DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta
DMEM (Dulbekko modificētā Eagle barotne) ir ļoti universāla un plaši izmantota bāzes barotne, kas paredzēta dažādu zīdītāju šūnu augšanai bioloģiskajos pētījumos. Tā ir ideāla barotne primāro fibroblastu, neironu, glijas šūnu, HUVEC, gludās muskulatūras šūnu, kā arī tādu populāru šūnu līniju kā HeLa, 293, Cos-7 un PC-12 kultivēšanai.
DMEM atšķiras no citām barotnēm ar unikālu sastāvu. Tā satur iespaidīgu četrkāršu aminoskābju un vitamīnu koncentrācijas palielinājumu, salīdzinot ar oriģinālo Eagle's Minimal Essential Medium. Sākotnēji DMEM tika izstrādāta ar zemu glikozes (1 g/l) un nātrija piruvāta saturu, bet tagad to bieži izmanto ar augstāku glikozes saturu, ar nātrija piruvātu vai bez tā. DMEM nesatur olbaltumvielas, lipīdus vai augšanas faktorus, tāpēc to nepieciešams papildināt. Lai panāktu optimālu augšanu, DMEM parasti papildina ar 10 % liellopu fetālā seruma (FBS). Turklāt DMEM izmanto nātrija bikarbonāta bufera sistēmu, un, lai uzturētu fizioloģisku pH, ir nepieciešama 5-10 % CO2 vide.
Dulbekko modificētā Ērgļa barotne (DMEM) ir augsti novērtēta kā noteikta šūnu un audu kultūru barotne, kas apmierina dažādu adherējošu šūnu fenotipu augšanas vajadzības. Tā pārspēj oriģinālo Ērgļa barotni, kas tika izstrādāta pagājušā gadsimta 50. gados vistas šūnu kultivēšanai, pateicoties uzlabotam papildu sastāvam, kas pazīstams kā Dulbekko modifikācija. Šī modifikācija ievērojami palielina atsevišķu aminoskābju un vitamīnu saturu līdz pat četrām reizēm, salīdzinot ar oriģinālo barotni.
Šūnu kultūru jomā DMEM ir būtiska nozīme kā dažādu šūnu tipu, tostarp primāro šūnu, cilmes šūnu un transformētu šūnu, augšanas barotnei. Pētnieki izmanto modificēto DMEM versiju arī dažādiem pētījumiem, piemēram, zāļu atklāšanai, audu inženierijai un šūnu signalizācijas ceļu izpētei.
Kvalitātes kontrole
- Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
- Uzglabāt no gaismas pasargātā +2°C līdz +8°C temperatūrā.
- Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un izmantot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
- Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
- Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
- Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
- Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
| Kategorija | Sastāvdaļas | Koncentrācija (mg/l) |
| Aminoskābes | Glicīns | 30.00 |
| L-arginīns HCl | 84.00 | |
| L-cistīns 2 HCl | 62.57 | |
| L-glutamīns | 584.00 | |
| L-Histidīns HClH2O | 42.00 | |
| L-izoleicīns | 105.00 | |
| L-leicīns | 105.00 | |
| L-lizīns HCl | 146.00 | |
| L-metionīns | 30.00 | |
| L-fenilalanīns | 66.00 | |
| L-serīns | 42.00 | |
| L-treonīns | 95.00 | |
| L-triptofāns | 16.00 | |
| L-tirozīns 2 Na 2H2O | 103.79 | |
| L-valīns | 94.00 | |
| Vitamīni | Holīna hlorīds | 4.00 |
| D-kalcija pantotenāts | 4.00 | |
| Folijskābe | 4.00 | |
| mio-Inozitols | 7.20 | |
| Nikotīnamīds | 4.00 | |
| Piridoksāls HCl | 4.00 | |
| Riboflavīns | 0.40 | |
| Tiamīna HCl | 4.00 | |
| Neorganiskie sāļi | CaCl2 2H2O | 265.00 |
| Fe(NO3)3 9H2O | 0.10 | |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 200.10 | |
| NaCl | 6400.00 | |
| NaHCO3 | 3700.00 | |
| NaH2PO4 2H2O | 141.73 | |
| Citi komponenti | D-glikoze | 4500.00 |
| Fenola sarkanais nātrija sāls | 15.90 | |
| Nātrija piruvāts | 110.00 |