DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3
Το DMEM:Ham's F12 είναι ένα ευρέως αναγνωρισμένο και ευρέως χρησιμοποιούμενο βασικό μέσο στην κυτταροκαλλιέργεια για βιολογική έρευνα. Χρησιμεύει ως βασική πηγή θρεπτικών συστατικών για την ανάπτυξη διαφόρων κυτταρικών σειρών θηλαστικών, ιδίως όταν συμπληρώνεται με εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS).
Αυτό το μοναδικό σκεύασμα συνδυάζει Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) και Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) σε ακριβή αναλογία 1:1. Η προσθήκη L-γλουταμίνης ενισχύει περαιτέρω τη σύνθεσή του.
Το DMEM, που προέρχεται από το Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), προσφέρει αυξημένη συγκέντρωση αμινοξέων και βιταμινών σε σύγκριση με τον προκάτοχό του. Αντίθετα, το Ham's F-12 βασίζεται στο μέσο Ham's F-10, παρέχοντας ένα συμπληρωματικό σύνολο βασικών συστατικών.
Για την υποστήριξη της βέλτιστης ανάπτυξης των κυττάρων, είναι κοινή πρακτική να συμπληρώνεται το DMEM:Ham's F12 με FBS σε τυπική συγκέντρωση 5-10%. Η προσθήκη αυτή είναι απαραίτητη, καθώς το μέσο στερείται αυξητικών ορμονών, λιπιδίων και πρωτεϊνών ζωτικής σημασίας για την κυτταρική ανάπτυξη.
Η DMEM:Ham's F12 ενσωματώνει ένα ρυθμιστικό σύστημα pH και συχνά συμπληρώνεται με κόκκινο της φαινόλης, έναν δείκτη pH. Τα καλλιεργούμενα κύτταρα σε DMEM:Ham's F12 ή σε οποιοδήποτε μέσο που χρησιμοποιεί το ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικών, απαιτούν ελεγχόμενο περιβάλλον CO2 5-10% για τη διατήρηση των κατάλληλων επιπέδων pH.
Ποιοτικός έλεγχος
- Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
- Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένο από το φως.
- Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
- Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
- Διατηρείται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
- Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
- Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
| Κατηγορία | Συστατικά | Συγκέντρωση (mg/L) |
| Αμινοξέα | Γλυκίνη | 18.75 |
| L-αλανίνη | 4.45 | |
| L-αργινίνη HCl | 147.50 | |
| L-ασπαραγίνη H₂O | 7.50 | |
| L-ασπαρτικό οξύ | 6.65 | |
| L-κυστεΐνη HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Κυστίνη 2 HCl | 31.29 | |
| L-γλουταμινικό οξύ | 7.35 | |
| L-Γλουταμίνη | 365.00 | |
| L-ιστιδίνη HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Ισολευκίνη | 54.47 | |
| L-λευκίνη | 59.05 | |
| L-Λυσίνη HCl | 91.25 | |
| L-μεθειονίνη | 17.24 | |
| L-φαινυλαλανίνη | 35.48 | |
| L-προλίνη | 17.25 | |
| L-Σερίνη | 26.25 | |
| L-θρεονίνη | 53.45 | |
| L-Τρυπτοφάνη | 9.02 | |
| L-Τυροσίνη Δισόξινο άλας | 48.10 | |
| L-βαλίνη | 52.85 | |
| Βιταμίνες | D-Biotin | 0.0035 |
| Χλωριούχος χολίνη | 8.98 | |
| Παντοθενικό D-ασβέστιο | 2.24 | |
| Φολικό οξύ | 2.66 | |
| myo-Ινοσιτόλη | 12.60 | |
| Νικοτιναμίδιο | 2.02 | |
| Πυριδοξίνη HCl | 0.031 | |
| Πυριδοξαλικό HCl | 2.00 | |
| Ριβοφλαβίνη | 0.219 | |
| Θειαμίνη HCl | 2.17 | |
| Βιταμίνη Β12 | 0.68 | |
| Ανόργανα άλατα | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Άλλα συστατικά | D-γλυκόζη | 3151.00 |
| Υποξανθίνη | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Λινολεϊκό οξύ | 0.042 | |
| Λιποϊκό οξύ | 0.105 | |
| Κόκκινο νατριούχο άλας φαινόλης | 8.63 | |
| Πουτρεσκίνη 2 HCl | 0.081 | |
| Πυρουβικό νάτριο | 55.00 | |
| Θυµιδίνη | 0.365 |