Komórki A549-RFP
800,00 €*
Produkty są wysyłane w stanie zamrożonym w suchym lodzie w probówkach kriogenicznych. Każda probówka kriogeniczna zawiera zazwyczaj 3 × 10 6 komórek dla linii adhezyjnych lub 5 × 106 komórek dla linii zawiesinowych (szczegółowe informacje znajdują się w certyfikacie analizy partii).
Informacje ogólne
| Opis | A549-RFP to znakowana fluorescencyjnie pochodna ludzkiej linii komórek gruczolakoraka płuca A549, zmodyfikowana genetycznie w celu konstytutywnej ekspresji czerwonego białka fluorescencyjnego (RFP) w celu wizualizacji i śledzenia w czasie rzeczywistym. Rodzicielska linia A549 została utworzona z gruczolakoraka płuca pochodzącego od dorosłego dawcy i wykazuje morfologię nabłonkową z cechami wzrostu przylegającego. Komórki A549 zachowują cechy komórek nabłonkowych pęcherzyków płucnych typu II, w tym ekspresję cytokeratin i zdolność do produkcji białek związanych z surfaktantem. Wprowadzenie stabilnej kasety ekspresji RFP umożliwia ciągłą fluorescencję bez znaczącej zmiany wewnętrznych właściwości proliferacyjnych i metabolicznych linii macierzystej, dzięki czemu A549-RFP nadaje się do badań obrazowania podłużnego. Charakterystyka funkcjonalna komórek A549 w dużych panelach komórek nowotworowych wykazała, że wielkość komórek, zawartość białka i szybkość syntezy białek są dodatnio skorelowane z objętością komórek, a większe komórki mają tendencję do wolniejszej proliferacji. W analizach porównawczych komórki A549 plasują się wśród stosunkowo mniejszych, szybciej proliferujących linii komórek nowotworowych nabłonka, w przeciwieństwie do większych, bardziej mezenchymalnych komórek, które wykazują wyższą ekspresję wimentyny i niższy poziom E-kadheryny. Te różnice metaboliczne i fenotypowe mają znaczenie dla interpretacji eksperymentalnej, ponieważ tempo syntezy białek i strumienie metaboliczne są proporcjonalne do wielkości komórek i wpływają na wrażliwość na środki ukierunkowane na proliferację lub szlaki anaboliczne regulowane przez mTOR. Modyfikacja RFP zachowuje przydatność komórek A549 do takich badań metabolicznych i farmakologicznych, umożliwiając jednocześnie bezpośrednią wizualizację. A549-RFP jest szeroko stosowany w systemach współhodowli, ortotopowych i ektopowych modelach przeszczepów heterogenicznych oraz testach inwazji lub przerzutów, w których znakowanie fluorescencyjne ułatwia odróżnienie komórek nowotworowych od elementów zrębu lub gospodarza. Stabilna czerwona fluorescencja wspiera zastosowania, w tym obrazowanie żywych komórek, przesiewanie o wysokiej zawartości, kwantyfikację opartą na cytometrii przepływowej oraz obrazowanie optyczne in vivo. Jako identyfikowalny wariant dobrze scharakteryzowanego modelu gruczolakoraka płuca, A549-RFP stanowi solidną platformę do badania proliferacji komórek nowotworowych, przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego, odpowiedzi na leki oraz interakcji między nowotworem a mikrośrodowiskiem zarówno w warunkach in vitro, jak i in vivo. |
|---|---|
| Organizm | Człowiek |
| Tkanka | Płuco |
| Choroba | Gruczolakorak płuc |
| Synonimy | A 549, A549, NCI-A549, A549/ATCC, A549 ATCC, A549ATCC, hA549 |
Charakterystyka
| Wiek | 58 lat |
|---|---|
| Płeć | Mężczyzna |
| Pochodzenie etniczne | Kaukaski |
Dane regulacyjne
| Cytat | A549-RFP (numer katalogowy Cytion 305659) |
|---|---|
| Poziom bezpieczeństwa biologicznego | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0023 |
