DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3
DMEM:Ham's F12 è un terreno di coltura basale ampiamente riconosciuto e utilizzato nella ricerca biologica. Serve come fonte fondamentale di nutrienti per la crescita di varie linee cellulari di mammifero, in particolare se integrato con siero bovino fetale (FBS).
Questa formulazione unica combina il Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) e l'Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in un preciso rapporto di 1:1. L'aggiunta di L-glutammina ne migliora ulteriormente la composizione.
Il DMEM, derivato dall'Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offre una maggiore concentrazione di aminoacidi e vitamine rispetto al suo predecessore. Ham's F-12, invece, è basato sul terreno Ham's F-10 e fornisce un insieme complementare di componenti essenziali.
Per favorire una crescita cellulare ottimale, è prassi comune integrare il DMEM:Ham's F12 con FBS a una concentrazione tipica del 5-10%. Questa aggiunta è necessaria in quanto il terreno di coltura manca di ormoni della crescita, lipidi e proteine fondamentali per lo sviluppo cellulare.
Il DMEM:Ham's F12 incorpora un sistema tampone di pH e viene spesso integrato con il rosso fenolo, un indicatore di pH. Le cellule coltivate in DMEM:Ham's F12, o in qualsiasi terreno che utilizzi il sistema tampone del bicarbonato, richiedono un ambiente controllato con CO2 del 5-10% per mantenere livelli di pH appropriati.
Controllo di qualità
- Filtrato sterile
Conservazione e durata di conservazione
- Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
- Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.
Condizioni di spedizione
- Temperatura ambiente
Manutenzione
- Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
- Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
- Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.
Composizione
| Categoria | Componenti | Concentrazione (mg/L) |
| Aminoacidi | Glicina | 18.75 |
| L-alanina | 4.45 | |
| L-Arginina HCl | 147.50 | |
| L-Asparagina H₂O | 7.50 | |
| Acido L-Aspartico | 6.65 | |
| L-Cisteina HCl H₂O | 17.56 | |
| L-cistina 2 HCl | 31.29 | |
| Acido L-Glutammico | 7.35 | |
| L-Glutammina | 365.00 | |
| L-istidina HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucina | 54.47 | |
| L-Leucina | 59.05 | |
| L-lisina HCl | 91.25 | |
| L-metionina | 17.24 | |
| L-fenilalanina | 35.48 | |
| L-Prolina | 17.25 | |
| L-Serina | 26.25 | |
| L-treonina | 53.45 | |
| L-triptofano | 9.02 | |
| L-tirosina sale disodico | 48.10 | |
| L-Valina | 52.85 | |
| Vitamine | D-Biotina | 0.0035 |
| Cloruro di colina | 8.98 | |
| D-pantotenato di calcio | 2.24 | |
| Acido folico | 2.66 | |
| mio-inositolo | 12.60 | |
| Nicotinamide | 2.02 | |
| Piridossina HCl | 0.031 | |
| Piridossale HCl | 2.00 | |
| Riboflavina | 0.219 | |
| Tiamina HCl | 2.17 | |
| Vitamina B12 | 0.68 | |
| Sali inorganici | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Altri componenti | D-Glucosio | 3151.00 |
| Ipossantina | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Acido linoleico | 0.042 | |
| Acido lipoico | 0.105 | |
| Sale sodico di rosso fenolo | 8.63 | |
| Putrescina 2 HCl | 0.081 | |
| Sodio piruvato | 55.00 | |
| Timidina | 0.365 |