Células NCI-H1975
430,00 €*
Los productos se envían congelados en hielo seco en criotubos. Cada criotubo contiene normalmente 3 × 10 6 células para líneas adherentes o 5 × 106 células para líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).
Información general
| Descripción | La línea celular NCI-H1975 es un modelo bien establecido derivado del carcinoma pulmonar humano de células no pequeñas (CPNM), concretamente del adenocarcinoma. Esta línea celular es especialmente significativa debido a su doble mutación en el gen del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Alberga la mutación activadora L858R en el exón 21 y la mutación T790M en el exón 20, que confiere resistencia a los inhibidores de la tirosina cinasa (TKI) de primera generación, como el gefitinib y el erlotinib. Estas características genéticas hacen del NCI-H1975 una herramienta valiosa para estudiar los mecanismos de resistencia a fármacos y probar inhibidores del EGFR de nueva generación. La mutación T790M altera el bolsillo de unión al ATP del EGFR, lo que reduce la eficacia de los anteriores inhibidores del EGFR al tiempo que mantiene la actividad de señalización del receptor. Esta propiedad ha impulsado la investigación de inhibidores de tercera generación, como el osimertinib, que actúan selectivamente sobre el EGFR mutante T790M sin afectar al EGFR silvestre, reduciendo así los efectos no deseados. Los estudios realizados con el NCI-H1975 han contribuido a comprender los efectos estructurales y funcionales de estas mutaciones en las vías de señalización mediadas por el EGFR, incluidos los efectos descendentes en las vías PI3K/AKT y RAS/RAF/MEK/ERK, que son fundamentales para la proliferación y supervivencia de las células tumorales. Además de su papel en la investigación de la resistencia a fármacos, el NCI-H1975 se emplea en evaluaciones preclínicas de terapias combinadas que pretenden superar la resistencia actuando sobre múltiples vías. Su perfil genético y molecular bien caracterizado, que incluye datos detallados sobre variaciones en el número de copias y paisajes mutacionales, ha consolidado su estatus como modelo esencial en el estudio de la biología del CPNM y el desarrollo terapéutico. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tejido | Pulmón |
| Enfermedad | Adenocarcinoma de pulmón |
| Sinónimos | NCI-H1975, H-1975, NCIH1975 |
Características
| Género | Mujer |
|---|---|
| Etnia | Europea |
| Morfología | Epitelial |
| Propiedades de crecimiento | Adherente |
Datos reglamentarios
| Cita | NCI-H1975 (número de catálogo de Cytion 305067) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccesión | CVCL_1511 |
Datos biomoleculares
Manejo de
| Medio de cultivo | RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suplementos | Complementar el medio con un 10% de FBS |
| Reactivo de disociación | Accutase |
| Subcultivo | Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco. |
| Ratio de división | 1:2 a 1:4 |
| Renovación de fluidos | de 2 a 3 veces por semana |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido. |
| Descongelación y cultivo de células |
|
| Atmósfera de incubación | 37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada. |
| Recubrimiento de matraces | Para una fijación y viabilidad óptimas tras la descongelación, recomendamos utilizar matraces o placas recubiertos de colágeno. |
| Procedimiento de congelación | Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido. |
Control de calidad / Perfil genético / HLA
| Esterilidad | La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia. Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias. |
|---|
Certificado de análisis (CdA)
| Número de lote | Tipo de certificado | Fecha | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305067-210323 | Certificado de análisis | 23. May. 2025 | 305067 |
| 305067-170325 | Certificado de análisis | 23. May. 2025 | 305067 |
Acuerdo de transferencia de material
Si tiene intención de utilizar las líneas celulares Cytion exclusivamente para investigación interna en un único centro de investigación, rellene y firme nuestro Acuerdo de transferencia de material (MTA) y envíelo junto con su pedido.
Para cualquier aplicación comercial, incluyendo, entre otras, trabajos remunerados, pruebas de control de calidad, lanzamiento de productos, uso diagnóstico o estudios normativos, rellene el formulario de uso previsto para que podamos preparar un acuerdo adecuado a su proyecto.