| Status GMO | GMO-S1: Ta linia komórek raka płuca A549 zawiera konstrukcję lentowirusową RFP umożliwiającą obrazowanie w czerwonej fluorescencji. Klasyfikacja ta obowiązuje wyłącznie w Niemczech i może się różnić w innych krajach. |
Dane biomolekularne
| Ekspresja białka | zapytanie ofertowe |
|---|---|
| Status MSI | Mutacja: p.Gly12Ser, homozygotyczna; Mutacja: p.Gln37Ter, homozygotyczna |
| Profil mutacyjny | Mutacja: p.Gly12Ser, homozygotyczna; Mutacja: p.Gln37Ter, homozygotyczna |
Obsługa
| Podłoże hodowlane | DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementy | Uzupełnić podłoże 10% FBS |
| Odczynnik dysocjacyjny | Accutase |
| Czas podwojenia | 20–40 godzin |
| Środek zamrażający | Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu. |
| Rozmrażanie i hodowla komórek |
|
| Atmosfera inkubacji | 37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera. |
| Warunki wysyłki | Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania. |
| Warunki przechowywania | W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu. |
Kontrola jakości / Profil genetyczny / HLA
Umowa transferu materiałów
Jeśli zamierzają Państwo wykorzystywać linie komórkowe Cytion wyłącznie do badań wewnętrznych w jednym ośrodku badawczym, prosimy o wypełnienie i podpisanie naszej umowy o transferze materiałów (MTA) oraz przesłanie jej wraz z zamówieniem.
W przypadku wszelkich zastosowań komercyjnych — w tym między innymi prac wykonywanych za wynagrodzeniem, testów kontroli jakości, wprowadzania produktów na rynek, zastosowań diagnostycznych lub badań regulacyjnych — prosimy o wypełnienie formularza przeznaczenia, abyśmy mogli przygotować umowę dostosowaną do Państwa projektu.
Uwaga: Umowa MTA dotyczy tylko niektórych linii komórkowych. Jeśli ta informacja i dokument MTA pojawiają się na stronie produktu, umowa ma zastosowanie. W przypadku linii komórkowych nieobjętych umową MTA nie będzie wyświetlana żadna informacja o umowie. Umowa MTA nie obowiązuje klientów z Ameryki, Chin i Tajwanu. Aby otrzymać odpowiednią umowę, skontaktuj się z naszym oddziałem w Stanach Zjednoczonych.
-
Wymagane produkty
Wymagane produkty
Medium zamrażające CM-1 - 50 mlWarianty nośników do kriokonserwacji: 50 mlCytion's Freeze Medium CM-1 to najnowocześniejsza pożywka do kriokonserwacji zaprojektowana w celu zapewnienia najwyższego poziomu żywotności i funkcjonalności komórek po rozmrożeniu. Ta wszechstronna pożywka jest odpowiednia dla szerokiego spektrum typów komórek, w tym zarówno ludzkich, jak i zwierzęcych, co czyni ją niezbędnym narzędziem do różnorodnych zastosowań badawczych. Dzięki starannie zbilansowanej kombinacji krioprotektantów i niezbędnych składników odżywczych, Freeze Medium CM-1 minimalizuje tworzenie się kryształków lodu i stres komórkowy podczas procesu zamrażania, zachowując w ten sposób integralność komórek.
Kluczowe cechy Freeze Medium CM-1 obejmują:
Szeroka kompatybilność: Skuteczny dla szerokiej gamy typów komórek, w tym komórek pierwotnych, komórek macierzystych i ustalonych linii komórkowych.
Wysoka żywotność: Zoptymalizowany w celu maksymalizacji odzysku i żywotności komórek po rozmrożeniu, zapewniając wiarygodne wyniki eksperymentów.
Gotowy do użycia: Wygodnie przygotowany i wysterylizowany do natychmiastowego zastosowania, skracając czas przygotowania i zmniejszając ryzyko zanieczyszczenia.
Zwiększona stabilność: Utrzymuje stałą wydajność w standardowych warunkach kriokonserwacji, zapewniając powtarzalne wyniki.
