A549 sejtek

A Cytion's Freeze Medium CM-1 a legkorszerűbb kriokonzerváló közeg, amelyet úgy terveztek, hogy a sejtek életképessége és funkcionalitása a felolvasztás után a legmagasabb szinten legyen biztosítva. Ez a sokoldalú médium a sejttípusok széles spektrumához alkalmas, beleértve az emberi és állati sejteket is, így nélkülözhetetlen eszköz a különféle kutatási alkalmazásokhoz. A krioprotektánsok és alapvető tápanyagok aprólékosan kiegyensúlyozott kombinációjával összeállított Freeze Medium CM-1 minimalizálja a jégkristályok képződését és a sejtek stresszét a fagyasztási folyamat során, így megőrizve a sejtek integritását.
A Freeze Medium CM-1 fő jellemzői a következők:

Széles körű kompatibilitás: Hatékony a sejttípusok széles skálájához, beleértve a primer sejteket, őssejteket és a létrehozott sejtvonalakat.
Magas életképesség: Optimalizált a felolvasztás utáni sejtregeneráció és életképesség maximalizálására, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Felhasználásra kész: Kényelmesen előkészítve és sterilizálva az azonnali alkalmazáshoz, csökkentve az előkészítési időt és a szennyeződés kockázatát.
Fokozott stabilitás: Fenntartja a konzisztens teljesítményt standard kriokonzerválási körülmények között, biztosítva a reprodukálható eredményeket.
Hosszú eltarthatósági idő: A CM-1 egy szérumtartalmú, azonnal felhasználható kriokonzerváló közeg, amely hűtőszekrényben akár egy évig is tárolható.


A CM-1 használata sejtek fagyasztásához

A CM-1 adherens és szuszpenziós sejtek fagyasztására való használatához kövesse az alábbi lépéseket

Adhéziós sejtek esetében mossa meg és válassza le őket a tenyésztési szubsztrátról. Szuszpenziós sejtek esetében közvetlenül a következő lépéssel folytassa.
Számolja meg a sejteket, hogy biztosítsa a megfelelő koncentrációt.
Centrifugáljuk a sejteket a pelletáláshoz, majd szuszpendáljuk újra CM-1 fagyasztási tápfolyadékban.
A reszuszpendált sejteket helyezze át a kriovialis üvegekbe.
Használjon lassú fagyasztási módszert, mielőtt a sejteket hosszú távú tárolásra szállítja





Módszer
Leírás
Lépések





❄️
Kézi fagyasztás

Lépésről lépésre történő módszer, amely a sejtek életképességének biztosítása érdekében a hőmérséklet fokozatos csökkentésével jár

1️⃣ A sejteket fagyasztóközegben 40 percre 4 °C-os fagyasztóba helyezzük.
2️⃣ Tegyük át -80°C-os fagyasztóba 24 órára.
3️⃣ A sejteket folyékony nitrogénben tároljuk a hosszú távú megőrzés érdekében



❄️
Mr. Frosty használata

Kényelmes eszköz, amely lehetővé teszi a szabályozott fagyasztási sebességet elektromos áram nélkül

1️⃣ Készítse elő a sejteket fagyasztóközeggel ellátott kriovialokban.
2️⃣ Helyezze a krioüvegeket a Mr. Frosty tartályba.
3️⃣ Tárolja -80°C-on 24 órán keresztül, mielőtt átrakja folyékony nitrogénbe



❄️
Szabályozott sebességű fagyasztó

A Thermo Fisher vagy más gyártók nagy pontosságú fagyasztója, amelyet szabályozott hőmérsékletcsökkentésre terveztek

1️⃣ Programozza a készüléket a hőmérséklet fokozatos csökkentésére.
2️⃣ Helyezze az előkészített sejteket a fagyasztóba.
3️⃣ A fagyasztási ciklus után helyezze át a sejteket folyékony nitrogénbe









Tárolja a kriovialisokat -130°C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogénben a hosszú távú megőrzés érdekében.


Összetevők

FBS-t, DMSO-t, glükózt, sókat tartalmaz
Pufferkapacitás: pH = 7,2 és 7,6 között


A Cytion's Freeze Medium CM-1 megbízható megoldást kínál a kriokonzerváláshoz, biztosítva a sejtek magas életképességét és funkcionalitását a kiolvasztás után a kutatási alkalmazások széles skálájához.