Tenga en cuenta que el MTA solo se aplica a determinadas líneas celulares. Si este aviso y el documento MTA aparecen en la página de un producto, el acuerdo es aplicable. En el caso de las líneas celulares no cubiertas por el MTA, no se mostrará ninguna referencia al acuerdo. El MTA no es válido para clientes de América, China o Taiwán. Póngase en contacto con nuestra entidad en EE. UU. para recibir el acuerdo correspondiente.
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Productos necesarios
Productos necesarios
Medio de congelación CM-1 - 50 mlVariantes de medios de crioconservación: 50 mlEl medio de congelación CM-1 de Cytion es un medio de criopreservación de última generación diseñado para garantizar el máximo nivel de viabilidad y funcionalidad celular tras la descongelación. Este medio versátil es adecuado para un amplio espectro de tipos celulares, incluyendo células humanas y animales, lo que lo convierte en una herramienta esencial para diversas aplicaciones de investigación. Formulado con una combinación meticulosamente equilibrada de crioprotectores y nutrientes esenciales, Freeze Medium CM-1 minimiza la formación de cristales de hielo y el estrés celular durante el proceso de congelación, preservando así la integridad celular.
Las principales características de Freeze Medium CM-1 incluyen:
Amplia compatibilidad: Eficaz para una amplia gama de tipos celulares, incluyendo células primarias, células madre y líneas celulares establecidas.
Alta Viabilidad: Optimizado para maximizar la recuperación y viabilidad celular tras la descongelación, garantizando resultados experimentales fiables.
Listo para usar: Cómodamente preparadas y esterilizadas para su aplicación inmediata, reduciendo el tiempo de preparación y el riesgo de contaminación.
Estabilidad mejorada: Mantiene un rendimiento constante en condiciones de criopreservación estándar, garantizando resultados reproducibles.
Larga vida útil: CM-1 es un medio de criopreservación que contiene suero, listo para usar y que puede almacenarse en el frigorífico hasta un año.
Uso de CM-1 para congelar células
Para utilizar CM-1 para congelar células tanto adherentes como en suspensión, siga estos pasos
Para células adherentes, lavarlas y disociarlas del sustrato de cultivo. Para células en suspensión, proceder directamente al paso siguiente.
Contar las células para asegurarse de que tienen la concentración adecuada.
Centrifugar las células para granularlas y, a continuación, resuspenderlas en medio de congelación CM-1.
Transfiera las células resuspendidas a crioviales.
Utilizar un método de congelación lenta antes de transferir las células al almacenamiento a largo plazo
Método
Descripción
Pasos
❄️
Congelación manual
Un método paso a paso que implica la reducción gradual de la temperatura para garantizar la viabilidad celular
1️⃣ Colocar las células en medio de congelación en un congelador a 4°C durante 40 minutos.
2️⃣ Transferir a un congelador a -80°C durante 24 horas.
3️⃣ Almacenar las células en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo
❄️
Utilización de Mr. Frosty
Un práctico dispositivo que permite velocidades de congelación controladas sin energía eléctrica
1️⃣ Preparar las células en crioviales con medio de congelación.
2️⃣ Colocar los crioviales en el contenedor Mr. Frosty.
3️⃣ Almacenar a -80°C durante 24 horas antes de transferir al nitrógeno líquido
❄️
Congelador de velocidad controlada
Congelador de alta precisión de Thermo Fisher u otros fabricantes diseñado para la reducción controlada de la temperatura
1️⃣ Programar el aparato para que disminuya gradualmente la temperatura.
2️⃣ Colocar las células preparadas en el congelador.
3️⃣ Tras el ciclo de congelación, transfiera las células a nitrógeno líquido
Almacenar los crioviales a temperaturas inferiores a -130°C o en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo.
