HEK293-F sejtek
430,00 EUR*
A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 6 sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 106 sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).
Általános információk
| Leírás | A HEK293-F sejtek a humán embrionális vese 293 (HEK293) sejtvonalból származó, gyorsan növekvő, jól transzfektálható alvonal. Az "F" jelölés azt jelzi, hogy ezeket a sejteket szuszpenziós kultúrákban történő növekedésre adaptálták, ami különösen hasznos a nagyléptékű fehérje előállításához. A sejtek számos szérummentes közegben növekednek, megkönnyítve a biotechnológiai és gyógyszeripari alkalmazásokban a skálázható folyamatokat. A HEK293-F sejtek megtartják az eredeti HEK293 vonal epithelszerű morfológiáját, és szuszpenzióban tarthatók, szilárd szubsztrátumhoz való rögzítés nélkül. Ezek a sejtek rendkívül hatékonyan expresszálják a rekombináns fehérjéket, és széles körben használják őket génterápiás célú vírusvektorok, többek között adenovirális, lentivirális és retrovirális vektorok előállítására. Szuszpenzióban való robusztus növekedésük és könnyű transzfekciójuk miatt ideálisak a tranziens transzfekciós protokollokban való felhasználásra, ahol a transzfekciót követő néhány napon belül nagy mennyiségű fehérjét tudnak előállítani. Ez a tulajdonság kritikus fontosságú a kutatási és ipari környezetben a gyors termelési ciklusok szempontjából. A HEK293-F sejtek különböző növekedési feltételekhez való alkalmazkodóképessége és a nagy sűrűségű tenyésztésre való képességük növeli hasznosságukat a biotechnológiai környezetekben. |
|---|---|
| Szervezet | Emberi |
| Szövet | Vese |
| Alkalmazások | Transzfekciós gazdatest |
| Szinonimák | HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293 F, 293F |
Jellemzők
| Kor | Magzat |
|---|---|
| Gender | Női |
| Morfológia | Epithelszerű |
| Növekedési tulajdonságok | Felfüggesztés |
Szabályozási adatok
| Idézet | HEK293-F (Cytion katalógusszám: 300260) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_6642 |
| GMO-státusz | GMO-S1: Ez a HEK293-F sejtvonal SV40 Large T antigén szekvenciákat tartalmaz, ami lehetővé teszi a magas transzfekciós hatékonyságot és a robusztus növekedést szuszpenziós kultúrában. A módosítás stabilan jelen van az embrionális vesesejtekben. Ez a besorolás csak Németországban érvényes, máshol ettől eltérhet. |
Biomolekuláris adatok
| Kifejezett receptorok | Vitronectin |
|---|---|
| Fehérje expresszió | CEA negatív, p53 pozitív |
| Tumorogén | Meztelen egerekben |
| Vírusok | Adenovírus 5 DNS-sel átalakítva adenovírus 5 DNS-sel |
A kezelése
| Kultúrközeg | CD293 (Thermo) + L-Glutamin |
|---|---|
| Kiegészítők | A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni |
| Dissociációs reagens | Accutase |
| Megduplázási idő | 30 óra |
| Szubkultúrázás | Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak. |
| Vetési sűrűség | 1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez. |
| Folyadék megújítása | hetente 2 alkalommal |
| Az olvadás utáni helyreállítás | Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak. |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | A felolvasztás utáni optimális kötődés és életképesség érdekében kollagénnel bevont lombikok vagy lemezek használatát javasoljuk. |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|
Elemzési tanúsítvány (CoA)
| Tételszám | Tanúsítvány típusa | Dátum | Katalógusszám |
|---|---|---|---|
| 300260-170225SF | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300260 |
Anyagátadási megállapodás
Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.
Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.
Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.
-
Szükséges termékek
Szükséges termékek
CM-1 fagyasztási közeg - 50 mlKriokonzerváló médiaváltozatok: 50 mlA Cytion's Freeze Medium CM-1 a legkorszerűbb kriokonzerváló közeg, amelyet úgy terveztek, hogy a sejtek életképessége és funkcionalitása a felolvasztás után a legmagasabb szinten legyen biztosítva. Ez a sokoldalú médium a sejttípusok széles spektrumához alkalmas, beleértve az emberi és állati sejteket is, így nélkülözhetetlen eszköz a különféle kutatási alkalmazásokhoz. A krioprotektánsok és alapvető tápanyagok aprólékosan kiegyensúlyozott kombinációjával összeállított Freeze Medium CM-1 minimalizálja a jégkristályok képződését és a sejtek stresszét a fagyasztási folyamat során, így megőrizve a sejtek integritását.