Długi okres trwałości: CM-1 to zawierająca surowicę, gotowa do użycia pożywka do kriokonserwacji, którą można przechowywać w lodówce przez okres do jednego roku.
Używanie CM-1 do zamrażania komórek
Aby użyć CM-1 do zamrażania zarówno komórek adherentnych, jak i zawiesinowych, należy wykonać następujące kroki
W przypadku komórek przylegających należy je umyć i oddzielić od podłoża hodowlanego. W przypadku komórek w zawiesinie przejdź bezpośrednio do następnego kroku.
Policzyć komórki, aby upewnić się, że mają odpowiednie stężenie.
Odwirować komórki, aby je osuszyć, a następnie ponownie zawiesić w pożywce do zamrażania CM-1.
Przenieś ponownie zawieszone komórki do fiolek.
Użyj metody powolnego zamrażania przed przeniesieniem komórek do długoterminowego przechowywania
Metoda
Opis
Kroki
❄️
Ręczne zamrażanie
Metoda krok po kroku polegająca na stopniowym obniżaniu temperatury w celu zapewnienia żywotności komórek
1️⃣ Umieścić komórki w pożywce do zamrażania w temperaturze 4°C na 40 minut.
2️⃣ Przenieść do zamrażarki o temperaturze -80°C na 24 godziny.
3️⃣ Przechowywać komórki w ciekłym azocie w celu długotrwałego przechowywania
❄️
Korzystanie z Mr. Frosty
Wygodne urządzenie umożliwiające kontrolowane zamrażanie bez zasilania elektrycznego
1️⃣ Przygotować komórki w kriofiolach z pożywką do zamrażania.
2️⃣ Umieścić kriofiole w pojemniku Mr. Frosty.
3️⃣ Przechowywać w temperaturze -80°C przez 24 godziny przed przeniesieniem do ciekłego azotu
❄️
Zamrażarka o kontrolowanej prędkości
Precyzyjna zamrażarka firmy Thermo Fisher lub innych producentów przeznaczona do kontrolowanego obniżania temperatury
1️⃣ Zaprogramuj urządzenie tak, aby stopniowo obniżało temperaturę.
2️⃣ Umieść przygotowane komórki w zamrażarce.
3️⃣ Po cyklu zamrażania przenieś komórki do ciekłego azotu
Przechowywać kriofiole w temperaturze poniżej -130°C lub w ciekłym azocie w celu długotrwałego przechowywania.
Składniki
Zawiera FBS, DMSO, glukozę, sole
Zdolność buforowania: pH = 7,2 do 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-1 oferuje niezawodne rozwiązanie do kriokonserwacji, zapewniając wysoką żywotność komórek i funkcjonalność po rozmrożeniu w szerokim zakresie zastosowań badawczych.59,00 €*AccutaseWarianty: 100 mlOdczynnik do dysocjacji komórek Accutase
- delikatna alternatywa dla trypsyny
Accutase to roztwór do odłączania komórek, który rewolucjonizuje przemysł hodowli komórkowych. Jest to mieszanka enzymów proteolitycznych i kolagenolitycznych, która naśladuje działanie trypsyny i kolagenazy. W przeciwieństwie do trypsyny, Accutase nie zawiera żadnych składników pochodzących od ssaków lub bakterii i jest znacznie łagodniejszy dla komórek, co czyni go idealnym rozwiązaniem do rutynowego odłączania komórek od standardowych naczyń plastikowych do hodowli tkankowych i naczyń plastikowych pokrytych powłoką adhezyjną. W tym wpisie na blogu omówimy zalety i zastosowania Accutase oraz sposób, w jaki zmienia ona zasady gry w hodowli komórkowej.
Zalety Accutase
Accutase ma kilka zalet w porównaniu z tradycyjnymi roztworami trypsyny. Po pierwsze, może być stosowana wszędzie tam, gdzie potrzebne jest delikatne i skuteczne oderwanie dowolnej przylegającej linii komórkowej, co czyni ją bezpośrednim zamiennikiem trypsyny. Po drugie, Accutase działa wyjątkowo dobrze na embrionalnych i neuronalnych komórkach macierzystych i wykazano, że utrzymuje żywotność tych komórek po pasażowaniu. Po trzecie, Accutase zachowuje większość epitopów do późniejszej analizy cytometrii przepływowej, co czyni ją idealną do analizy markerów powierzchniowych komórek.
