640 se od ostatních médií pro kultivaci buněk odlišuje svým jedinečným složením. Obsahuje značné množství fosfátů, aminokyselin a vitaminů. Zejména obsahuje biotin, vitamin B12 a PABA, které se v Eagle's Minimal Essential Medium nebo Dulbecco's Modified Eagle Medium nevyskytují. Kromě toho médium RPMI 1640 vykazuje výrazně zvýšené koncentrace vitaminů inositolu a cholinu. Neobsahuje však bílkoviny, lipidy ani růstové faktory. V důsledku toho je běžně vyžadováno doplnění 10% fetálního hovězího séra (FBS), aby byly zajištěny optimální podmínky pro růst buněk.
Pufrovací systém média RPMI 1640 je založen na hydrogenuhličitanu sodném a k udržení fyziologicky vhodného pH vyžaduje prostředí s 5-10 % CO2. Začlenění redukčního činidla glutathionu dále odlišuje toto médium od ostatních.
Kontrola kvality
- Sterilně filtrované
Skladování a trvanlivost
- Skladujte při teplotě +2 °C až +8 °C, chraňte před světlem.
- Po otevření skladujte při 4 °C a spotřebujte do 6-8 týdnů.
Přepravní podmínky
- Okolní teplota
Údržba
- Uchovávejte v chladu při teplotě +2°C až +8°C v temnu. Vyhněte se zmrazování a častému zahřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu výrobku.
- Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné spotřebiče.
- Pokud má být použita pouze část média, odeberte požadované množství a před použitím jej zahřejte na pokojovou teplotu.
Složení
| Kategorie | Složky | Koncentrace (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycin | 10.00 |
| L-Alanyl-L-Glutamin | 434.40 | |
| L-arginin | 200.00 | |
| L-AsparaginH2O | 56.82 | |
| Kyselina L-asparagová | 20.00 | |
| L-Cystin 2HCl | 65.20 | |
| Kyselina L-glutamová | 20.00 | |
| L-histidin HClH2O | 20.27 | |
| L-Hydroxy-L-Prolin | 20.00 | |
| L-Isoleucin | 50.00 | |
| L-leucin | 50.00 | |
| L-Lysin HCl | 40.00 | |
| L-methionin | 15.00 | |
| L-fenylalanin | 15.00 | |
| L-Prolin | 20.00 | |
| L-serin | 30.00 | |
| L-Treonin | 20.00 | |
| L-tryptofan | 5.00 | |
| L-Tyrosin 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-Valin | 20.00 | |
| Vitamíny | kyselina p-aminobenzoová | 1.00 |
| D-biotin | 0.20 | |
| Cholinchlorid | 3.00 | |
| D-pantothenát vápenatý | 0.25 | |
| Kyselina listová | 1.00 | |
| myo-Inositol | 35.00 | |
| Nikotinamid | 1.00 | |
| Pyridoxin HCl | 1.00 | |
| Riboflavin | 0.20 | |
| Thiamin HCl | 1.00 | |
| Vitamin B12 | 0.005 | |
| Anorganické soli | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Ostatní složky | D-glukóza | 2000.00 |
| L-Glutathion redukovaný | 1.00 | |
| Sodná sůl fenolové červeně | 5.30 |