DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM: Ham's F12 yra plačiai pripažinta ir plačiai naudojama bazinė terpė ląstelių kultūroms biologiniuose tyrimuose. Ji yra pagrindinis maistinių medžiagų šaltinis įvairioms žinduolių ląstelių linijoms auginti, ypač kai ji papildyta galvijų vaisiaus serumu (FBS).
Šiame unikaliame preparate tiksliu santykiu 1:1 derinama Dulbeko modifikuota Eagle terpė (DMEM) ir Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12). Jos sudėtį dar labiau pagerina pridėtas L-glutaminas.
DMEM, gauta iš Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), pasižymi didesne aminorūgščių ir vitaminų koncentracija, palyginti su ankstesne terpe. Tuo tarpu Ham's F-12 sukurta iš Ham's F-10 terpės, todėl joje yra papildomas būtiniausių komponentų rinkinys.
Siekiant palaikyti optimalų ląstelių augimą, įprasta DMEM:Ham's F12 papildyti FBS, kurio koncentracija paprastai yra 5-10 %. Šis priedas būtinas, nes terpėje trūksta augimo hormonų, lipidų ir baltymų, būtinų ląstelių vystymuisi.
DMEM:Ham's F12 turi pH buferinę sistemą ir dažnai papildoma pH indikatoriumi - fenol raudonuoju. DMEM:Ham's F12 arba bet kokioje terpėje, kurioje naudojama bikarbonatinė buferinė sistema, kultivuojamoms ląstelėms reikia kontroliuojamos 5-10 % CO2 aplinkos, kad būtų palaikomas tinkamas pH lygis.
Kokybės kontrolė
- Steriliai filtruota
Laikymas ir galiojimo laikas
- Laikyti nuo +2 °C iki +8 °C temperatūroje, saugoti nuo šviesos.
- Atidarytą laikyti 4 °C temperatūroje ir sunaudoti per 6-8 savaites.
Gabenimo sąlygos
- Aplinkos temperatūra
Priežiūra
- Laikyti šaldytuve nuo +2°C iki +8°C temperatūroje, tamsioje vietoje. Venkite užšaldymo ir dažno pašildymo iki +37°C, nes tai pablogina produkto kokybę.
- Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37°C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pavyzdžiui, mikrobangų krosnelių.
- Jei reikia naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite iki kambario temperatūros.
Sudėtis
| Kategorija | Sudedamosios dalys | Koncentracija (mg/l) |
| Aminorūgštys | Glicinas | 18.75 |
| L-alaninas | 4.45 | |
| L-arginino HCl | 147.50 | |
| L-asparaginas H₂O | 7.50 | |
| L-asparto rūgštis | 6.65 | |
| L-cisteino HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cistinas 2 HCl | 31.29 | |
| L-gliutamo rūgštis | 7.35 | |
| L-gliutaminas | 365.00 | |
| L-histidino HCl H₂O | 31.48 | |
| L-izoleucinas | 54.47 | |
| L-leucinas | 59.05 | |
| L-lizinas HCl | 91.25 | |
| L-metioninas | 17.24 | |
| L-fenilalaninas | 35.48 | |
| L-prolinas | 17.25 | |
| L-serinas | 26.25 | |
| L-treoninas | 53.45 | |
| L-triptofanas | 9.02 | |
| L-tirozino dinatrio druska | 48.10 | |
| L-Valinas | 52.85 | |
| Vitaminai | D-biotinas | 0.0035 |
| Cholino chloridas | 8.98 | |
| D-kalcio pantotenatas | 2.24 | |
| Folio rūgštis | 2.66 | |
| mio-izitolis | 12.60 | |
| Nikotinamidas | 2.02 | |
| Piridoksino HCl | 0.031 | |
| Piridoksalio HCl | 2.00 | |
| Riboflavinas | 0.219 | |
| Tiamino HCl | 2.17 | |
| Vitaminas B12 | 0.68 | |
| Neorganinės druskos | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Kiti komponentai | D-gliukozė | 3151.00 |
| Hipoksantinas | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolo rūgštis | 0.042 | |
| Lipoinė rūgštis | 0.105 | |
| Fenolio raudonojo natrio druska | 8.63 | |
| Putrescinas 2 HCl | 0.081 | |
| Natrio piruvatas | 55.00 | |
| Timidinas | 0.365 |