Ingredientes
Contiene FBS, DMSO, glucosa, sales
Capacidad tampón: pH = 7,2 a 7,6
El Medio de Congelación CM-1 de Cytion ofrece una solución fiable para la criopreservación, asegurando una alta viabilidad celular y funcionalidad post-descongelación para una amplia gama de aplicaciones de investigación.59,00 €*RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamina estable, w: 2,0 g/L NaHCO3El medio RPMI 1640, también conocido como medio RPMI, es un medio de cultivo celular muy versátil ampliamente utilizado en la investigación biológica para cultivar diversas células de mamíferos. Desarrollado por George E. Moore, Robert E. Gerner y H. Addison Franklin en 1966 en el renombrado Roswell Park Comprehensive Cancer Center, este medio debe su nombre a su origen en el Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Inicialmente diseñado para favorecer el crecimiento de células leucémicas humanas tanto en cultivos en suspensión como en monocapa, el medio RPMI 1640 ha evolucionado a través de modificaciones por parte de investigadores y proveedores comerciales hasta convertirse en adecuado para una diversa gama de células de mamíferos. Es excepcionalmente compatible con líneas celulares como HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocitos y carcinomas.
El medio RPMI 1640 se distingue de otros medios de cultivo celular por su composición única. Contiene una cantidad sustancial de fosfato, aminoácidos y vitaminas. En particular, contiene biotina, vitamina B12 y PABA, ausentes en el Medio Esencial Mínimo de Eagle o en el Medio Eagle Modificado de Dulbecco. Además, el medio RPMI 1640 presenta concentraciones significativamente elevadas de vitaminas inositol y colina. Sin embargo, no contiene proteínas, lípidos ni factores de crecimiento. En consecuencia, suele ser necesario complementarlo con un 10% de Suero Fetal Bovino (FBS) para proporcionar unas condiciones óptimas para el crecimiento celular.
El sistema tampón del medio RPMI 1640 se basa en el bicarbonato sódico y necesita un entorno con un 5-10% de CO2 para mantener un pH fisiológicamente adecuado. La inclusión del agente reductor glutatión distingue aún más este medio de otros.
Control de calidad
Filtrado estéril
Almacenamiento y vida útil
Almacenar entre +2°C y +8°C, protegido de la luz.
Una vez abierto, conservar a 4°C y utilizar en un plazo de 6-8 semanas.
Condiciones de envío
Temperatura ambiente
Conservación
Mantener refrigerado a +2°C a +8°C en la oscuridad. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37°C, ya que reduce la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37°C ni utilizar fuentes de calor no controladas, como aparatos de microondas.
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retirar la cantidad necesaria y calentarla a temperatura ambiente antes de su uso.
Composición
Categoría
Componentes
Concentración (mg/L)
Aminoácidos
Glicina
10.00
L-Alanil-L-Glutamina
434.40
L-Arginina
200.00
L-Asparagina H2O
56.82
Ácido L-aspártico
20.00
L-Cistina 2HCl
65.20
Ácido L-glutámico
20.00
L-Histidina HCl H2O
20.27
L-Hidroxi-L-Prolina
20.00
L-Isoleucina
50.00
L-Leucina
50.00
L-Lisina HCl
40.00
L-metionina
15.00
L-Fenilalanina
15.00
L-Prolina
20.00
L-Serina
30.00
L-Treonina
20.00
L-Triptófano
5.00
L-Tirosina 2Na 2H2O
28.83
L-Valina
20.00
Vitaminas
ácido p-amino benzoico
1.00
D-Biotina
0.20
Cloruro de colina
3.00
D-pantotenato cálcico
0.25
Ácido fólico
1.00
mio-Inositol
35.00
Nicotinamida
1.00
HCl de piridoxina
1.00
Riboflavina
0.20
Tiamina HCl
1.00
Vitamina B12
0.005
Sales inorgánicas
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Otros componentes
D-Glucosa
2000.00
L-Glutatión reducido
1.00
Sal sódica roja de fenol
5.3025,00 €*AccutaseVariantes: 100 mlReactivo de disociación celular Accutase
- Una alternativa suave a la tripsina
Accutase es una solución de disociación celular que está revolucionando la industria del cultivo celular. Es una mezcla de enzimas proteolíticas y colagenolíticas que imita la acción de la tripsina y la colagenasa. A diferencia de la tripsina, Accutase no contiene ningún componente mamífero o bacteriano y es mucho más suave con las células, por lo que es una solución ideal para el desprendimiento rutinario de células del material plástico estándar de cultivo de tejidos y del material plástico recubierto de adherencia. En esta entrada del blog, exploraremos los beneficios y usos de Accutase y cómo está cambiando las reglas del juego en el cultivo celular.
