DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Pyruvate de sodium, w : 1.2 g/L NaHCO3
Le DMEM:Ham's F12 est un milieu de base largement reconnu et utilisé dans la culture cellulaire pour la recherche biologique. Il constitue une source fondamentale de nutriments pour la croissance de diverses lignées cellulaires de mammifères, en particulier lorsqu'il est complété par du sérum bovin fœtal (FBS).
Cette formulation unique combine le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) et le Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) dans un rapport précis de 1:1. L'ajout de L-glutamine améliore encore sa composition.
Le DMEM, dérivé de l'Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offre une concentration accrue d'acides aminés et de vitamines par rapport à son prédécesseur. En revanche, Ham's F-12 est basé sur le milieu Ham's F-10, fournissant un ensemble complémentaire de composants essentiels.
Pour favoriser une croissance cellulaire optimale, il est courant de compléter le DMEM:Ham's F12 par de la FBS à une concentration typique de 5 à 10 %. Cet ajout est nécessaire car le milieu manque d'hormones de croissance, de lipides et de protéines cruciales pour le développement cellulaire.
Le DMEM:Ham's F12 comprend un système tampon de pH et est souvent complété par du rouge de phénol, un indicateur de pH. Les cellules cultivées dans le DMEM:Ham's F12, ou tout autre milieu utilisant le système de tampon bicarbonate, nécessitent un environnement contrôlé en CO2 de 5 à 10 % pour maintenir des niveaux de pH appropriés.
Contrôle de la qualité
- Stérile-filtré
Stockage et durée de conservation
- Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
- Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.
Conditions d'expédition
- Température ambiante
Entretien
- Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
- Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
- Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
| Catégorie | Composants | Concentration (mg/L) |
| Acides aminés | Glycine | 18.75 |
| L-Alanine | 4.45 | |
| L-Arginine HCl | 147.50 | |
| L-Asparagine H₂O | 7.50 | |
| Acide L-Aspartique | 6.65 | |
| L-Cystéine HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystine 2 HCl | 31.29 | |
| Acide L-Glutamique | 7.35 | |
| L-Glutamine | 365.00 | |
| L-Histidine HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucine | 54.47 | |
| L-Leucine | 59.05 | |
| L-Lysine HCl | 91.25 | |
| L-Méthionine | 17.24 | |
| L-Phénylalanine | 35.48 | |
| L-Proline | 17.25 | |
| L-Sérine | 26.25 | |
| L-Thréonine | 53.45 | |
| L-Tryptophane | 9.02 | |
| L-Tyrosine sel disodique | 48.10 | |
| L-Valine | 52.85 | |
| Vitamines | D-Biotine | 0.0035 |
| Chlorure de choline | 8.98 | |
| D-Pantothénate de calcium | 2.24 | |
| Acide folique | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nicotinamide | 2.02 | |
| Pyridoxine HCl | 0.031 | |
| HCl de pyridoxal | 2.00 | |
| Riboflavine | 0.219 | |
| Thiamine HCl | 2.17 | |
| Vitamine B12 | 0.68 | |
| Sels inorganiques | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Autres composants | D-Glucose | 3151.00 |
| Hypoxanthine | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Acide linoléique | 0.042 | |
| Acide lipoïque | 0.105 | |
| Sel de sodium du rouge de phénol | 8.63 | |
| Putrescine 2 HCl | 0.081 | |
| Pyruvate de sodium | 55.00 | |
| Thymidine | 0.365 |