Komórki BV2

Cytion's Freeze Medium CM-1 to najnowocześniejsza pożywka do kriokonserwacji zaprojektowana w celu zapewnienia najwyższego poziomu żywotności i funkcjonalności komórek po rozmrożeniu. Ta wszechstronna pożywka jest odpowiednia dla szerokiego spektrum typów komórek, w tym zarówno ludzkich, jak i zwierzęcych, co czyni ją niezbędnym narzędziem do różnorodnych zastosowań badawczych. Dzięki starannie zbilansowanej kombinacji krioprotektantów i niezbędnych składników odżywczych, Freeze Medium CM-1 minimalizuje tworzenie się kryształków lodu i stres komórkowy podczas procesu zamrażania, zachowując w ten sposób integralność komórek.
Kluczowe cechy Freeze Medium CM-1 obejmują:

Szeroka kompatybilność: Skuteczny dla szerokiej gamy typów komórek, w tym komórek pierwotnych, komórek macierzystych i ustalonych linii komórkowych.
Wysoka żywotność: Zoptymalizowany w celu maksymalizacji odzysku i żywotności komórek po rozmrożeniu, zapewniając wiarygodne wyniki eksperymentów.
Gotowy do użycia: Wygodnie przygotowany i wysterylizowany do natychmiastowego zastosowania, skracając czas przygotowania i zmniejszając ryzyko zanieczyszczenia.
Zwiększona stabilność: Utrzymuje stałą wydajność w standardowych warunkach kriokonserwacji, zapewniając powtarzalne wyniki.
Długi okres trwałości: CM-1 to zawierająca surowicę, gotowa do użycia pożywka do kriokonserwacji, którą można przechowywać w lodówce przez okres do jednego roku.


Używanie CM-1 do zamrażania komórek

Aby użyć CM-1 do zamrażania zarówno komórek adherentnych, jak i zawiesinowych, należy wykonać następujące kroki

W przypadku komórek przylegających należy je umyć i oddzielić od podłoża hodowlanego. W przypadku komórek w zawiesinie przejdź bezpośrednio do następnego kroku.
Policzyć komórki, aby upewnić się, że mają odpowiednie stężenie.
Odwirować komórki, aby je osuszyć, a następnie ponownie zawiesić w pożywce do zamrażania CM-1.
Przenieś ponownie zawieszone komórki do fiolek.
Użyj metody powolnego zamrażania przed przeniesieniem komórek do długoterminowego przechowywania





Metoda
Opis
Kroki





❄️
Ręczne zamrażanie

Metoda krok po kroku polegająca na stopniowym obniżaniu temperatury w celu zapewnienia żywotności komórek

1️⃣ Umieścić komórki w pożywce do zamrażania w temperaturze 4°C na 40 minut.
2️⃣ Przenieść do zamrażarki o temperaturze -80°C na 24 godziny.
3️⃣ Przechowywać komórki w ciekłym azocie w celu długotrwałego przechowywania



❄️
Korzystanie z Mr. Frosty

Wygodne urządzenie umożliwiające kontrolowane zamrażanie bez zasilania elektrycznego

1️⃣ Przygotować komórki w kriofiolach z pożywką do zamrażania.
2️⃣ Umieścić kriofiole w pojemniku Mr. Frosty.
3️⃣ Przechowywać w temperaturze -80°C przez 24 godziny przed przeniesieniem do ciekłego azotu



❄️
Zamrażarka o kontrolowanej prędkości

Precyzyjna zamrażarka firmy Thermo Fisher lub innych producentów przeznaczona do kontrolowanego obniżania temperatury

1️⃣ Zaprogramuj urządzenie tak, aby stopniowo obniżało temperaturę.
2️⃣ Umieść przygotowane komórki w zamrażarce.
3️⃣ Po cyklu zamrażania przenieś komórki do ciekłego azotu









Przechowywać kriofiole w temperaturze poniżej -130°C lub w ciekłym azocie w celu długotrwałego przechowywania.


Składniki

Zawiera FBS, DMSO, glukozę, sole
Zdolność buforowania: pH = 7,2 do 7,6


Cytion's Freeze Medium CM-1 oferuje niezawodne rozwiązanie do kriokonserwacji, zapewniając wysoką żywotność komórek i funkcjonalność po rozmrożeniu w szerokim zakresie zastosowań badawczych.