Ventajas de Accutase
Accutase tiene varias ventajas sobre las soluciones tradicionales de tripsina. En primer lugar, puede utilizarse siempre que se necesite un desprendimiento suave y eficaz de cualquier línea celular adherente, lo que la convierte en un sustituto directo de la tripsina. En segundo lugar, Accutase funciona extremadamente bien en células madre embrionarias y neuronales, y se ha demostrado que mantiene la viabilidad de estas células después del pasaje. En tercer lugar, Accutase conserva la mayoría de los epítopos para su posterior análisis por citometría de flujo, por lo que es ideal para el análisis de marcadores de superficie celular.
Además, no es necesario neutralizar Accutase al pasar células adherentes. La adición de más medio después de dividir las células diluye Accutase de modo que ya no es capaz de desprender células. Esto elimina la necesidad de un paso de inactivación y ahorra tiempo a los técnicos de cultivo celular. Por último, Accutase no necesita alícuotas y una botella es estable en el frigorífico durante 2 meses.
Aplicaciones de Accutase
Accutase es un sustituto directo de la solución de tripsina y puede utilizarse para el pasaje de líneas celulares. Además, Accutase funciona bien al separar células para el análisis de muchos marcadores de superficie celular mediante citometría de flujo y para la clasificación celular. Otras aplicaciones posteriores del tratamiento con Accutase incluyen el análisis de marcadores de la superficie celular, el ensayo de crecimiento de virus, la proliferación celular, los ensayos de migración de células tumorales, el pasaje celular rutinario, el escalado de la producción (biorreactor) y la citometría de flujo.
Composición de Accutase
Accutase no contiene componentes mamíferos ni bacterianos y es una mezcla enzimática natural con actividad enzimática proteolítica y colagenolítica. Está formulada a una concentración mucho menor que la tripsina y la colagenasa, lo que la hace menos tóxica y más suave, pero igual de eficaz.
Eficacia de Accutase
Accutase ha demostrado ser eficaz en el desprendimiento de células primarias y madre y en el mantenimiento de una alta viabilidad celular en comparación con enzimas de origen animal como la tripsina. el 100% de las células se recuperan al cabo de 10 minutos, y no hay ningún inconveniente en dejar las células en Accutase hasta 45 minutos, gracias a la autodigestión de Accutase.
En resumen
En conclusión, Accutase es una potente solución que está cambiando las reglas del juego en el cultivo celular. Por su naturaleza suave, eficacia y versatilidad, Accutase es la alternativa ideal a la tripsina. Si está buscando una solución fiable y eficaz para el desprendimiento celular, Accutase es la solución para usted.75,00 €*Solución antibiótica/antimicótica (100x)Descripción general del producto
Volumen: 100 ml Almacenamiento: ≤-15°C Esterilidad: Filtrado estéril
La Solución Antibiótica/Antimicótica (100x ) es un concentrado estéril, listo para usar, diseñado para reducir los riesgos de contaminación microbiana en cultivos celulares y aplicaciones de laboratorio relacionadas. Esta solución 100x contiene una combinación bien establecida de penicilina, estreptomicina y anfotericina B, que proporciona una actividad antimicrobiana de amplio espectro contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, levaduras y hongos filamentosos. La formulación es adecuada para su uso en cultivos de células eucariotas, medios bacterianos y otros sistemas sensibles a la contaminación, lo que favorece unas operaciones de laboratorio limpias y consistentes.
