Celule A549-RFP
800,00 EUR*
Produsele sunt expediate congelate în gheață carbonică în criotuburi. Fiecare criotub conține de obicei 3 × 10 6 celule pentru linii aderente sau 5 × 106 celule pentru linii în suspensie (consultați certificatul de analiză al lotului pentru detalii).
Informații generale
| Descriere | A549-RFP este un derivat marcat fluorescent al liniei celulare umane A549 de adenocarcinom pulmonar, proiectat pentru a exprima în mod constitutiv proteina fluorescentă roșie (RFP) pentru vizualizare și urmărire în timp real. Linia parentală A549 a fost stabilită dintr-un adenocarcinom pulmonar provenit de la un donator adult și prezintă morfologie epitelială cu caracteristici de creștere aderentă. Celulele A549 păstrează caracteristicile celulelor epiteliale alveolare de tip II, inclusiv expresia citocheratinelor și capacitatea de producere a proteinelor asociate cu surfactantul. Introducerea unei casete de expresie RFP stabile permite fluorescența continuă fără a altera în mod semnificativ proprietățile proliferative și metabolice intrinseci ale liniei parentale, făcând A549-RFP adecvat pentru studii de imagistică longitudinală. Caracterizarea funcțională a celulelor A549 în cadrul unor panouri mari de celule canceroase a demonstrat că dimensiunea celulelor, conținutul de proteine și rata de sinteză a proteinelor sunt corelate pozitiv cu volumul celulelor și că celulele mai mari tind să prolifereze mai lent. În analizele comparative, celulele A549 se situează printre liniile celulare canceroase epiteliale relativ mai mici și cu proliferare mai rapidă, în contrast cu celulele mai mari, mai asemănătoare cu cele mezenchimale, care prezintă o expresie mai mare a vimentinei și niveluri mai scăzute de E-caderină. Aceste distincții metabolice și fenotipice sunt relevante pentru interpretarea experimentală, deoarece ratele de sinteză a proteinelor și fluxurile metabolice variază în funcție de dimensiunea celulelor și influențează sensibilitatea la agenții care vizează proliferarea sau căile anabolice reglate de mTOR. Modificarea RFP păstrează adecvarea celulelor A549 pentru astfel de investigații metabolice și farmacologice, permițând în același timp vizualizarea directă. A549-RFP este utilizat pe scară largă în sisteme de co-cultură, modele ortotopice și ectopice de xenotransplant și teste de invazie sau metastază, în care marcarea fluorescentă facilitează discriminarea celulelor tumorale de componentele stromale sau gazdă. Fluorescența roșie stabilă susține aplicații precum imagistica celulelor vii, screeningul cu conținut ridicat, cuantificarea bazată pe citometrie în flux și imagistica optică in vivo. Ca variantă trasabilă a unui model bine caracterizat de adenocarcinom pulmonar, A549-RFP oferă o platformă robustă pentru studierea proliferării celulelor tumorale, tranziției epiteliale-mezenchimale, răspunsului la medicamente și interacțiunilor dintre tumoră și micromediul în ambele contexte, in vitro și in vivo. |
|---|---|
| Organism | Om |
| Țesut | Plămân |
| Boala | Adenocarcinom pulmonar |
| Sinonime | A 549, A549, NCI-A549, A549/ATCC, A549 ATCC, A549ATCC, hA549 |
Caracteristici
| Vârsta | 58 de ani |
|---|---|
| Gen | Masculin |
| Etnicitate | Caucazian |
Date de reglementare
| Mențiune | A549-RFP (număr de catalog Cytion 305659) |
|---|---|
| Nivelul de biosecuritate | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccesiune | CVCL_0023 |
| Statutul OMG | GMO-S1: Această linie de carcinom pulmonar A549 conține o construcție lentivirală RFP care permite imagistica cu fluorescență roșie. Această clasificare se aplică numai în Germania și poate diferi în alte țări. |
Date biomoleculare
| Expresia proteinelor | RFP |
|---|---|
| Starea MSI | Mutație: p.Gly12Ser, homozigotă; Mutație: p.Gln37Ter, homozigotă |