Dodatkowo, Accutase nie musi być neutralizowana podczas pasażowania przylegających komórek. Dodanie większej ilości pożywki po rozdzieleniu komórek rozcieńcza Accutase tak, że nie jest już w stanie oddzielić komórek. Eliminuje to potrzebę etapu inaktywacji i oszczędza czas techników zajmujących się hodowlą komórek. Wreszcie, Accutase nie musi być dzielona na porcje, a butelka jest stabilna w lodówce przez 2 miesiące.
Zastosowania Accutazy
Accutase jest bezpośrednim zamiennikiem roztworu trypsyny i może być stosowany do pasażowania linii komórkowych. Ponadto, Accutase dobrze sprawdza się podczas odłączania komórek w celu analizy wielu markerów powierzchniowych komórek za pomocą cytometrii przepływowej i sortowania komórek. Inne zastosowania Accutase obejmują analizę markerów powierzchniowych komórek, test wzrostu wirusa, proliferację komórek, testy migracji komórek nowotworowych, rutynowe pasażowanie komórek, zwiększanie skali produkcji (bioreaktor) i cytometrię przepływową.
Skład Accutazy
Accutase nie zawiera składników pochodzących od ssaków lub bakterii i jest naturalną mieszaniną enzymów o aktywności proteolitycznej i kolagenolitycznej. Jest formułowany w znacznie niższym stężeniu niż trypsyna i kolagenaza, dzięki czemu jest mniej toksyczny i łagodniejszy, ale równie skuteczny.
Skuteczność Accutase
Wykazano, że Accutase jest skuteczny w odłączaniu komórek pierwotnych i macierzystych oraz utrzymuje wysoką żywotność komórek w porównaniu z enzymami pochodzenia zwierzęcego, takimi jak trypsyna. 100% komórek jest odzyskiwanych po 10 minutach, a pozostawienie komórek w Accutase do 45 minut nie jest szkodliwe, dzięki automatycznemu trawieniu Accutase.
Podsumowanie
Podsumowując, Accutase to potężne rozwiązanie, które zmienia zasady gry w hodowli komórkowej. Dzięki swojej łagodności, wydajności i wszechstronności, Accutase jest idealną alternatywą dla trypsyny. Jeśli szukasz niezawodnego i wydajnego rozwiązania do odłączania komórek, Accutase jest rozwiązaniem dla Ciebie.75,00 €*Roztwór antybiotyku/przeciwgrzybiczy (100x)Przegląd produktów
Pojemność: 100 ml Przechowywanie: ≤-15°C Sterylność: Sterylnie filtrowany
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) to sterylny, gotowy do użycia koncentrat zaprojektowany w celu zmniejszenia ryzyka skażenia mikrobiologicznego w hodowli komórkowej i powiązanych zastosowaniach laboratoryjnych. Roztwór 100x zawiera dobrze znane połączenie penicyliny, streptomycyny i amfoterycyny B, zapewniając szerokie spektrum działania przeciwdrobnoustrojowego przeciwko bakteriom Gram-dodatnim i Gram-ujemnym, drożdżom i grzybom nitkowatym. Preparat nadaje się do stosowania w hodowlach komórek eukariotycznych, pożywkach bakteryjnych i innych systemach wrażliwych na zanieczyszczenia, wspierając czyste i spójne operacje laboratoryjne.
Zastosowanie i korzyści Rozwiązanie to, zoptymalizowane pod kątem rutynowych protokołów badawczych, jest szeroko stosowane do utrzymywania aseptycznych warunków w procesach hodowli komórkowych. Zapewnia niezawodne działanie w środowiskach wrażliwych na zanieczyszczenia, pomagając naukowcom zmniejszyć ryzyko przerostu drobnoustrojów bez uszczerbku dla zdrowia komórek lub powtarzalności eksperymentów. Sterylnie filtrowana formuła eliminuje potrzebę dodatkowych etapów solubilizacji, wspierając usprawnione przygotowanie mediów i zmniejszając zmienność w codziennych procedurach laboratoryjnych.