A Freeze Medium CM-1 fő jellemzői a következők:
Széles körű kompatibilitás: Hatékony a sejttípusok széles skálájához, beleértve a primer sejteket, őssejteket és a létrehozott sejtvonalakat.
Magas életképesség: Optimalizált a felolvasztás utáni sejtregeneráció és életképesség maximalizálására, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Felhasználásra kész: Kényelmesen előkészítve és sterilizálva az azonnali alkalmazáshoz, csökkentve az előkészítési időt és a szennyeződés kockázatát.
Fokozott stabilitás: Fenntartja a konzisztens teljesítményt standard kriokonzerválási körülmények között, biztosítva a reprodukálható eredményeket.
Hosszú eltarthatósági idő: A CM-1 egy szérumtartalmú, azonnal felhasználható kriokonzerváló közeg, amely hűtőszekrényben akár egy évig is tárolható.
A CM-1 használata sejtek fagyasztásához
A CM-1 adherens és szuszpenziós sejtek fagyasztására való használatához kövesse az alábbi lépéseket
Adhéziós sejtek esetében mossa meg és válassza le őket a tenyésztési szubsztrátról. Szuszpenziós sejtek esetében közvetlenül a következő lépéssel folytassa.
Számolja meg a sejteket, hogy biztosítsa a megfelelő koncentrációt.
Centrifugáljuk a sejteket a pelletáláshoz, majd szuszpendáljuk újra CM-1 fagyasztási tápfolyadékban.
A reszuszpendált sejteket helyezze át a kriovialis üvegekbe.
Használjon lassú fagyasztási módszert, mielőtt a sejteket hosszú távú tárolásra szállítja
Módszer
Leírás
Lépések
❄️
Kézi fagyasztás
Lépésről lépésre történő módszer, amely a sejtek életképességének biztosítása érdekében a hőmérséklet fokozatos csökkentésével jár
1️⃣ A sejteket fagyasztóközegben 40 percre 4 °C-os fagyasztóba helyezzük.
2️⃣ Tegyük át -80°C-os fagyasztóba 24 órára.
3️⃣ A sejteket folyékony nitrogénben tároljuk a hosszú távú megőrzés érdekében
❄️
Mr. Frosty használata
Kényelmes eszköz, amely lehetővé teszi a szabályozott fagyasztási sebességet elektromos áram nélkül
1️⃣ Készítse elő a sejteket fagyasztóközeggel ellátott kriovialokban.
2️⃣ Helyezze a krioüvegeket a Mr. Frosty tartályba.
3️⃣ Tárolja -80°C-on 24 órán keresztül, mielőtt átrakja folyékony nitrogénbe
❄️
Szabályozott sebességű fagyasztó
A Thermo Fisher vagy más gyártók nagy pontosságú fagyasztója, amelyet szabályozott hőmérsékletcsökkentésre terveztek
1️⃣ Programozza a készüléket a hőmérséklet fokozatos csökkentésére.
2️⃣ Helyezze az előkészített sejteket a fagyasztóba.
3️⃣ A fagyasztási ciklus után helyezze át a sejteket folyékony nitrogénbe
Tárolja a kriovialisokat -130°C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogénben a hosszú távú megőrzés érdekében.
Összetevők
FBS-t, DMSO-t, glükózt, sókat tartalmaz
Pufferkapacitás: pH = 7,2 és 7,6 között
A Cytion's Freeze Medium CM-1 megbízható megoldást kínál a kriokonzerváláshoz, biztosítva a sejtek magas életképességét és funkcionalitását a kiolvasztás után a kutatási alkalmazások széles skálájához.59,00 EUR*AccutaseVáltozatok: 100 mlAccutase Cell Dissociation Reagent
- A Trypsin kíméletes alternatívája
Az Accutase egy sejtleválasztó megoldás, amely forradalmasítja a sejtkultúra-ipart. Proteolitikus és kollagenolitikus enzimek keveréke, amely a tripszin és a kollagenáz hatását utánozza. A tripszinnel ellentétben az Accutase nem tartalmaz emlős vagy bakteriális összetevőket, és sokkal kíméletesebb a sejtekhez, így ideális megoldás a sejtek rutinszerű leválasztására a standard szövettenyésztő műanyag edényekről és az adhéziós bevonatú műanyag edényekről. Ebben a blogbejegyzésben az Accutase előnyeit és felhasználási lehetőségeit vizsgáljuk meg, valamint azt, hogy hogyan változtatja meg a sejtkultúra játékát.
