Hama F12K barotne, w: 2,0 mM L-glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,5 g/L NaHCO3
Iepazīstinām ar Ham's F-12K (Kaighn's) barotni - specializētu Ham's F-12 barotnes modifikāciju, kas izstrādāta, lai atbilstu unikālām bioloģisko pētījumu prasībām. Šī uzlabotā barotne piedāvā īpašas priekšrocības, uzlabojot primāro cilvēka hepatocītu, kā arī žurku un vistu aknu šūnu kultivēšanu, jo īpaši pazemināta seruma apstākļos.
Ham's F-12K (Kaighn's) barotne ir rūpīgi izstrādāta, lai optimizētu šūnu kultūras apstākļus. Tai ir bagātināts sastāvs, kas nodrošina paaugstinātu tādu būtisku sastāvdaļu kā aminoskābju un nātrija piruvāta, kā arī papildu elementu, tostarp putrescīna, timidīna, hipoksantīna un cinka, līmeni. Šie papildinājumi ļauj pētniekiem papildināt barotni ar minimālu seruma daudzumu vai noteiktiem komponentiem konkrētiem šūnu tipiem, tādējādi atvieglojot precīzus eksperimentālos apstākļus.
Hama F-12K (Kaigna) barotne nesatur olbaltumvielas vai augšanas faktorus. Tāpēc bieži vien ir nepieciešama papildināšana ar augšanas faktoriem un Fetal Bovine Serum (FBS), kas ļauj pētniekiem pielāgot barotni savu konkrēto šūnu līniju prasībām. Lai nodrošinātu optimālu veiktspēju, FBS koncentrācija ir rūpīgi jāoptimizē katrai šūnu līnijai, nodrošinot optimālu augšanu un funkcionalitāti.
Lai uzturētu fizioloģisko pH, Hama F-12K (Kaighn's) barotnē izmanto nātrija bikarbonāta buferisko sistēmu (2,5 g/l), tāpēc kultivēšanas laikā ir nepieciešama kontrolēta 5-10 % CO2 vide. Tas nodrošina, ka barotnes pH saglabājas ideālā diapazonā šūnu augšanai un dzīvotspējai
Kvalitātes kontrole
- pH = 7,2 +/- 0,02 20-25 °C temperatūrā.
- Katra partija ir pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību.
Uzturēšana
- Glabāt ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā tumsā. Sasaldēšana, kā arī sasilšana līdz +37°C samazina produkta kvalitāti.
- Nesildiet barotni līdz temperatūrai, kas pārsniedz 37°C, un neizmantojiet nekontrolējamus siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis).
- Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
- Jebkuras barotnes, izņemot pamata barotni, derīguma termiņš ir 8 nedēļas no izgatavošanas datuma.
Sastāvs
| Sastāvdaļas | mg/l | |
| Neorganiskie sāļi | Kalcija hlorīds x 2H2O | 135,24 |
| Vara(II) sulfāts x 5H2O | 0,00 | |
| Dzelzs (II) sulfāts x 7H2O | 0,83 | |
| Magnija hlorīds x 6H2O | 105,72 | |
| Magnija sulfāts x 7H2O | 394,49 | |
| Kālija hlorīds | 283,29 | |
| Kālija dihidrogēnfosfāts | 58,52 | |
| Nātrija hlorīds | 7597,20 | |
| nātrija hidrogēnfosfāts bezūdens |
115,02 | |
| Cinka sulfāts x 7H2O | 0,14 | |
| Citi komponenti | D(+)-glikoze, bezūdens viela | 1260,00 |
| Hipoksantīns | 4,08 | |
| DL-α-liposkābe | 0,21 | |
| Fenola sarkanais | 3,00 | |
| Putrescīns x 2HCl | 0,32 | |
| Nātrija piruvāts | 220,00 | |
| NaHCO3 | 2500,00 | |
| Timidīns | 0,73 | |
| Aminoskābes | L-alanīns | 17,82 |
| L-arginīns x HCl | 421,40 | |
| L-asparagīns x H2O | 30,02 | |
| L-asparagīnskābe | 26,62 | |
| L-cisteīns x HCl x H2O | 70,24 | |
| L-glutamīns | 292,20 | |
| L-glutamīnskābe | 29,42 | |
| Glicīns | 15,01 | |
| L-histidīns x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-izoleicīns | 7,87 | |
| L-leicīns | 26,24 | |
| L-lizīns x HCl | 73,04 | |
| L-metionīns | 8,95 | |
| L-fenilalanīns | 9,91 | |
| L-Prolīns | 69,06 | |
| L-serīns | 21,02 | |
| L-treonīns | 23,82 | |
| L-triptofāns | 4,08 | |
| L-tirozīns | 10,87 | |
| L-valīns | 23,42 | |
| Vitamīni | D(+)-biotīns | 0,07 |
| D-kalcija pantotenāts | 0,48 | |
| Holīna hlorīds | 13,96 | |
| Folijskābe | 1,32 | |
| mio-inositols | 18,02 | |
| Nikotīnamīds | 0,04 | |
| Piridoksīns x HCl | 0,06 | |
| Riboflavīns | 0,04 | |
| Tiamīns x HCl | 0,34 | |
| B12 vitamīns | 1,36 |