DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 on laialt tunnustatud ja laialdaselt kasutatav põhikeskkond bioloogiliste uuringute rakukultuurides. See on põhiline toitainete allikas erinevate imetajate rakuliinide kasvuks, eriti kui seda täiendatakse veise loote seerumiga (FBS).
See ainulaadne koostis ühendab Dulbecco modifitseeritud Eagle's Medium (DMEM) ja Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) täpses vahekorras 1:1. L-glutamiini lisamine parandab selle koostist veelgi.
DMEM, mis on saadud Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), pakub võrreldes oma eelkäijaga suuremat aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooni. Seevastu Ham's F-12 põhineb Ham's F-10 keskkonnas, pakkudes täiendavat komplekti olulisi komponente.
Rakkude optimaalse kasvu toetamiseks on tavaline tava täiendada DMEM:Ham's F12-d FBSiga, mille tüüpiline kontsentratsioon on 5-10%. See lisamine on vajalik, kuna keskkonnas puuduvad kasvuhormoonid, lipiidid ja rakkude arenguks olulised valgud.
DMEM:Ham's F12 sisaldab pH-puhvrisüsteemi ja sellele lisatakse sageli pH-indikaatorit fenoolpunast. DMEM:Ham's F12 või mis tahes bikarbonaatpuhvrisüsteemi kasutavas keskkonnas kasvatatavad rakud vajavad kontrollitud CO2-keskkonda 5-10%, et säilitada sobiv pH-tase.
Kvaliteedikontroll
- Steriilselt filtreeritud
Säilitamine ja säilivusaeg
- Säilitada +2°C kuni +8°C juures, valguse eest kaitstult.
- Pärast avamist säilitada 4°C ja kasutada 6-8 nädala jooksul.
Veotingimused
- Keskkonnatemperatuur
Hooldus
- Hoida külmkapis +2°C kuni +8°C juures pimedas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist kuni +37°C, kuna see vähendab toote kvaliteeti.
- Ärge kuumutage keskkonda üle 37°C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, näiteks mikrolaineahjusid.
- Kui kasutatakse ainult osa söötmest, võtke vajalik kogus välja ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini.
Koostis
| Kategooria | Komponendid | Kontsentratsioon (mg/l) |
| Aminohapped | Glütsiin | 18.75 |
| L-alaniin | 4.45 | |
| L-arginiini HCl | 147.50 | |
| L-asparagiin H₂O | 7.50 | |
| L-asparagiinhape | 6.65 | |
| L-tsüsteiin HCl H₂O | 17.56 | |
| L-tsüstiin 2 HCl | 31.29 | |
| L-glutamiinhape | 7.35 | |
| L-Glutamiin | 365.00 | |
| L-Histidiin HCl H₂O | 31.48 | |
| L-isoleutsiin | 54.47 | |
| L-Leutsiin | 59.05 | |
| L-Lüsiin HCl | 91.25 | |
| L-metioniin | 17.24 | |
| L-Fenüülalaniin | 35.48 | |
| L-proliin | 17.25 | |
| L-Seriin | 26.25 | |
| L-treoniin | 53.45 | |
| L-trüptofaan | 9.02 | |
| L-Türosiini dinaatriumsool | 48.10 | |
| L-valiin | 52.85 | |
| Vitamiinid | D-Biotiin | 0.0035 |
| Koliinkloriid | 8.98 | |
| D-kaltsium-pantotenaat | 2.24 | |
| Foolhape | 2.66 | |
| myo-Inositool | 12.60 | |
| Nikotiinamiid | 2.02 | |
| Püridoksiin HCl | 0.031 | |
| Püridoksaal-HCl | 2.00 | |
| Riboflaviin | 0.219 | |
| Tiamiini HCl | 2.17 | |
| B12-vitamiin | 0.68 | |
| Anorgaanilised soolad | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Muud komponendid | D-glükoos | 3151.00 |
| Hüpoksantiin | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linoolhape | 0.042 | |
| Lipoehape | 0.105 | |
| Fenoolpunane naatriumsool | 8.63 | |
| Putressiin 2 HCl | 0.081 | |
| Naatriumpüruvaat | 55.00 | |
| Tümidiin | 0.365 |