Aplicación y ventajas Optimizada para protocolos de investigación rutinarios, esta solución se utiliza ampliamente para mantener condiciones asépticas en flujos de trabajo de cultivos celulares. Ofrece un rendimiento fiable en entornos sensibles a la contaminación, ayudando a los investigadores a reducir el riesgo de sobrecrecimiento microbiano sin comprometer la salud celular o la reproducibilidad experimental. La formulación filtrada estéril elimina la necesidad de pasos adicionales de solubilización, lo que permite una preparación racionalizada de los medios y reduce la variabilidad en los procedimientos diarios de laboratorio.
Uso y compatibilidad Para alcanzar concentraciones de trabajo estándar, diluya la solución 1:100 en su medio de cultivo completo. El producto es compatible con una amplia gama de líneas celulares de mamíferos y medios basales. Con una disponibilidad de stock constante, los investigadores se benefician de una continuidad de suministro fiable y una planificación logística simplificada. La solución debe almacenarse a ≤ -15 °C y protegerse de ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la estabilidad. Sólo para uso en investigación. No para uso en procedimientos diagnósticos o terapéuticos. No para uso en humanos o animales.45,00 €*PBSSolución salina tamponada con fosfato (PBS)
La solución salina tamponada con fosfato (PBS) es una solución tampón muy utilizada en la investigación biológica y química. Desempeña un papel crucial en el mantenimiento del equilibrio del pH y la osmolaridad durante diversos procedimientos experimentales, como el procesamiento de tejidos y el cultivo celular. Nuestra solución PBS está meticulosamente formulada con ingredientes de gran pureza para garantizar la estabilidad y fiabilidad en cada experimento. La osmolaridad y las concentraciones de iones de nuestra PBS imitan fielmente las del cuerpo humano, por lo que es isotónica y no tóxica para la mayoría de las células.
Composición de nuestra solución PBS
Nuestra solución PBS es una mezcla de soluciones salinas y tampones de fosfato de grado ultrapuro con pH ajustado. A una concentración de trabajo de 1X, contiene:
8000 mg/L de cloruro sódico (NaCl)
200 mg/L Cloruro potásico (KCl)
1150 mg/L Fosfato sódico dibásico anhidro (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfato potásico monobásico anhidro (KH2PO4)
Esta composición garantiza un pH y un equilibrio iónico óptimos, adecuados para una amplia gama de aplicaciones biológicas.
Aplicaciones de nuestra solución PBS
Nuestra solución PBS es ideal para diversas aplicaciones en investigación biológica. Sus propiedades isotónicas y no tóxicas la hacen adecuada para la dilución de sustancias y el enjuague de contenedores celulares. Las soluciones de PBS que contienen EDTA son eficaces para desprender células adheridas y aglomeradas. Sin embargo, los metales divalentes como el zinc no deben añadirse al PBS, ya que pueden provocar precipitación. En tales casos, se recomiendan los tampones de Good. Además, nuestra solución de PBS es una alternativa aceptable al medio de transporte viral para el transporte y almacenamiento de virus de ARN, incluido el SARS-CoV-2.
Control de calidad
Filtrado estéril
Almacenamiento y vida útil
Almacenar a +2°C a +25°C, protegido de la luz.
Una vez abierto, conservar entre 2°C y 25°C y utilizar antes de 24 meses.
Condiciones de envío
Temperatura ambiente
Conservación
Conservar refrigerado a +2°C a +8°C en la oscuridad. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37°C, ya que reduce la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37°C ni utilizar fuentes de calor no controladas, como aparatos de microondas.
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retirar la cantidad necesaria y calentarla a temperatura ambiente antes de su uso.
Composición
Categoría
Componentes
Concentración (mg/L)
Sales
Cloruro de potasio
200
Fosfato potásico monobásico anhidro
200
Cloruro sódico
8000
Fosfato sódico dibásico anhidro
115020,00 €* -
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