DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM: Hama F12 ir plaši atzīta un plaši izmantota bāzes barotne šūnu kultūru bioloģiskajos pētījumos. Tā kalpo kā pamata barības vielu avots dažādu zīdītāju šūnu līniju augšanai, jo īpaši, ja to papildina ar liellopu fetālo serumu (FBS).
Šis unikālais preparāts apvieno Dulbekko modificēto Ērgļa barotni (DMEM) un Hama F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) precīzā proporcijā 1:1. Tās sastāvu vēl vairāk uzlabo L-glutamīna pievienošana.
DMEM, kas atvasināts no Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), piedāvā lielāku aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju, salīdzinot ar iepriekšējo. Turpretī Ham's F-12 pamatā ir Ham's F-10 barotne, kas nodrošina papildu svarīgāko sastāvdaļu kopumu.
Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu, DMEM:Ham's F12 parasti papildina ar FBS 5-10 % koncentrācijā. Šī piedeva ir nepieciešama, jo barotnei trūkst augšanas hormonu, lipīdu un olbaltumvielu, kas ir būtiski šūnu attīstībai.
DMEM:Ham's F12 ietver pH buferu sistēmu, un to bieži papildina ar pH indikatoru - fenola sarkano. Lai uzturētu atbilstošu pH līmeni, šūnām, kas kultivētas DMEM:Ham's F12 vai jebkurā barotnē, kurā izmantota bikarbonāta bufera sistēma, nepieciešama kontrolēta CO2 vide 5-10 % apmērā.
Kvalitātes kontrole
- Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
- Uzglabāt no gaismas pasargātā +2 °C līdz +8 °C temperatūrā.
- Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un lietot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
- Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
- Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
- Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
- Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
| Kategorija | Sastāvdaļas | Koncentrācija (mg/l) |
| Aminoskābes | Glicīns | 18.75 |
| L-alanīns | 4.45 | |
| L-arginīns HCl | 147.50 | |
| L-asparagīns H₂O | 7.50 | |
| L-asparagīnskābe | 6.65 | |
| L-cisteīns HCl H₂O | 17.56 | |
| L-cistīns 2 HCl | 31.29 | |
| L-glutamīnskābe | 7.35 | |
| L-glutamīns | 365.00 | |
| L-Histidīna HCl H₂O | 31.48 | |
| L-izoleicīns | 54.47 | |
| L-leicīns | 59.05 | |
| L-lizīna HCl | 91.25 | |
| L-metionīns | 17.24 | |
| L-fenilalanīns | 35.48 | |
| L-Prolīns | 17.25 | |
| L-serīns | 26.25 | |
| L-treonīns | 53.45 | |
| L-triptofāns | 9.02 | |
| L-tirozīna dinātrija sāls | 48.10 | |
| L-valīns | 52.85 | |
| Vitamīni | D-Biotīns | 0.0035 |
| Holīna hlorīds | 8.98 | |
| D-kalcija pantotenāts | 2.24 | |
| Folijskābe | 2.66 | |
| mio-Inozitols | 12.60 | |
| Nikotīnamīds | 2.02 | |
| Piridoksīna HCl | 0.031 | |
| Piridoksāla HCl | 2.00 | |
| Riboflavīns | 0.219 | |
| Tiamīna HCl | 2.17 | |
| B12 vitamīns | 0.68 | |
| Neorganiskie sāļi | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Citi komponenti | D-glikoze | 3151.00 |
| Hipoksantīns | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolskābe | 0.042 | |
| Liposkābe | 0.105 | |
| Fenola sarkanais nātrija sāls | 8.63 | |
| Putrescīns 2 HCl | 0.081 | |
| Nātrija piruvāts | 55.00 | |
| Timidīns | 0.365 |