Milieu Ham's F12K, w : 2.0 mM L-Glutamine, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.5 g/L NaHCO3
Voici le milieu Ham's F-12K (Kaighn's), une modification spécialisée du milieu Ham's F-12 conçue pour répondre aux exigences uniques de la recherche biologique. Ce milieu avancé offre des avantages distincts, améliorant la culture des hépatocytes humains primaires, ainsi que des cellules de foie de rat et de poulet, en particulier dans des conditions de sérum réduit.
Le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) est soigneusement formulé pour optimiser les conditions de culture cellulaire. Il présente une composition enrichie, fournissant des niveaux élevés de composants essentiels tels que les acides aminés et le pyruvate de sodium, ainsi que des éléments supplémentaires tels que la putrescine, la thymidine, l'hypoxanthine et le zinc. Ces ajouts permettent aux chercheurs de compléter le milieu avec un minimum de sérum ou des composants définis pour des types de cellules spécifiques, facilitant ainsi des conditions expérimentales précises.
Notamment, le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) ne contient pas de protéines ni de facteurs de croissance. Par conséquent, il est souvent nécessaire d'ajouter des facteurs de croissance et du sérum bovin fœtal (FBS), ce qui permet aux chercheurs d'adapter le milieu aux exigences de leurs lignées cellulaires spécifiques. Pour une performance optimale, la concentration de FBS doit être soigneusement optimisée pour chaque lignée cellulaire, afin de garantir une croissance et une fonctionnalité optimales.
Pour maintenir un pH physiologique, le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) utilise un système tampon de bicarbonate de sodium (2,5 g/L), ce qui nécessite un environnement contrôlé de 5 à 10 % de CO2 pendant la culture. Cela garantit que le pH du milieu reste dans la plage idéale pour la croissance et la viabilité des cellules
Contrôle de qualité
- pH = 7,2 +/- 0,02 à 20-25°C.
- Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
- Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
- Ne pas chauffer le milieu à plus de 37°C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
- Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
- La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
| Composants | mg/L | |
| Sels inorganiques | Chlorure de calcium x 2H2O | 135,24 |
| Sulfate de cuivre(II) x 5H2O | 0,00 | |
| Sulfate de fer (II) x 7H2O | 0,83 | |
| Chlorure de magnésium x 6H2O | 105,72 | |
| Sulfate de magnésium x 7H2O | 394,49 | |
| Chlorure de potassium | 283,29 | |
| Phosphate de potassium dihydrogène | 58,52 | |
| Chlorure de sodium | 7597,20 | |
| hydrogénophosphate de di-sodium anhydre |
115,02 | |
| Sulfate de zinc x 7H2O | 0,14 | |
| Autres composants | D(+)-Glucose anhydre | 1260,00 |
| Hypoxanthine | 4,08 | |
| Acide DL-α-Lipoïque | 0,21 | |
| Rouge de phénol | 3,00 | |
| Putrescine x 2HCl | 0,32 | |
| Pyruvate de sodium | 220,00 | |
| NaHCO3 | 2500,00 | |
| Thymidine | 0,73 | |
| Acides aminés | L-Alanine | 17,82 |
| L-Arginine x HCl | 421,40 | |
| L-Asparagine x H2O | 30,02 | |
| Acide L-aspartique | 26,62 | |
| L-Cystéine x HCl x H2O | 70,24 | |
| L-Glutamine | 292,20 | |
| Acide L-Glutamique | 29,42 | |
| Glycine | 15,01 | |
| L-Histidine x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-Isoleucine | 7,87 | |
| L-Leucine | 26,24 | |
| L-Lysine x HCl | 73,04 | |
| L-Méthionine | 8,95 | |
| L-Phénylalanine | 9,91 | |
| L-Proline | 69,06 | |
| L-Sérine | 21,02 | |
| L-Thréonine | 23,82 | |
| L-Tryptophane | 4,08 | |
| L-Tyrosine | 10,87 | |
| L-Valine | 23,42 | |
| Vitamines | D(+)-Biotine | 0,07 |
| D-Pantothénate de calcium | 0,48 | |
| Chlorure de choline | 13,96 | |
| Acide folique | 1,32 | |
| myo-Inositol | 18,02 | |
| Nicotinamide | 0,04 | |
| Pyridoxine x HCl | 0,06 | |
| Riboflavine | 0,04 | |
| Thiamine x HCl | 0,34 | |
| Vitamine B12 | 1,36 |