| Profil mutațional | Mutație: p.Gly12Ser, homozigotă; Mutație: p.Gln37Ter, homozigotă |
Manipulare
| Mediu de cultură | DMEM, w: 4,5 g/L glucoză, w: 4 mM L-glutamină, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM piruvat de sodiu (număr articol Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplimente | Suplimentați mediul cu 10% FBS |
| Reactiv de disociere | Accutase |
| Timp de dublare | 20-40 ore |
| Înghețați mediul | Ca mediu de crioconservare, folosim mediu de creștere complet + 10% DMSO pentru o viabilitate adecvată după dezghețare. |
| Decongelarea și cultivarea celulelor |
|
| Atmosfera de incubație | 37°C, 5%CO2, atmosferă umidificată. |
| Condiții de expediere | Liniile celulare crioconservate sunt expediate pe gheață carbonică în ambalaje izolate, validate, cu suficient agent frigorific pentru a menține aproximativ -78 °C pe toată durata transportului. La primire, se inspectează imediat recipientul și se transferă fără întârziere fiolele în depozitul corespunzător. |
| Condiții de depozitare | Pentru conservarea pe termen lung, flacoanele se plasează în azot lichid în fază de vapori la o temperatură cuprinsă între -150 și -196 °C. Păstrarea la -80 °C este acceptabilă doar ca o scurtă etapă intermediară înainte de transferul în azot lichid. |
Controlul calității / Profil genetic / HLA
Acord de transfer de materiale
Dacă intenționați să utilizați liniile celulare Cytion exclusiv pentru cercetare internă într-un singur centru de cercetare, vă rugăm să completați și să semnați Acordul nostru de transfer de materiale (MTA) și să îl trimiteți împreună cu comanda dumneavoastră.
Pentru orice aplicații comerciale - inclusiv, dar fără a se limita la, lucrări contra cost, teste de control al calității, lansarea de produse, utilizare în scopuri diagnostice sau studii de reglementare - vă rugăm să completați Formularul de utilizare prevăzută, astfel încât să putem pregăti un acord adecvat, adaptat proiectului dumneavoastră.
Vă rugăm să rețineți: MTA se aplică numai anumitor linii celulare. Dacă această notificare și documentul MTA apar pe pagina unui produs, acordul este aplicabil. Pentru liniile celulare care nu sunt acoperite de MTA, nu va fi afișată nicio referință la acord. MTA nu este valabil pentru clienții din America, China sau Taiwan. Vă rugăm să contactați entitatea noastră din S.U.A. pentru a primi acordul corespunzător.
-
Produse necesare
Produse necesare
Mediu de congelare CM-1 - 50 mlVariante de medii de crioconservare: 50 mlMediul de congelare CM-1 de la Cytion este un mediu de crioconservare de ultimă generație, conceput pentru a asigura cel mai înalt nivel de viabilitate și funcționalitate celulară după dezghețare. Acest mediu versatil este potrivit pentru un spectru larg de tipuri de celule, inclusiv celule umane și animale, ceea ce îl face un instrument esențial pentru diverse aplicații de cercetare. Formulat cu o combinație meticulos echilibrată de crioprotectanți și nutrienți esențiali, Freeze Medium CM-1 minimizează formarea cristalelor de gheață și stresul celular în timpul procesului de congelare, păstrând astfel integritatea celulară.
Caracteristicile principale ale Freeze Medium CM-1 includ:
Compatibilitate largă: Eficient pentru o gamă largă de tipuri de celule, inclusiv celule primare, celule stem și linii celulare stabilite.
Viabilitate ridicată: Optimizat pentru a maximiza recuperarea și viabilitatea celulelor după dezghețare, asigurând rezultate experimentale fiabile.
Gata de utilizare: Preparate și sterilizate convenabil pentru aplicare imediată, reducând timpul de preparare și riscul de contaminare.
Stabilitate îmbunătățită: Menține performanța constantă în condiții standard de crioconservare, asigurând rezultate reproductibile.
