Terreno 199, w: 2,7 mM di glutammina stabile, w: 2,2 g/L di NaHCO3, w: EBSS
Il Medium 199 è un terreno di coltura cellulare versatile e ampiamente utilizzato, appositamente formulato per la coltivazione di espianti primari. Questo terreno completo combina vitamine essenziali, aminoacidi e altri fattori per fornire una fonte di nutrimento completamente definita per una varietà di tipi di cellule. È particolarmente adatto per le cellule non trasformate, il che lo rende uno strumento prezioso per la ricerca biologica.
Il Medium 199 offre una serie di applicazioni in campo. Può mantenere efficacemente il complesso cumulo-ovocita (COC) e sostenere la maturazione in vitro degli ovociti. Inoltre, viene utilizzato per il risciacquo delle linee di aspirazione durante la raccolta di ovuli da vacche tedesche di razza Holstein. Inoltre, il Medium 199 è un terreno eccellente per la coltura di cellule endoteliali cardiache derivate da ratti. Queste applicazioni dimostrano la versatilità e l'adattabilità del Medium 199 alle varie esigenze sperimentali.
La storia
Lo sviluppo del Medium 199 negli anni '50 ha segnato un significativo progresso nei terreni di coltura dei tessuti. Prima della sua introduzione, molti terreni di coltura si basavano su prodotti di origine animale ed estratti di tessuto. Tuttavia, Morgan e colleghi rivoluzionarono il campo formulando una fonte nutrizionale completamente definita per le colture cellulari. Grazie agli esperimenti condotti con diverse combinazioni di vitamine, amminoacidi e altri fattori, hanno scoperto le eccezionali proprietà di promozione della crescita del Medium 199.
Controllo di qualità
- pH = 7,2 +/- 0,02 a 20-25°C.
- Ogni lotto è stato testato per verificare la sterilità e l'assenza di micoplasmi e batteri.
Manutenzione
- Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37°C riducono la qualità del prodotto.
- Non riscaldare il terreno di coltura a più di 37° C e non utilizzare fonti di calore incontrollabili (ad es. apparecchi a microonde).
- Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare questa quantità dal flacone e riscaldarla a temperatura ambiente.
- La durata di conservazione di qualsiasi terreno, ad eccezione del terreno di base, è di 8 settimane dalla data di produzione.
Composizione
| Componenti | mg/L | |
| Sali inorganici | Cloruro di calcio x 2H2O | 264,92 |
| Nitrato di ferro (III) x 9H2O | 0,72 | |
| Solfato di magnesio | 97,67 | |
| Cloruro di potassio | 400,00 | |
| Sodio acetato x 3H2O | 82,95 | |
| Cloruro di sodio | 6,800.00 | |
| Sodio diidrogeno fosfato x H2O | 140,00 | |
| Altri componenti | Adenina solfato | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Colesterolo | 0,20 | |
| 2'-deossiribosio | 0,50 | |
| D(+)-Glucosio anidro | 1,000.00 | |
| Glutatione (rosso) | 0,05 | |
| Guanina x HCl | 0,30 | |
| Ipossantina | 0,30 | |
| Rosso fenolo | 10,00 | |
| D-Ribosio | 0,50 | |
| Timina | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Uracile | 0,30 | |
| Xantina | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Aminoacidi | L-alanina | 25,00 |
| L-Arginina x HCl | 70,00 | |
| Acido L-aspartico | 30,00 | |
| L-cisteina x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-cistina | 20,00 | |
| L-Glutammina stabile | 149,00 | |
| Acido L-Glutammico | 67,00 | |
| Glicina | 50,00 | |
| L-istidina x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-idrossiprolina | 10,00 | |
| L-Isoleucina | 20,00 | |
| L-leucina | 60,00 | |
| L-lisina x HCl | 70,00 | |
| L-metionina | 15,00 | |
| L-fenilalanina | 25,00 | |
| L-Prolina | 40,00 | |
| L-Serina | 25,00 | |
| L-treonina | 30,00 | |
| L-triptofano | 10,00 | |
| L-Tirosina | 40,00 | |
| L-Valina | 25,00 | |
| Vitamine | acido 4-amino benzoico | 0,05 |
| Acido ascorbico | 0,05 | |
| D(+)-Biotina | 0,01 | |
| Calciferolo | 0,10 | |
| D-pantotenato di calcio | 0,01 | |
| Cloruro di colina | 0,50 | |
| Acido folico | 0,01 | |
| mio-inositolo | 0,05 | |
| Menadione | 0,01 | |
| Acido nicotinico | 0.025 | |
| Nicotinamide | 0.025 | |
| Piridossale x HCl | 0.025 | |
| Piridossolo x HCl | 0.025 | |
| Riboflavina | 0,01 | |
| DL-α-Tocoferolo fosfato sale disodico | 0,01 | |
| Tiamina x HCl | 0,01 | |
| Vitamina A acetato | 0,14 |