Terpė 199, w: 2,7 mM stabilus glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
199 terpė yra universali ir plačiai naudojama ląstelių kultūrų terpė, specialiai sukurta pirminiams eksplantams auginti. Šioje visapusiškoje terpėje derinami svarbiausi vitaminai, aminorūgštys ir kiti veiksniai, kad būtų visiškai apibrėžtas maistinių medžiagų šaltinis įvairių tipų ląstelėms. Ji ypač tinka netransformuotoms ląstelėms, todėl yra neįkainojama biologinių tyrimų priemonė.
199 terpė siūlo daugybę pritaikymo sričių. Ji gali veiksmingai palaikyti kumulusų ir aocitų kompleksą (COC) ir palaikyti oocitų brendimą in vitro. Be to, ji naudojama skalaujant aspiracines linijas renkant kiaušialąstes iš Vokietijos holšteinų veislės karvių. Be to, 199 terpė yra puiki terpė iš žiurkių gautoms širdies endotelio ląstelėms auginti. Šie taikymai rodo terpės 199 universalumą ir pritaikomumą įvairiems eksperimentiniams poreikiams.
Istorija
XX a. šeštajame dešimtmetyje sukūrus terpę Nr. 199, padaryta didelė pažanga audinių kultūrų terpių srityje. Iki šios terpės atsiradimo daugelyje kultūrų terpių buvo naudojami gyvūninės kilmės produktai ir audinių ekstraktai. Tačiau Morganas ir jo kolegos padarė revoliuciją šioje srityje, sukurdami visiškai apibrėžtą mitybos šaltinį ląstelių kultūroms. Atlikdami eksperimentus su įvairiais vitaminų, aminorūgščių ir kitų veiksnių deriniais, jie atrado išskirtines augimą skatinančias 199 terpės savybes.
Kokybės kontrolė
- pH = 7,2 +/- 0,02 20-25 °C temperatūroje.
- Kiekviena partija buvo patikrinta dėl sterilumo ir mikoplazmos bei bakterijų nebuvimo.
Priežiūra
- Laikykite šaldytuve nuo +2°C iki +8°C temperatūroje, tamsoje. Užšaldymas ir pašildymas iki +37 °C sumažina produkto kokybę.
- Nešildykite terpės iki aukštesnės nei 37° C temperatūros ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių (pvz., mikrobangų krosnelės prietaisų).
- Jei reikia naudoti tik dalį terpės, išimkite šį kiekį iš buteliuko ir pašildykite jį kambario temperatūroje.
- Bet kurios terpės, išskyrus pagrindinę terpę, galiojimo laikas yra 8 savaitės nuo pagaminimo datos.
Sudėtis
| Sudedamosios dalys | mg/l | |
| Neorganinės druskos | Kalcio chloridas x 2H2O | 264,92 |
| Geležies (III) nitratas x 9H2O | 0,72 | |
| Magnio sulfatas | 97,67 | |
| Kalio chloridas | 400,00 | |
| Natrio acetatas x 3H2O | 82,95 | |
| Natrio chloridas | 6,800.00 | |
| Natrio dihidrogenfosfatas x H2O | 140,00 | |
| Kiti komponentai | Adenino sulfatas | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Cholesterolis | 0,20 | |
| 2'-deoksiribozė | 0,50 | |
| D(+)-gliukozė bevandenė | 1,000.00 | |
| Glutationas (raudonas) | 0,05 | |
| Guaninas x HCl | 0,30 | |
| Hipoksantinas | 0,30 | |
| Raudonasis fenolis | 10,00 | |
| D-ribozė | 0,50 | |
| Timinas | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Uracilas | 0,30 | |
| Ksantinas | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Amino rūgštys | L-alaninas | 25,00 |
| L-argininas x HCl | 70,00 | |
| L-asparto rūgštis | 30,00 | |
| L-cisteinas x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-cistinas | 20,00 | |
| L-Glutaminas stabilus | 149,00 | |
| L-gliutamo rūgštis | 67,00 | |
| Glicinas | 50,00 | |
| L-histidinas x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-hidroksiprolinas | 10,00 | |
| L-izoleucinas | 20,00 | |
| L-leucinas | 60,00 | |
| L-lizinas x HCl | 70,00 | |
| L-metioninas | 15,00 | |
| L-fenilalaninas | 25,00 | |
| L-prolinas | 40,00 | |
| L-serinas | 25,00 | |
| L-treoninas | 30,00 | |
| L-triptofanas | 10,00 | |
| L-tirozinas | 40,00 | |
| L-Valinas | 25,00 | |
| Vitaminai | 4-amino benzenkarboksirūgštis | 0,05 |
| Askorbo rūgštis | 0,05 | |
| D(+)-biotinas | 0,01 | |
| Kalciferolis | 0,10 | |
| D-kalcio pantotenatas | 0,01 | |
| Cholino chloridas | 0,50 | |
| Folio rūgštis | 0,01 | |
| mio-izitolis | 0,05 | |
| Menadionas | 0,01 | |
| Nikotino rūgštis | 0.025 | |
| Nikotinamidas | 0.025 | |
| Piridoksalio x HCl | 0.025 | |
| Piridoksolis x HCl | 0.025 | |
| Riboflavinas | 0,01 | |
| DL-α-tokoferolio fosfato dinatrio druska | 0,01 | |
| Tiaminas x HCl | 0,01 | |
| Vitamino A acetatas | 0,14 |