199-es közeg, w: 2,7 mM stabil glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
A 199-es táptalaj egy sokoldalú és széles körben használt sejttenyésztő táptalaj, amelyet kifejezetten primer explantátumok tenyésztésére fejlesztettek ki. Ez az átfogó táptalaj egyesíti az esszenciális vitaminokat, aminosavakat és egyéb tényezőket, hogy teljesen meghatározott tápanyagforrást biztosítson a különböző sejttípusok számára. Különösen alkalmas a nem transzformált sejtek számára, így felbecsülhetetlen értékű eszköz a biológiai kutatásokhoz.
A 199-es médium számos alkalmazási lehetőséget kínál a területen. Hatékonyan képes fenntartani a kumulus-oocita komplexet (COC) és támogatni az oociták in vitro érését. Ezenkívül a német holstein tehenekből történő petesejtgyűjtés során az aspirációs vonalak öblítésénél is alkalmazzák. A Medium 199 továbbá kiváló táptalajként szolgál a patkányokból származó szív endotélsejtek tenyésztéséhez. Ezek az alkalmazások bizonyítják a Medium 199 sokoldalúságát és alkalmazkodóképességét a különböző kísérleti igényekhez.
Történet
A Medium 199 kifejlesztése az 1950-es években jelentős előrelépést jelentett a szövettenyésztő közegek terén. Bevezetése előtt számos tenyésztőközeg állati eredetű termékekre és szövetkivonatokra támaszkodott. Morgan és munkatársai azonban forradalmasították a területet azzal, hogy egy teljesen meghatározott tápanyagforrást fogalmaztak meg a sejtkultúrák számára. A vitaminok, aminosavak és egyéb tényezők különböző kombinációival végzett kísérleteik során felfedezték a Medium 199 kivételes növekedésserkentő tulajdonságait.
Minőségellenőrzés
- pH = 7,2 +/- 0,02 20-25°C-on.
- Minden egyes tétel sterilitását, valamint mikoplazma- és baktériummentességét vizsgálták.
Karbantartás
- Hűtve, +2°C és +8°C között, sötétben tárolva. A fagyasztás és a melegítés +37°C-ig minimalizálja a termék minőségét.
- Ne melegítse a táptalajt 37° C-nál magasabbra, és ne használjon ellenőrizhetetlen hőforrásokat (pl. mikrohullámú készülékeket).
- Ha a táptalajnak csak egy részét kívánja felhasználni, vegye ki ezt a mennyiséget az üvegből, és melegítse fel szobahőmérsékleten.
- Az eltarthatósági idő az alapközeg kivételével bármelyik táptalaj esetében a gyártás dátumától számított 8 hét.
Összetétel
| Összetevők | mg/l | |
| Szervetlen sók | Kalcium-klorid x 2H2O | 264,92 |
| Vas(III)nitrát x 9H2O | 0,72 | |
| Magnézium-szulfát | 97,67 | |
| Kálium-klorid | 400,00 | |
| Nátrium-acetát x 3H2O | 82,95 | |
| Nátrium-klorid | 6,800.00 | |
| Nátrium-dihidrogén-foszfát x H2O | 140,00 | |
| Egyéb összetevők | Adenin-szulfát | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Koleszterin | 0,20 | |
| 2'-Deoxiribóz | 0,50 | |
| D(+)-Glükóz vízmentes | 1,000.00 | |
| Glutation (vörös) | 0,05 | |
| Guanin x HCl | 0,30 | |
| Hipoxantin | 0,30 | |
| Fenolvörös | 10,00 | |
| D-Ribóz | 0,50 | |
| Thymin | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Uracil | 0,30 | |
| Xantin | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Aminosavak | L-Alanin | 25,00 |
| L-arginin x HCl | 70,00 | |
| L-aszparaginsav | 30,00 | |
| L-cisztein x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-cisztin | 20,00 | |
| L-Glutamin stabil | 149,00 | |
| L-Glutaminsav | 67,00 | |
| Glicin | 50,00 | |
| L-Hisztidin x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-hidroxiprolin | 10,00 | |
| L-izoleucin | 20,00 | |
| L-Leucin | 60,00 | |
| L-lizin x HCl | 70,00 | |
| L-metionin | 15,00 | |
| L-fenilalanin | 25,00 | |
| L-prolin | 40,00 | |
| L-szerin | 25,00 | |
| L-treonin | 30,00 | |
| L-triptofán | 10,00 | |
| L-tirozin | 40,00 | |
| L-Valin | 25,00 | |
| Vitaminok | 4-Amino benzoesav | 0,05 |
| Aszkorbinsav | 0,05 | |
| D(+)-Biotin | 0,01 | |
| Kalciferol | 0,10 | |
| D-kalcium-pantotenát | 0,01 | |
| Kolin-klorid | 0,50 | |
| Folsav | 0,01 | |
| myo-Inozitol | 0,05 | |
| Menadion | 0,01 | |
| Nikotinsav | 0.025 | |
| Nikotinamid | 0.025 | |
| Piridoxal x HCl | 0.025 | |
| Piridoxol x HCl | 0.025 | |
| Riboflavin | 0,01 | |
| DL-α-tokoferol-foszfát-dinátrium só | 0,01 | |
| Tiamin x HCl | 0,01 | |
| A-vitamin-acetát | 0,14 |