RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 barotne, pazīstama arī kā RPMI barotne, ir ļoti universāla šūnu kultūru barotne, ko plaši izmanto bioloģiskajos pētījumos dažādu zīdītāju šūnu kultivēšanai. Šīs barotnes nosaukums cēlies no tās izcelsmes Roswell Park Memorial Institute (RPMI), ko 1966. gadā slavenajā Roswell Park Comprehensive Cancer Center izstrādāja Džordžs E. Mūrs, Roberts E. Gerners un H. Adisons Franklins.
Sākotnēji izstrādāta cilvēka leikēmisko šūnu augšanai suspensijas un monoslāņa kultūrās, RPMI 1640 barotne, pētniekiem un komerciālajiem piegādātājiem veicot modifikācijas, ir kļuvusi piemērota dažādām zīdītāju šūnām. Tā ir īpaši saderīga ar tādām šūnu līnijām kā HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocīti un karcinomas.
RPMI 1640 barotne atšķiras no citām šūnu kultūru barotnēm ar savu unikālo sastāvu. Tā satur ievērojamu daudzumu fosfātu, aminoskābju un vitamīnu. Īpaši svarīgi, ka tajā ir biotīns, vitamīns B12 un PABA, kas nav iekļauti Eagle's Minimal Essential Medium vai Dulbecco's Modified Eagle Medium. Turklāt RPMI 1640 barotnē ir ievērojami paaugstināta vitamīnu inozitola un holīna koncentrācija. Tomēr tā nesatur olbaltumvielas, lipīdus vai augšanas faktorus. Tāpēc, lai nodrošinātu optimālus apstākļus šūnu augšanai, parasti ir nepieciešama papildināšana ar 10 % Fetal Bovine Serum (FBS).
RPMI 1640 barotnes buferēšanas sistēma balstās uz nātrija bikarbonātu, un, lai uzturētu fizioloģiski piemērotu pH, tai nepieciešama 5-10 % CO2 vide. Reducējošā aģenta glutationa iekļaušana vēl vairāk atšķir šo barotni no citām.
Kvalitātes kontrole
- Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
- Uzglabāt no gaismas pasargātā +2 °C līdz +8 °C temperatūrā.
- Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un lietot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
- Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
- Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
- Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
- Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
| Kategorija | Sastāvdaļas | Koncentrācija (mg/l) |
| Aminoskābes | Glicīns | 10.00 |
| L-alanil-L-glutamīns | 434.40 | |
| L-arginīns | 200.00 | |
| L-asparagīnsH2O | 56.82 | |
| L-asparagīnskābe | 20.00 | |
| L-cistīns 2HCl | 65.20 | |
| L-glutamīnskābe | 20.00 | |
| L-Histidīns HClH2O | 20.27 | |
| L-Hidroksi-L-Prolīns | 20.00 | |
| L-izoleicīns | 50.00 | |
| L-leicīns | 50.00 | |
| L-lizīns HCl | 40.00 | |
| L-metionīns | 15.00 | |
| L-fenilalanīns | 15.00 | |
| L-Prolīns | 20.00 | |
| L-serīns | 30.00 | |
| L-treonīns | 20.00 | |
| L-triptofāns | 5.00 | |
| L-tirozīns 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-Valīns | 20.00 | |
| Vitamīni | p-amīnbenzoskābe | 1.00 |
| D-Biotīns | 0.20 | |
| Holīna hlorīds | 3.00 | |
| D-kalcija pantotenāts | 0.25 | |
| Folijskābe | 1.00 | |
| mio-Inozitols | 35.00 | |
| Nikotīnamīds | 1.00 | |
| Piridoksīna HCl | 1.00 | |
| Riboflavīns | 0.20 | |
| Tiamīna HCl | 1.00 | |
| B12 vitamīns | 0.005 | |
| Neorganiskie sāļi | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Citi komponenti | D-glikoze | 2000.00 |
| L-Glutationa reducēts | 1.00 | |
| Fenola sarkanais nātrija sāls | 5.30 |