DMEM:A Ham's F12 széles körben elismert és széles körben használt alapközeg a biológiai kutatások sejtkultúrájában. Alapvető tápanyagforrásként szolgál a különböző emlős sejtvonalak növekedéséhez, különösen, ha magzati szarvasmarha szérummal (FBS) egészítik ki.

Ez az egyedülálló készítmény a Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) és a Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) tápanyagot pontosan 1:1 arányban kombinálja. Az L-glutamin hozzáadása tovább javítja az összetételét.

Az EMEM-ből (Eagle's Minimal Essential Medium) származó DMEM az elődjéhez képest megnövelt aminosav
- és vitaminkoncentrációt kínál. Ezzel szemben a Ham's F-12 a Ham's F-10 táptalajon alapul, és az esszenciális komponensek kiegészítő készletét biztosítja.

Az optimális sejtnövekedés támogatása érdekében a DMEM:Ham's F12-t szokás FBS-szel kiegészíteni, jellemzően 5-10%-os koncentrációban. Erre a kiegészítésre azért van szükség, mert a táptalajból hiányoznak a növekedési hormonok, lipidek és a sejtek fejlődéséhez elengedhetetlen fehérjék.

A DMEM:Ham's F12 tartalmaz egy pH-pufferrendszert, és gyakran kiegészítik fenolvörössel, egy pH-indikátorral. A DMEM:Ham's F12-ben vagy bármely, a bikarbonát pufferrendszert használó táptalajban tenyésztett sejteknek 5-10%-os ellenőrzött CO2-környezetre van szükségük a megfelelő pH-szint fenntartásához.


Minőségellenőrzés

Steril szűrt


Tárolás és eltarthatóság

+2°C és +8°C között, fénytől védve tárolja.
Felbontás után 4°C-on tárolja, és 6-8 héten belül használja fel.


Szállítási feltételek

Környezeti hőmérséklet


Karbantartás

Hűtve, +2°C és +8°C között, sötétben tárolja. Kerülje a fagyasztást és a gyakori melegítést +37°C-ra, mivel ez csökkenti a termék minőségét.
Ne melegítse a közeget 37°C fölé, és ne használjon ellenőrizetlen hőforrásokat, például mikrohullámú készülékeket.
Ha a táptalajnak csak egy részét kívánja felhasználni, vegye ki a szükséges mennyiséget, és felhasználás előtt melegítse fel szobahőmérsékletűre.


Összetétel



Kategória
Összetevők
Koncentráció (mg/l)


Aminosavak
Glicin
18.75


L-alanin
4.45


L-arginin HCl
147.50


L-aszparagin H₂O
7.50


L-aszparaginsav
6.65


L-cisztein HCl H₂O
17.56


L-cisztin 2 HCl
31.29


L-Glutaminsav
7.35


L-Glutamin
365.00


L-Hisztidin HCl H₂O
31.48


L-izoleucin
54.47


L-Leucin
59.05


L-lizin HCl
91.25


L-metionin
17.24


L-fenilalanin
35.48


L-prolin
17.25


L-szerin
26.25


L-treonin
53.45


L-triptofán
9.02


L-tirozin dinátrium só
48.10


L-Valin
52.85


Vitaminok
D-Biotin
0.0035


Kolinklorid
8.98


D-kalcium-pantotenát
2.24


Folsav
2.66


myo-Inozitol
12.60


Nikotinamid
2.02


Piridoxin HCl
0.031


Piridoxál HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


B12-vitamin
0.68


Szervetlen sók
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Egyéb komponensek
D-Glükóz
3151.00