Durată lungă de valabilitate: CM-1 este un mediu de crioconservare care conține ser, gata de utilizare, care poate fi păstrat în frigider timp de până la un an.
Utilizarea CM-1 pentru congelarea celulelor
Pentru a utiliza CM-1 pentru congelarea celulelor aderente și în suspensie, urmați acești pași
Pentru celulele aderente, spălați-le și disociați-le de substratul de cultură. Pentru celulele în suspensie, treceți direct la pasul următor.
Numărați celulele pentru a vă asigura că sunt la concentrația corespunzătoare.
Centrifugați celulele pentru a le granula, apoi resuspendați-le în mediul de congelare CM-1.
Transferați celulele resuspendate în crioale.
Utilizați o metodă de congelare lentă înainte de a transfera celulele pentru depozitare pe termen lung
Metodă
Descriere
Etape
❄️
Înghețarea manuală
O metodă pas cu pas care implică reducerea treptată a temperaturii pentru a asigura viabilitatea celulelor
1️⃣ Puneți celulele în mediu de congelare într-un congelator la 4°C timp de 40 de minute.
2️⃣ Se transferă la un congelator la -80°C timp de 24 de ore.
3️⃣ Depozitați celulele în azot lichid pentru conservare pe termen lung
❄️
Utilizarea Mr. Frosty
Un dispozitiv convenabil care permite ratele de congelare controlate fără energie electrică
1️⃣ Pregătiți celulele în crioale cu mediu de congelare.
2️⃣ Așezați criovialele în recipientul Mr. Frosty.
3️⃣ Păstrați la -80°C timp de 24 de ore înainte de a transfera în azot lichid
❄️
Congelator cu rată controlată
Un congelator de înaltă precizie de la Thermo Fisher sau de la alți producători conceput pentru reducerea controlată a temperaturii
1️⃣ Programați dispozitivul pentru a reduce treptat temperatura.
2️⃣ Introduceți celulele pregătite în congelator.
3️⃣ După ciclul de congelare, transferați celulele în azot lichid
Depozitați criovialele la temperaturi sub -130°C sau în azot lichid pentru conservare pe termen lung.
Ingrediente
Conține FBS, DMSO, glucoză, săruri
Capacitate de tamponare: pH = 7,2 până la 7,6
Mediul de congelare CM-1 de la Cytion oferă o soluție fiabilă pentru crioconservare, asigurând o viabilitate celulară ridicată și funcționalitate post-dezgheț pentru o gamă largă de aplicații de cercetare.59,00 EUR*AccutaseVariante: 100 mlReactiv de disociere celulară Accutase
- o alternativă delicată la tripsină
Accutase este o soluție de disociere celulară care revoluționează industria culturilor celulare. Este un amestec de enzime proteolitice și colagenolitice care imită acțiunea tripsinei și a colagenazei. Spre deosebire de tripsină, Accutase nu conține componente de mamifere sau bacteriene și este mult mai blândă cu celulele, ceea ce o face o soluție ideală pentru detașarea de rutină a celulelor de pe materialele plastice standard pentru cultura țesuturilor și de pe materialele plastice acoperite cu aderență. În această postare pe blog, vom explora beneficiile și utilizările Accutase și modul în care acesta schimbă regulile jocului în cultura celulară.
Avantajele Accutase
Accutase are mai multe avantaje față de soluțiile tradiționale de tripsină. În primul rând, poate fi utilizat ori de câte ori este necesară detașarea blândă și eficientă a oricărei linii de celule aderente, ceea ce îl face un înlocuitor direct al tripsinei. În al doilea rând, Accutase funcționează extrem de bine pe celulele stem embrionare și neuronale și s-a demonstrat că menține viabilitatea acestor celule după transfer. În al treilea rând, Accutase păstrează majoritatea epitopilor pentru analiza citometrică în flux ulterioară, ceea ce o face ideală pentru analiza markerilor de suprafață celulară.