Az Accutase előnyei
Az Accutase számos előnnyel rendelkezik a hagyományos tripszinoldatokkal szemben. Először is, minden olyan esetben használható, amikor bármilyen tapadó sejtvonal kíméletes és hatékony leválasztására van szükség, így a tripszin közvetlen helyettesítője. Másodszor, az Accutase rendkívül jól működik embrionális és neuronális őssejteken, és bizonyítottan megőrzi e sejtek életképességét a passzázs után. Harmadszor, az Accutase megőrzi a legtöbb epitópot a későbbi áramlási citometriás elemzéshez, így ideális a sejtfelszíni markerek elemzéséhez.
Ezenkívül az Accutase-t nem kell semlegesíteni, amikor a tapadó sejteket passziválják. A sejtek szétválasztása után további médium hozzáadása felhígítja az Accutázt, így az már nem képes a sejtek leválasztására. Ez kiküszöböli az inaktiválási lépés szükségességét, és időt takarít meg a sejtkultúra-technikusok számára. Végül, az Accutase-t nem kell aliquotálni, és egy palack 2 hónapig stabil a hűtőszekrényben.
Az Accutase alkalmazásai
Az Accutase a tripszinoldat közvetlen helyettesítője, és használható a sejtvonalak passziválására. Ezenkívül az Accutase jól teljesít a sejtek leválasztásakor számos sejtfelszíni marker áramlási citometriás elemzéséhez és sejtválogatáshoz. Az Accutase kezelés további downstream alkalmazásai közé tartozik a sejtfelszíni markerek elemzése, vírusnövekedési vizsgálat, sejtproliferáció, tumorsejt-migrációs vizsgálatok, rutin sejtpassázs, termelés skálázása (bioreaktor) és áramlási citometria.
Az Accutase összetétele
Az Accutase nem tartalmaz emlős vagy bakteriális összetevőket, és egy természetes enzimkeverék proteolitikus és kollagénbontó enzimaktivitással. Sokkal alacsonyabb koncentrációban van megfogalmazva, mint a tripszin és a kollagenáz, így kevésbé mérgező és kíméletesebb, de ugyanolyan hatékony.
Az Accutase hatékonysága
Az Accutase bizonyítottan hatékony az elsődleges és őssejtek leválasztásában és a sejtek magas életképességének fenntartásában az állati eredetű enzimekkel, például a tripszinnel összehasonlítva. a sejtek 100%-a 10 perc után visszanyerhető, és az Accutase automatikus emésztésének köszönhetően a sejteket akár 45 percig is az Accutase-ban hagyhatjuk.
Összefoglalva
Összefoglalva, az Accutase egy hatékony megoldás, amely megváltoztatja a sejtkultúra játékát. Kíméletes természetével, hatékonyságával és sokoldalúságával az Accutase a tripszin ideális alternatívája. Ha megbízható és hatékony megoldást keres a sejtleválasztáshoz, az Accutase az Ön számára a megfelelő megoldás.75,00 EUR*Antibiotikum/antimikotikum oldat (100x)Termék áttekintés
Térfogat: 100 ml Tárolás: ≤-15°C Sterilitás: Steril szűrt
Az Antibiotikum/Antimikotikum oldat (100x) egy steril, felhasználásra kész koncentrátum, amelyet úgy terveztek, hogy csökkentse a mikrobiális szennyeződés kockázatát a sejtkultúrában és a kapcsolódó laboratóriumi alkalmazásokban. Ez a 100x oldat a penicillin, a streptomicin és az amfotericin B jól bevált kombinációját tartalmazza, amely széles spektrumú antimikrobiális aktivitást biztosít Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok, élesztők és fonalas gombák ellen. A készítmény alkalmas eukarióta sejttenyészetekben, bakteriális táptalajokon és más, szennyeződésre érzékeny rendszerekben történő felhasználásra, támogatva a tiszta és következetes laboratóriumi műveleteket.