Hipoxantin
2.40


HEPES
3574.50


Linolsav
0.042


Liponsav
0.105


Fenolvörös nátriumsó
8.63


Putreszcin 2 HCl
0.081


Nátrium-piruvát
55.00


Timidin
0.365

Accutase Cell Dissociation Reagent
- A Trypsin kíméletes alternatívája
Az Accutase egy sejtleválasztó megoldás, amely forradalmasítja a sejtkultúra-ipart. Proteolitikus és kollagenolitikus enzimek keveréke, amely a tripszin és a kollagenáz hatását utánozza. A tripszinnel ellentétben az Accutase nem tartalmaz emlős vagy bakteriális összetevőket, és sokkal kíméletesebb a sejtekhez, így ideális megoldás a sejtek rutinszerű leválasztására a standard szövettenyésztő műanyag edényekről és az adhéziós bevonatú műanyag edényekről. Ebben a blogbejegyzésben az Accutase előnyeit és felhasználási lehetőségeit vizsgáljuk meg, valamint azt, hogy hogyan változtatja meg a sejtkultúra játékát.
Az Accutase előnyei
Az Accutase számos előnnyel rendelkezik a hagyományos tripszinoldatokkal szemben. Először is, minden olyan esetben használható, amikor bármilyen tapadó sejtvonal kíméletes és hatékony leválasztására van szükség, így a tripszin közvetlen helyettesítője. Másodszor, az Accutase rendkívül jól működik embrionális és neuronális őssejteken, és bizonyítottan megőrzi e sejtek életképességét a passzázs után. Harmadszor, az Accutase megőrzi a legtöbb epitópot a későbbi áramlási citometriás elemzéshez, így ideális a sejtfelszíni markerek elemzéséhez.
Ezenkívül az Accutase-t nem kell semlegesíteni, amikor a tapadó sejteket passziválják. A sejtek szétválasztása után további médium hozzáadása felhígítja az Accutázt, így az már nem képes a sejtek leválasztására. Ez kiküszöböli az inaktiválási lépés szükségességét, és időt takarít meg a sejtkultúra-technikusok számára. Végül, az Accutase-t nem kell aliquotálni, és egy palack 2 hónapig stabil a hűtőszekrényben.
Az Accutase alkalmazásai
Az Accutase a tripszinoldat közvetlen helyettesítője, és használható a sejtvonalak passziválására. Ezenkívül az Accutase jól teljesít a sejtek leválasztásakor számos sejtfelszíni marker áramlási citometriás elemzéséhez és sejtválogatáshoz. Az Accutase kezelés további downstream alkalmazásai közé tartozik a sejtfelszíni markerek elemzése, vírusnövekedési vizsgálat, sejtproliferáció, tumorsejt-migrációs vizsgálatok, rutin sejtpassázs, termelés skálázása (bioreaktor) és áramlási citometria.
Az Accutase összetétele
Az Accutase nem tartalmaz emlős vagy bakteriális összetevőket, és egy természetes enzimkeverék proteolitikus és kollagénbontó enzimaktivitással. Sokkal alacsonyabb koncentrációban van megfogalmazva, mint a tripszin és a kollagenáz, így kevésbé mérgező és kíméletesebb, de ugyanolyan hatékony.
Az Accutase hatékonysága
Az Accutase bizonyítottan hatékony az elsődleges és őssejtek leválasztásában és a sejtek magas életképességének fenntartásában az állati eredetű enzimekkel, például a tripszinnel összehasonlítva. a sejtek 100%-a 10 perc után visszanyerhető, és az Accutase automatikus emésztésének köszönhetően a sejteket akár 45 percig is az Accutase-ban hagyhatjuk.
Összefoglalva
Összefoglalva, az Accutase egy hatékony megoldás, amely megváltoztatja a sejtkultúra játékát. Kíméletes természetével, hatékonyságával és sokoldalúságával az Accutase a tripszin ideális alternatívája. Ha megbízható és hatékony megoldást keres a sejtleválasztáshoz, az Accutase az Ön számára a megfelelő megoldás.

Termék áttekintés
Térfogat: 100 ml Tárolás: ≤-15°C Sterilitás: Steril szűrt
Az Antibiotikum/Antimikotikum oldat (100x) egy steril, felhasználásra kész koncentrátum, amelyet úgy terveztek, hogy csökkentse a mikrobiális szennyeződés kockázatát a sejtkultúrában és a kapcsolódó laboratóriumi alkalmazásokban. Ez a 100x oldat a penicillin, a streptomicin és az amfotericin B jól bevált kombinációját tartalmazza, amely széles spektrumú antimikrobiális aktivitást biztosít Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok, élesztők és fonalas gombák ellen. A készítmény alkalmas eukarióta sejttenyészetekben, bakteriális táptalajokon és más, szennyeződésre érzékeny rendszerekben történő felhasználásra, támogatva a tiszta és következetes laboratóriumi műveleteket.
Alkalmazás és előnyök A rutin kutatási protokollokhoz optimalizált oldatot széles körben használják a sejtkultúra munkafolyamatok aszeptikus körülményeinek fenntartására. Megbízható teljesítményt nyújt a szennyeződésre érzékeny környezetekben, segítve a kutatókat a mikrobák elszaporodásának kockázatának csökkentésében anélkül, hogy veszélyeztetné a sejtek egészségét vagy a kísérleti reprodukálhatóságot. A sterilszűrt formuláció kiküszöböli a további szolubilizációs lépések szükségességét, támogatva a racionalizált médiumkészítést és csökkentve a napi laboratóriumi eljárások variabilitását.
Használat és kompatibilitás A standard munkakoncentrációk eléréséhez hígítsa az oldatot 1:100 arányban a teljes táptalajhoz. A termék kompatibilis az emlős sejtvonalak és alapközegek széles skálájával. A folyamatos készletelérhetőségnek köszönhetően a kutatók számára előnyös a megbízható ellátás folyamatossága és az egyszerűsített logisztikai tervezés. Az oldatot ≤ -15 °C-on kell tárolni, és a stabilitás megőrzése érdekében védeni kell az ismételt fagyasztási-olvasztási ciklusoktól. Kizárólag kutatási célú felhasználásra. Nem használható diagnosztikai vagy terápiás eljárásokban. Nem használható embereken vagy állatokon.

