Hamo F12K terpė, w: 2,0 mM L-glutamino, w: 2,0 mM natrio piruvato, w: 2,5 g/l NaHCO3
Pristatome "Ham's F-12K" (Kaighn's) terpę - specializuotą "Ham's F-12" terpės modifikaciją, sukurtą atsižvelgiant į unikalius biologinių tyrimų reikalavimus. Ši patobulinta terpė pasižymi išskirtiniais privalumais, nes pagerina pirminių žmogaus hepatocitų, taip pat žiurkių ir vištų kepenų ląstelių kultivavimą, ypač esant sumažintam serumo kiekiui.
Ham's F-12K (Kaighn's) terpė yra kruopščiai sukurta siekiant optimizuoti ląstelių auginimo sąlygas. Jos sudėtis yra praturtinta, todėl joje yra padidintas pagrindinių komponentų, tokių kaip aminorūgštys ir natrio piruvatas, kiekis, taip pat papildomų elementų, įskaitant putresciną, timidiną, hipoksantiną ir cinką. Šie priedai leidžia tyrėjams papildyti terpę minimaliu serumo kiekiu arba tam tikrų ląstelių tipų komponentais, taip palengvinant tikslių eksperimentų sąlygas.
Pažymėtina, kad Ham's F-12K (Kaighn's) terpėje nėra baltymų ar augimo veiksnių. Todėl dažnai reikia papildyti augimo veiksniais ir galvijų vaisiaus serumu (FBS), todėl tyrėjai gali pritaikyti terpę pagal konkrečių ląstelių linijų reikalavimus. Siekiant optimalių rezultatų, FBS koncentracija turi būti kruopščiai optimizuota kiekvienai ląstelių linijai, kad būtų užtikrintas optimalus augimas ir funkcionalumas.
Siekiant palaikyti fiziologinį pH, Ham's F-12K (Kaighn's) terpėje naudojama natrio bikarbonato buferinė sistema (2,5 g/l), todėl auginimo metu būtina palaikyti kontroliuojamą 5-10 % CO2 aplinką. Tai užtikrina, kad terpės pH išliktų idealioje ląstelių augimui ir gyvybingumui ribose
Kokybės kontrolė
- pH = 7,2 +/- 0,02 20-25 °C temperatūroje.
- Kiekviena partija buvo patikrinta dėl sterilumo ir mikoplazmos bei bakterijų nebuvimo.
Priežiūra
- Laikyti šaldytuve nuo +2°C iki +8°C temperatūroje, tamsoje. Užšaldymas ir pašildymas iki +37°C sumažina produkto kokybę.
- Nešildykite terpės iki aukštesnės nei 37°C temperatūros ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių (pvz., mikrobangų krosnelės prietaisų).
- Jei reikia naudoti tik dalį terpės, išimkite šį kiekį iš buteliuko ir pašildykite jį kambario temperatūroje.
- Bet kurios terpės, išskyrus pagrindinę terpę, galiojimo laikas yra 8 savaitės nuo pagaminimo datos.
Sudėtis
| Sudedamosios dalys | mg/l | |
| Neorganinės druskos | Kalcio chloridas x 2H2O | 135,24 |
| Vario(II) sulfatas x 5H2O | 0,00 | |
| Geležies (II) sulfatas x 7H2O | 0,83 | |
| Magnio chloridas x 6H2O | 105,72 | |
| Magnio sulfatas x 7H2O | 394,49 | |
| Kalio chloridas | 283,29 | |
| Kalio dihidrogenfosfatas | 58,52 | |
| Natrio chloridas | 7597,20 | |
| dinatrio vandenilio fosfatas bevandenis |
115,02 | |
| Cinko sulfatas x 7H2O | 0,14 | |
| Kiti komponentai | D(+)-gliukozė, bevandenė | 1260,00 |
| Hipoksantinas | 4,08 | |
| DL-α-lipoinė rūgštis | 0,21 | |
| Raudonasis fenolis | 3,00 | |
| Putrescinas x 2HCl | 0,32 | |
| Natrio piruvatas | 220,00 | |
| NaHCO3 | 2500,00 | |
| Timidinas | 0,73 | |
| Amino rūgštys | L-alaninas | 17,82 |
| L-argininas x HCl | 421,40 | |
| L-asparaginas x H2O | 30,02 | |
| L-asparagino rūgštis | 26,62 | |
| L-cisteinas x HCl x H2O | 70,24 | |
| L-glutaminas | 292,20 | |
| L-gliutamo rūgštis | 29,42 | |
| Glicinas | 15,01 | |
| L-histidinas x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-izoleucinas | 7,87 | |
| L-leucinas | 26,24 | |
| L-lizinas x HCl | 73,04 | |
| L-metioninas | 8,95 | |
| L-fenilalaninas | 9,91 | |
| L-prolinas | 69,06 | |
| L-serinas | 21,02 | |
| L-treoninas | 23,82 | |
| L-triptofanas | 4,08 | |
| L-tirozinas | 10,87 | |
| L-Valinas | 23,42 | |
| Vitaminai | D(+)-biotinas | 0,07 |
| D-kalcio pantotenatas | 0,48 | |
| Cholino chloridas | 13,96 | |
| Folio rūgštis | 1,32 | |
| mio-izitolis | 18,02 | |
| Nikotinamidas | 0,04 | |
| Piridoksinas x HCl | 0,06 | |
| Riboflavinas | 0,04 | |
| Tiaminas x HCl | 0,34 | |
| Vitaminas B12 | 1,36 |