RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 terpė, dar žinoma kaip RPMI terpė, yra labai universali ląstelių kultūrų terpė, plačiai naudojama biologiniuose tyrimuose įvairioms žinduolių ląstelėms auginti. Šios terpės pavadinimą 1966 m. sukūrė George'as E. Moore'as, Robertas E. Gerneris ir H. Addisonas Franklinas garsiajame Roswell Park Comprehensive Cancer Center, o jos pavadinimas kilo iš Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Iš pradžių sukurta žmogaus leukeminėms ląstelėms auginti suspensinėse ir viensluoksnėse kultūrose, RPMI 1640 terpė, mokslininkams ir komerciniams tiekėjams ją modifikavus, tapo tinkama įvairioms žinduolių ląstelėms. Ji itin suderinama su tokiomis ląstelių linijomis kaip HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocitais ir karcinomomis.
RPMI 1640 terpė išsiskiria iš kitų ląstelių kultūrų terpių dėl savo unikalios sudėties. Joje yra daug fosfatų, aminorūgščių ir vitaminų. Ypač daug biotino, vitamino B12 ir PABA, kurių nėra Eagle's Minimal Essential Medium arba Dulbecco's Modified Eagle Medium. Be to, RPMI 1640 terpėje yra gerokai didesnė vitaminų inozitolio ir cholino koncentracija. Tačiau joje nėra baltymų, lipidų ir augimo veiksnių. Todėl norint sudaryti optimalias sąlygas ląstelėms augti, paprastai reikia papildyti 10 % galvijų vaisiaus serumo (FBS).
RPMI 1640 terpės buferinė sistema priklauso nuo natrio bikarbonato, o fiziologiškai tinkamam pH palaikyti būtina 5-10 % CO2 aplinka. Šią terpę iš kitų terpių dar labiau išskiria tai, kad joje yra redukuojamosios medžiagos glutationo.
Kokybės kontrolė
- Steriliai filtruota
Laikymas ir galiojimo laikas
- Laikyti nuo +2 °C iki +8 °C temperatūroje, saugoti nuo šviesos.
- Atidarytą laikykite 4 °C temperatūroje ir sunaudokite per 6-8 savaites.
Gabenimo sąlygos
- Aplinkos temperatūra
Priežiūra
- Laikyti šaldytuve nuo +2°C iki +8°C temperatūroje, tamsioje vietoje. Venkite užšaldymo ir dažno pašildymo iki +37°C, nes tai pablogina produkto kokybę.
- Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37°C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pavyzdžiui, mikrobangų krosnelių.
- Jei reikia naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite iki kambario temperatūros.
Sudėtis
| Kategorija | Sudedamosios dalys | Koncentracija (mg/l) |
| Aminorūgštys | Glicinas | 10.00 |
| L-alanil-L-gliutaminas | 434.40 | |
| L-argininas | 200.00 | |
| L-asparaginasH2O | 56.82 | |
| L-asparagino rūgštis | 20.00 | |
| L-cistinas 2HCl | 65.20 | |
| L-gliutamo rūgštis | 20.00 | |
| L-histidinas HClH2O | 20.27 | |
| L-Hidroksi-L-Prolinas | 20.00 | |
| L-izoleucinas | 50.00 | |
| L-leucinas | 50.00 | |
| L-lizinas HCl | 40.00 | |
| L-metioninas | 15.00 | |
| L-fenilalaninas | 15.00 | |
| L-prolinas | 20.00 | |
| L-serinas | 30.00 | |
| L-treoninas | 20.00 | |
| L-triptofanas | 5.00 | |
| L-tirozinas 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-Valinas | 20.00 | |
| Vitaminai | p-amino benzenkarboksirūgštis | 1.00 |
| D-biotinas | 0.20 | |
| Cholino chloridas | 3.00 | |
| D-kalcio pantotenatas | 0.25 | |
| Folio rūgštis | 1.00 | |
| mio-izitolis | 35.00 | |
| Nikotinamidas | 1.00 | |
| Piridoksino HCl | 1.00 | |
| Riboflavinas | 0.20 | |
| Tiamino HCl | 1.00 | |
| Vitaminas B12 | 0.005 | |
| Neorganinės druskos | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Kiti komponentai | D-gliukozė | 2000.00 |
| L-Glutationas redukuotas | 1.00 | |
| Fenolio raudonojo natrio druska | 5.30 |