Pożywka RPMI 1640, znana również jako pożywka RPMI, to wysoce uniwersalna pożywka do hodowli komórkowych, szeroko wykorzystywana w badaniach biologicznych do hodowli różnych komórek ssaków. Pożywka ta, opracowana przez George'a E. Moore'a, Roberta E. Gernera i H. Addisona Franklina w 1966 roku w renomowanym Roswell Park Comprehensive Cancer Center, swoją nazwę zawdzięcza pochodzeniu z Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Początkowo zaprojektowana w celu wspierania wzrostu ludzkich komórek białaczkowych zarówno w hodowlach zawiesinowych, jak i jednowarstwowych, pożywka RPMI 1640 ewoluowała poprzez modyfikacje dokonywane przez badaczy i dostawców komercyjnych, aby stać się odpowiednią dla różnorodnych komórek ssaków. Jest wyjątkowo kompatybilna z liniami komórkowymi takimi jak HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyty i raki.
RPMI 1640 Medium wyróżnia się na tle innych pożywek do hodowli komórkowych ze względu na swój unikalny skład. Zawiera znaczną ilość fosforanów, aminokwasów i witamin. W szczególności zawiera biotynę, witaminę B12 i PABA, nieobecne w pożywce Eagle's Minimal Essential Medium lub Dulbecco's Modified Eagle Medium. Co więcej, RPMI 1640 Medium wykazuje znacznie podwyższone stężenie witamin inozytolu i choliny. Nie zawiera ona jednak białek, lipidów ani czynników wzrostu. W związku z tym suplementacja 10% płodową surowicą bydlęcą (FBS) jest zwykle wymagana w celu zapewnienia optymalnych warunków do wzrostu komórek.
System buforowania pożywki RPMI 1640 opiera się na wodorowęglanie sodu i wymaga środowiska 5-10% CO2 w celu utrzymania fizjologicznie odpowiedniego pH. Włączenie środka redukującego glutation dodatkowo odróżnia tę pożywkę od innych.
Kontrola jakości

Sterylnie filtrowane


Przechowywanie i okres trwałości

Przechowywać w temperaturze od +2°C do +8°C, chronić przed światłem.
Po otwarciu przechowywać w temperaturze 4°C i zużyć w ciągu 6-8 tygodni.


Warunki wysyłki

Temperatura otoczenia


Konserwacja

Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C w ciemności. Unikać zamrażania i częstego podgrzewania do temperatury +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu.
Nie podgrzewać nośnika powyżej 37°C ani nie używać niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak urządzenia mikrofalowe.
Jeśli ma być użyta tylko część pożywki, należy usunąć wymaganą ilość i ogrzać ją do temperatury pokojowej przed użyciem.



Skład




Kategoria
Składniki
Stężenie (mg/L)


Aminokwasy
Glicyna
10.00



L-alanylo-L-glutamina
434.40



L-Arginina
200.00



L-asparaginaH2O
56.82



Kwas L-asparaginowy
20.00



L-cysteina 2HCl
65.20



Kwas L-glutaminowy
20.00



L-histydyna HClH2O
20.27



L-hydroksy-L-prolina
20.00



L-Izoleucyna
50.00



L-Leucyna
50.00



L-Lizyna HCl
40.00



L-metionina
15.00



L-fenyloalanina
15.00



L-prolina
20.00



L-seryna
30.00



L-treonina
20.00



L-tryptofan
5.00



L-tyrozyna 2Na 2H2O
28.83



L-walina
20.00


Witaminy
kwas p-aminobenzoesowy
1.00



D-biotyna
0.20



Chlorek choliny
3.00



Pantotenian D-wapnia
0.25



Kwas foliowy
1.00



mio-inozytol
35.00



Nikotynamid
1.00



Chlorowodorek pirydoksyny
1.00



Ryboflawina
0.20



Tiamina HCl
1.00



Witamina B12
0.005


Sole nieorganiczne
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Inne składniki
D-glukoza
2000.00