Zastosowanie i kompatybilność Aby uzyskać standardowe stężenia robocze, należy rozcieńczyć roztwór w stosunku 1:100 w pełnym podłożu hodowlanym. Produkt jest kompatybilny z szeroką gamą linii komórkowych ssaków i pożywek podstawowych. Dzięki stałej dostępności produktu, badacze mogą korzystać z niezawodnej ciągłości dostaw i uproszczonego planowania logistycznego. Roztwór należy przechowywać w temperaturze ≤ -15 °C i chronić przed powtarzającymi się cyklami zamrażania i rozmrażania w celu zachowania stabilności. Wyłącznie do użytku badawczego. Nie stosować w procedurach diagnostycznych lub terapeutycznych. Nie stosować u ludzi ani zwierząt.45,00 €*PBSRoztwór soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS)
Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS) jest szeroko stosowanym roztworem buforowym w badaniach biologicznych i chemicznych. Odgrywa kluczową rolę w utrzymywaniu równowagi pH i osmolarności podczas różnych procedur eksperymentalnych, w tym przetwarzania tkanek i hodowli komórkowej. Nasz roztwór PBS jest starannie opracowany ze składników o wysokiej czystości, aby zapewnić stabilność i niezawodność w każdym eksperymencie. Osmolarność i stężenia jonów naszego PBS ściśle naśladują te występujące w ludzkim organizmie, dzięki czemu jest on izotoniczny i nietoksyczny dla większości komórek.
Skład naszego roztworu PBS
Nasz roztwór PBS to dostosowana pod względem pH mieszanka ultraczystych buforów fosforanowych i roztworów soli fizjologicznej. W stężeniu roboczym 1X zawiera:
8000 mg/l chlorku sodu (NaCl)
200 mg/l chlorku potasu (KCl)
1150 mg/L Bezwodny dwuzasadowy fosforan sodu (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforan potasu jednozasadowy bezwodny (KH2PO4)
Taki skład zapewnia optymalne pH i równowagę jonową, odpowiednie do szerokiego zakresu zastosowań biologicznych.
Zastosowania naszego roztworu PBS
Nasz roztwór PBS jest idealny do różnych zastosowań w badaniach biologicznych. Jego izotoniczne i nietoksyczne właściwości sprawiają, że nadaje się do rozcieńczania substancji i płukania pojemników z komórkami. Roztwory PBS zawierające EDTA są skuteczne w odłączaniu przyczepionych i zbrylonych komórek. Do PBS nie należy jednak dodawać metali dwuwartościowych, takich jak cynk, ponieważ może to spowodować wytrącanie się osadów. W takich przypadkach zalecane są bufory Good's. Ponadto nasz roztwór PBS jest akceptowalną alternatywą dla wirusowego podłoża transportowego do transportu i przechowywania wirusów RNA, w tym SARS-CoV-2.
Kontrola jakości
Sterylnie filtrowany
Przechowywanie i okres trwałości
Przechowywać w temperaturze od +2°C do +25°C, chronić przed światłem.
Po otwarciu przechowywać w temperaturze od 2°C do 25°C i zużyć w ciągu 24 miesięcy.
Warunki wysyłki
Temperatura otoczenia
Konserwacja
Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C w ciemności. Unikać zamrażania i częstego podgrzewania do temperatury +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu.
Nie podgrzewać nośnika powyżej 37°C ani nie używać niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak urządzenia mikrofalowe.
Jeśli ma być użyta tylko część pożywki, należy usunąć wymaganą ilość i ogrzać ją do temperatury pokojowej przed użyciem.
Skład
Kategoria
Składniki
Stężenie (mg/L)
Sole
Chlorek potasu
200
Fosforan potasu jednozasadowy bezwodny
200
Chlorek sodu
8000
Bezwodny dwuzasadowy fosforan sodu
115020,00 €* -
Powiązane produkty
Powiązane produkty