Foszfát-pufferelt sóoldat (PBS) oldat
A foszfátpufferelt sóoldat (PBS) a biológiai és kémiai kutatásokban széles körben használt pufferoldat. Fontos szerepet játszik a pH-egyensúly és az ozmolaritás fenntartásában a különböző kísérleti eljárások során, beleértve a szövetfeldolgozást és a sejttenyésztést. PBS-oldatunkat nagy gondossággal, nagy tisztaságú összetevőkkel állítjuk össze, hogy minden kísérletben biztosítsuk a stabilitást és a megbízhatóságot. PBS-ünk ozmolaritása és ionkoncentrációja szorosan utánozza az emberi szervezetben uralkodó értékeket, így izotóniás és a legtöbb sejtre nem mérgező.

PBS-oldatunk összetétele
A PBS oldatunk ultratisztaságú foszfátpufferek és sóoldatok pH-értékre beállított keveréke. Az 1X munkakoncentrációban a következőket tartalmazza:

8000 mg/l nátrium-klorid (NaCl)
200 mg/l kálium-klorid (KCl)
1150 mg/L nátrium-foszfát kétbázisú vízmentes (Na2HPO4)
200 mg/L Kálium-foszfát monobázikus vízmentes (KH2PO4)

Ez az összetétel optimális pH
- és ionegyensúlyt biztosít, amely a biológiai alkalmazások széles köréhez alkalmas.

A PBS-oldatunk alkalmazásai
PBS-oldatunk ideális a biológiai kutatások különböző alkalmazásaihoz. Izotóniás és nem toxikus tulajdonságai alkalmassá teszik az anyagok hígítására és a sejttartályok öblítésére. Az EDTA-t tartalmazó PBS-oldatok hatékonyan oldják a megtapadt és csomósodott sejteket. Kétértékű fémeket, például cinket azonban nem szabad a PBS-hez adni, mivel ez csapadékképződést okozhat. Ilyen esetekben a Good pufferek használata ajánlott. Ezenkívül a PBS-oldatunk elfogadható alternatívája a vírusszállító közegnek az RNS-vírusok, köztük a SARS-CoV-2 szállítására és tárolására.

Minőségellenőrzés

Steril szűrt


Tárolás és eltarthatósági idő

Tárolja +2°C és +25°C között, fénytől védve.
Felbontás után 2°C és 25°C között tárolja, és 24 hónapon belül használja fel.


Szállítási feltételek

Környezeti hőmérséklet


Karbantartás

Hűtve, +2°C és +8°C között, sötétben tárolja. Kerülje a fagyasztást és a gyakori melegítést +37°C-ra, mivel ez csökkenti a termék minőségét.
Ne melegítse a közeget 37°C fölé, és ne használjon ellenőrizetlen hőforrásokat, például mikrohullámú készülékeket.
Ha a táptalajnak csak egy részét kívánja felhasználni, vegye ki a szükséges mennyiséget, és felhasználás előtt melegítse fel szobahőmérsékletűre.

Összetétel



Kategória
Összetevők
Koncentráció (mg/l)


Sók
Kálium-klorid
200



Kálium-foszfát monobázikus vízmentes
200



Nátrium-klorid
8000



Nátrium-foszfát kétbázisú, vízmentes
1150

Szervezet	Emberi
Szövet	Tüdő, Bronchus

Szervezet	Emberi
Szövet	Tüdő
Betegség	Karcinóma

Szervezet	Emberi
Szövet	Tüdő adenokarcinóma
Betegség	Tüdő adenokarcinóma

Szervezet	Emberi
Szövet	Tüdő

Szervezet	Emberi
Szövet	Tüdő
Betegség	Tüdő adenokarcinóma