Alkalmazás és előnyök A rutin kutatási protokollokhoz optimalizált oldatot széles körben használják a sejtkultúra munkafolyamatok aszeptikus körülményeinek fenntartására. Megbízható teljesítményt nyújt a szennyeződésre érzékeny környezetekben, segítve a kutatókat a mikrobák elszaporodásának kockázatának csökkentésében anélkül, hogy veszélyeztetné a sejtek egészségét vagy a kísérleti reprodukálhatóságot. A sterilszűrt formuláció kiküszöböli a további szolubilizációs lépések szükségességét, támogatva a racionalizált médiumkészítést és csökkentve a napi laboratóriumi eljárások variabilitását.
Használat és kompatibilitás A standard munkakoncentrációk eléréséhez hígítsa az oldatot 1:100 arányban a teljes táptalajhoz. A termék kompatibilis az emlős sejtvonalak és alapközegek széles skálájával. A folyamatos készletelérhetőségnek köszönhetően a kutatók számára előnyös a megbízható ellátás folyamatossága és az egyszerűsített logisztikai tervezés. Az oldatot ≤ -15 °C-on kell tárolni, és a stabilitás megőrzése érdekében védeni kell az ismételt fagyasztási-olvasztási ciklusoktól. Kizárólag kutatási célú felhasználásra. Nem használható diagnosztikai vagy terápiás eljárásokban. Nem használható embereken vagy állatokon.45,00 EUR*PBSFoszfát-pufferelt sóoldat (PBS) oldat
A foszfátpufferelt sóoldat (PBS) a biológiai és kémiai kutatásokban széles körben használt pufferoldat. Fontos szerepet játszik a pH-egyensúly és az ozmolaritás fenntartásában a különböző kísérleti eljárások során, beleértve a szövetfeldolgozást és a sejttenyésztést. PBS-oldatunkat nagy gondossággal, nagy tisztaságú összetevőkkel állítjuk össze, hogy minden kísérletben biztosítsuk a stabilitást és a megbízhatóságot. PBS-ünk ozmolaritása és ionkoncentrációja szorosan utánozza az emberi szervezetben uralkodó értékeket, így izotóniás és a legtöbb sejtre nem mérgező.
PBS-oldatunk összetétele
A PBS oldatunk ultratisztaságú foszfátpufferek és sóoldatok pH-értékre beállított keveréke. Az 1X munkakoncentrációban a következőket tartalmazza:
8000 mg/l nátrium-klorid (NaCl)
200 mg/l kálium-klorid (KCl)
1150 mg/L nátrium-foszfát kétbázisú vízmentes (Na2HPO4)
200 mg/L Kálium-foszfát monobázikus vízmentes (KH2PO4)
Ez az összetétel optimális pH
- és ionegyensúlyt biztosít, amely a biológiai alkalmazások széles köréhez alkalmas.
A PBS-oldatunk alkalmazásai
PBS-oldatunk ideális a biológiai kutatások különböző alkalmazásaihoz. Izotóniás és nem toxikus tulajdonságai alkalmassá teszik az anyagok hígítására és a sejttartályok öblítésére. Az EDTA-t tartalmazó PBS-oldatok hatékonyan oldják a megtapadt és csomósodott sejteket. Kétértékű fémeket, például cinket azonban nem szabad a PBS-hez adni, mivel ez csapadékképződést okozhat. Ilyen esetekben a Good pufferek használata ajánlott. Ezenkívül a PBS-oldatunk elfogadható alternatívája a vírusszállító közegnek az RNS-vírusok, köztük a SARS-CoV-2 szállítására és tárolására.
Minőségellenőrzés
Steril szűrt
Tárolás és eltarthatósági idő
Tárolja +2°C és +25°C között, fénytől védve.
Felbontás után 2°C és 25°C között tárolja, és 24 hónapon belül használja fel.
Szállítási feltételek
Környezeti hőmérséklet
Karbantartás
Hűtve, +2°C és +8°C között, sötétben tárolja. Kerülje a fagyasztást és a gyakori melegítést +37°C-ra, mivel ez csökkenti a termék minőségét.
Ne melegítse a közeget 37°C fölé, és ne használjon ellenőrizetlen hőforrásokat, például mikrohullámú készülékeket.
Ha a táptalajnak csak egy részét kívánja felhasználni, vegye ki a szükséges mennyiséget, és felhasználás előtt melegítse fel szobahőmérsékletűre.
Összetétel
Kategória
Összetevők
Koncentráció (mg/l)
Sók
Kálium-klorid
200
Kálium-foszfát monobázikus vízmentes
200
Nátrium-klorid
8000
Nátrium-foszfát kétbázisú, vízmentes
115020,00 EUR* -
Kapcsolódó termékek
Kapcsolódó termékek