Zredukowany L-glutation
1.00



Sól sodowa czerwieni fenolowej
5.30

Odczynnik do dysocjacji komórek Accutase
- delikatna alternatywa dla trypsyny
Accutase to roztwór do odłączania komórek, który rewolucjonizuje przemysł hodowli komórkowych. Jest to mieszanka enzymów proteolitycznych i kolagenolitycznych, która naśladuje działanie trypsyny i kolagenazy. W przeciwieństwie do trypsyny, Accutase nie zawiera żadnych składników pochodzących od ssaków lub bakterii i jest znacznie łagodniejszy dla komórek, co czyni go idealnym rozwiązaniem do rutynowego odłączania komórek od standardowych naczyń plastikowych do hodowli tkankowych i naczyń plastikowych pokrytych powłoką adhezyjną. W tym wpisie na blogu omówimy zalety i zastosowania Accutase oraz sposób, w jaki zmienia ona zasady gry w hodowli komórkowej.
Zalety Accutase
Accutase ma kilka zalet w porównaniu z tradycyjnymi roztworami trypsyny. Po pierwsze, może być stosowana wszędzie tam, gdzie potrzebne jest delikatne i skuteczne oderwanie dowolnej przylegającej linii komórkowej, co czyni ją bezpośrednim zamiennikiem trypsyny. Po drugie, Accutase działa wyjątkowo dobrze na embrionalnych i neuronalnych komórkach macierzystych i wykazano, że utrzymuje żywotność tych komórek po pasażowaniu. Po trzecie, Accutase zachowuje większość epitopów do późniejszej analizy cytometrii przepływowej, co czyni ją idealną do analizy markerów powierzchniowych komórek.
Dodatkowo, Accutase nie musi być neutralizowana podczas pasażowania przylegających komórek. Dodanie większej ilości pożywki po rozdzieleniu komórek rozcieńcza Accutase tak, że nie jest już w stanie oddzielić komórek. Eliminuje to potrzebę etapu inaktywacji i oszczędza czas techników zajmujących się hodowlą komórek. Wreszcie, Accutase nie musi być dzielona na porcje, a butelka jest stabilna w lodówce przez 2 miesiące.
Zastosowania Accutazy
Accutase jest bezpośrednim zamiennikiem roztworu trypsyny i może być stosowany do pasażowania linii komórkowych. Ponadto, Accutase dobrze sprawdza się podczas odłączania komórek w celu analizy wielu markerów powierzchniowych komórek za pomocą cytometrii przepływowej i sortowania komórek. Inne zastosowania Accutase obejmują analizę markerów powierzchniowych komórek, test wzrostu wirusa, proliferację komórek, testy migracji komórek nowotworowych, rutynowe pasażowanie komórek, zwiększanie skali produkcji (bioreaktor) i cytometrię przepływową.
Skład Accutazy
Accutase nie zawiera składników pochodzących od ssaków lub bakterii i jest naturalną mieszaniną enzymów o aktywności proteolitycznej i kolagenolitycznej. Jest formułowany w znacznie niższym stężeniu niż trypsyna i kolagenaza, dzięki czemu jest mniej toksyczny i łagodniejszy, ale równie skuteczny.
Skuteczność Accutase
Wykazano, że Accutase jest skuteczny w odłączaniu komórek pierwotnych i macierzystych oraz utrzymuje wysoką żywotność komórek w porównaniu z enzymami pochodzenia zwierzęcego, takimi jak trypsyna. 100% komórek jest odzyskiwanych po 10 minutach, a pozostawienie komórek w Accutase do 45 minut nie jest szkodliwe, dzięki automatycznemu trawieniu Accutase.
Podsumowanie
Podsumowując, Accutase to potężne rozwiązanie, które zmienia zasady gry w hodowli komórkowej. Dzięki swojej łagodności, wydajności i wszechstronności, Accutase jest idealną alternatywą dla trypsyny. Jeśli szukasz niezawodnego i wydajnego rozwiązania do odłączania komórek, Accutase jest rozwiązaniem dla Ciebie.

