Keskkond 199, w: 2,7 mM stabiilne glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Medium 199 on mitmekülgne ja laialdaselt kasutatav rakukultuurisöötme, mis on spetsiaalselt koostatud primaarsete paljandite kasvatamiseks. See terviklik söötmeaine ühendab endas olulisi vitamiine, aminohappeid ja muid tegureid, et pakkuda täielikult määratletud toitainete allikat erinevatele rakutüüpidele. See sobib eriti hästi muundamata rakkude jaoks, mistõttu on see hindamatu abivahend bioloogilistes uuringutes.
Medium 199 pakub mitmesuguseid rakendusi valdkonnas. See võib tõhusalt säilitada kumulus- ja ootsüütide kompleksi (COC) ja toetada ootsüütide in vitro küpsemist. Lisaks kasutatakse seda aspiratsiooniliinide loputamisel Saksa holsteini lehmadelt munarakkude kogumisel. Lisaks sellele on Medium 199 suurepärane keskkond rottidest saadud südame endoteelirakkude kasvatamiseks. Need rakendused näitavad Medium 199 mitmekülgsust ja kohandatavust erinevate katsete jaoks.
Ajalugu
Medium 199 väljatöötamine 1950. aastatel tähistas olulist edasiminekut koekultuurikeskkondades. Enne selle kasutuselevõttu tuginesid paljud kasvukeskkonnad loomsetele toodetele ja koeekstraktidele. Morgan ja kolleegid tegid aga selles valdkonnas revolutsiooni, sõnastades rakukultuuride jaoks täielikult määratletud toiteallika. Oma katsete kaudu, mis hõlmasid erinevaid vitamiinide, aminohapete ja muude tegurite kombinatsioone, avastasid nad Medium 199 erakordsed kasvu soodustavad omadused.
Kvaliteedikontroll
- pH = 7,2 +/- 0,02 temperatuuril 20-25 °C.
- Iga partii on testitud steriilsuse ning mükoplasma ja bakterite puudumise suhtes.
Hooldus
- Hoida külmikus +2°C kuni +8°C juures pimedas. Külmutamine ja soojendamine kuni +37° C vähendab toote kvaliteeti.
- Ärge kuumutage keskkonda üle 37° C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid (nt mikrolaineahjusid).
- Kui on vaja kasutada ainult osa söötmest, võtke see kogus pudelist välja ja soojendage seda toatemperatuuril.
- Kõikide söötmete, välja arvatud põhisöötme säilivusaeg on 8 nädalat alates tootmiskuupäevast.
Koostis
| Koostisosad | mg/l | |
| Anorgaanilised soolad | Kaltsiumkloriid x 2H2O | 264,92 |
| Raud(III)nitraat x 9H2O | 0,72 | |
| Magneesiumsulfaat | 97,67 | |
| Kaaliumkloriid | 400,00 | |
| Naatriumatsetaat x 3H2O | 82,95 | |
| Naatriumkloriid | 6,800.00 | |
| Naatriumdivesinikfosfaat x H2O | 140,00 | |
| Muud komponendid | Adeniinsulfaat | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Kolesterool | 0,20 | |
| 2'-Deoksüriboos | 0,50 | |
| D(+)-glükoosi veevaba | 1,000.00 | |
| Glutatioon (punane) | 0,05 | |
| Guaniin x HCl | 0,30 | |
| Hüpoksantiin | 0,30 | |
| Fenool punane | 10,00 | |
| D-Riboos | 0,50 | |
| Tümiin | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Uracil | 0,30 | |
| Ksantiin | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Aminohapped | L-alaniin | 25,00 |
| L-arginiin x HCl | 70,00 | |
| L-Asparagiinhape | 30,00 | |
| L-tsüsteiin x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-tsüsteiin | 20,00 | |
| L-glutamiin stabiilne | 149,00 | |
| L-glutamiinhape | 67,00 | |
| Glütsiin | 50,00 | |
| L-Histidiin x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-hüdroksüproliin | 10,00 | |
| L-isoleutsiin | 20,00 | |
| L-leutsiin | 60,00 | |
| L-Lüsiin x HCl | 70,00 | |
| L-metioniin | 15,00 | |
| L-Fenüülalaniin | 25,00 | |
| L-proliin | 40,00 | |
| L-Seriin | 25,00 | |
| L-treoniin | 30,00 | |
| L-trüptofaan | 10,00 | |
| L-Türosiin | 40,00 | |
| L-valiin | 25,00 | |
| Vitamiinid | 4-Aminobensoehape | 0,05 |
| Askorbiinhape | 0,05 | |
| D(+)-Biotiin | 0,01 | |
| Kaltsiferool | 0,10 | |
| D-kaltsium-pantotenaat | 0,01 | |
| Koliinkloriid | 0,50 | |
| Foolhape | 0,01 | |
| müo-Inositool | 0,05 | |
| Menadioon | 0,01 | |
| Nikotiinhape | 0.025 | |
| Nikotiinamiid | 0.025 | |
| Püridoksaal x HCl | 0.025 | |
| Püridoksool x HCl | 0.025 | |
| Riboflaviin | 0,01 | |
| DL-α-tokoferoolfosfaat-dinaatriumsool | 0,01 | |
| Tiamiin x HCl | 0,01 | |
| Vitamiin A atsetaat | 0,14 |