Przegląd produktów
Pojemność: 100 ml Przechowywanie: ≤-15°C Sterylność: Sterylnie filtrowany
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) to sterylny, gotowy do użycia koncentrat zaprojektowany w celu zmniejszenia ryzyka skażenia mikrobiologicznego w hodowli komórkowej i powiązanych zastosowaniach laboratoryjnych. Roztwór 100x zawiera dobrze znane połączenie penicyliny, streptomycyny i amfoterycyny B, zapewniając szerokie spektrum działania przeciwdrobnoustrojowego przeciwko bakteriom Gram-dodatnim i Gram-ujemnym, drożdżom i grzybom nitkowatym. Preparat nadaje się do stosowania w hodowlach komórek eukariotycznych, pożywkach bakteryjnych i innych systemach wrażliwych na zanieczyszczenia, wspierając czyste i spójne operacje laboratoryjne.
Zastosowanie i korzyści Rozwiązanie to, zoptymalizowane pod kątem rutynowych protokołów badawczych, jest szeroko stosowane do utrzymywania aseptycznych warunków w procesach hodowli komórkowych. Zapewnia niezawodne działanie w środowiskach wrażliwych na zanieczyszczenia, pomagając naukowcom zmniejszyć ryzyko przerostu drobnoustrojów bez uszczerbku dla zdrowia komórek lub powtarzalności eksperymentów. Sterylnie filtrowana formuła eliminuje potrzebę dodatkowych etapów solubilizacji, wspierając usprawnione przygotowanie mediów i zmniejszając zmienność w codziennych procedurach laboratoryjnych.
Zastosowanie i kompatybilność Aby uzyskać standardowe stężenia robocze, należy rozcieńczyć roztwór w stosunku 1:100 w pełnym podłożu hodowlanym. Produkt jest kompatybilny z szeroką gamą linii komórkowych ssaków i pożywek podstawowych. Dzięki stałej dostępności produktu, badacze mogą korzystać z niezawodnej ciągłości dostaw i uproszczonego planowania logistycznego. Roztwór należy przechowywać w temperaturze ≤ -15 °C i chronić przed powtarzającymi się cyklami zamrażania i rozmrażania w celu zachowania stabilności. Wyłącznie do użytku badawczego. Nie stosować w procedurach diagnostycznych lub terapeutycznych. Nie stosować u ludzi ani zwierząt.

Roztwór soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS)
Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS) jest szeroko stosowanym roztworem buforowym w badaniach biologicznych i chemicznych. Odgrywa kluczową rolę w utrzymywaniu równowagi pH i osmolarności podczas różnych procedur eksperymentalnych, w tym przetwarzania tkanek i hodowli komórkowej. Nasz roztwór PBS jest starannie opracowany ze składników o wysokiej czystości, aby zapewnić stabilność i niezawodność w każdym eksperymencie. Osmolarność i stężenia jonów naszego PBS ściśle naśladują te występujące w ludzkim organizmie, dzięki czemu jest on izotoniczny i nietoksyczny dla większości komórek.

Skład naszego roztworu PBS
Nasz roztwór PBS to dostosowana pod względem pH mieszanka ultraczystych buforów fosforanowych i roztworów soli fizjologicznej. W stężeniu roboczym 1X zawiera:

8000 mg/l chlorku sodu (NaCl)
200 mg/l chlorku potasu (KCl)
1150 mg/L Bezwodny dwuzasadowy fosforan sodu (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforan potasu jednozasadowy bezwodny (KH2PO4)

Taki skład zapewnia optymalne pH i równowagę jonową, odpowiednie do szerokiego zakresu zastosowań biologicznych.

Zastosowania naszego roztworu PBS
Nasz roztwór PBS jest idealny do różnych zastosowań w badaniach biologicznych. Jego izotoniczne i nietoksyczne właściwości sprawiają, że nadaje się do rozcieńczania substancji i płukania pojemników z komórkami. Roztwory PBS zawierające EDTA są skuteczne w odłączaniu przyczepionych i zbrylonych komórek. Do PBS nie należy jednak dodawać metali dwuwartościowych, takich jak cynk, ponieważ może to spowodować wytrącanie się osadów. W takich przypadkach zalecane są bufory Good's. Ponadto nasz roztwór PBS jest akceptowalną alternatywą dla wirusowego podłoża transportowego do transportu i przechowywania wirusów RNA, w tym SARS-CoV-2.

Kontrola jakości

Sterylnie filtrowany


Przechowywanie i okres trwałości

Przechowywać w temperaturze od +2°C do +25°C, chronić przed światłem.
Po otwarciu przechowywać w temperaturze od 2°C do 25°C i zużyć w ciągu 24 miesięcy.


Warunki wysyłki

Temperatura otoczenia


Konserwacja

Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C w ciemności. Unikać zamrażania i częstego podgrzewania do temperatury +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu.
Nie podgrzewać nośnika powyżej 37°C ani nie używać niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak urządzenia mikrofalowe.
Jeśli ma być użyta tylko część pożywki, należy usunąć wymaganą ilość i ogrzać ją do temperatury pokojowej przed użyciem.

Skład



Kategoria
Składniki
Stężenie (mg/L)


Sole
Chlorek potasu
200



Fosforan potasu jednozasadowy bezwodny
200



Chlorek sodu
8000



Bezwodny dwuzasadowy fosforan sodu
1150