În plus, Accutase nu trebuie să fie neutralizat la trecerea celulelor aderente. Adăugarea mai multor medii după divizarea celulelor diluează Accutase astfel încât acesta nu mai este capabil să detașeze celulele. Acest lucru elimină necesitatea unei etape de inactivare și economisește timp pentru tehnicienii de culturi celulare. În cele din urmă, Accutase nu trebuie să fie alicotat, iar un flacon este stabil în frigider timp de 2 luni.
Aplicații ale Accutase
Accutase este un înlocuitor direct pentru soluția de tripsină și poate fi utilizat pentru trecerea liniilor celulare. În plus, Accutase funcționează bine la detașarea celulelor pentru analiza multor markeri de suprafață celulară prin citometrie în flux și pentru sortarea celulelor. Alte aplicații în aval ale tratamentului cu Accutase includ analiza markerilor de suprafață celulară, testul de creștere a virusurilor, proliferarea celulară, testele de migrare a celulelor tumorale, trecerea celulară de rutină, creșterea producției (bioreactor) și citometria în flux.
Compoziția Accutase
Accutase nu conține componente mamifere sau bacteriene și este un amestec enzimatic natural cu activitate enzimatică proteolitică și colagenolitică. Este formulat la o concentrație mult mai mică decât tripsina și colagenaza, ceea ce îl face mai puțin toxic și mai blând, dar la fel de eficient.
Eficiența Accutase
Accutase s-a dovedit a fi eficient în detașarea celulelor primare și stem și menținerea unei viabilități celulare ridicate în comparație cu enzimele de origine animală, cum ar fi tripsina. 100% din celule sunt recuperate după 10 minute și nu există niciun rău în lăsarea celulelor în Accutase timp de până la 45 de minute, datorită autodigestionării Accutase.
În concluzie
În concluzie, Accutase este o soluție puternică care schimbă regulile jocului în cultura celulară. Cu natura sa blândă, eficiența și versatilitatea sa, Accutase este alternativa ideală la tripsină. Dacă sunteți în căutarea unei soluții fiabile și eficiente pentru detașarea celulelor, Accutase este soluția pentru dumneavoastră.75,00 EUR*Soluție antibiotică/antimicotică (100x)Prezentare generală a produsului
Volum: 100 ml Depozitare: ≤-15°C Sterilitate: Steril-filtrat
Antibiotic/Antimicotic Solution (100x) este un concentrat steril, gata de utilizare, conceput pentru a reduce riscurile de contaminare microbiană în culturile celulare și în aplicațiile de laborator conexe. Această soluție 100x conține o combinație bine stabilită de penicilină, streptomicină și amfotericină B
- care asigură o activitate antimicrobiană cu spectru larg împotriva bacteriilor Gram-pozitive și Gram-negative, drojdiilor și ciupercilor filamentoase. Formularea este adecvată pentru utilizarea în culturi de celule eucariote, medii bacteriene și alte sisteme sensibile la contaminare, sprijinind operațiunile de laborator curate și consecvente.
Aplicație și beneficii Optimizată pentru protocoalele de cercetare de rutină, această soluție este utilizată pe scară largă pentru menținerea condițiilor aseptice în fluxurile de lucru din culturile celulare. Aceasta oferă performanțe fiabile în medii sensibile la contaminare, ajutând cercetătorii să reducă riscul de creștere microbiană excesivă fără a compromite sănătatea celulelor sau reproductibilitatea experimentelor. Formularea filtrată steril elimină necesitatea unor etape suplimentare de solubilizare, susținând pregătirea raționalizată a mediilor și reducând variabilitatea procedurilor zilnice de laborator.
Utilizare și compatibilitate Pentru a obține concentrații de lucru standard, diluați soluția 1:100 în mediul de cultură complet. Produsul este compatibil cu o gamă largă de linii celulare de mamifere și medii bazale. Datorită disponibilității constante a stocurilor, cercetătorii beneficiază de o continuitate fiabilă a aprovizionării și de o planificare logistică simplificată. Soluția trebuie depozitată la ≤ -15 °C și protejată de cicluri repetate de îngheț-dezgheț pentru a menține stabilitatea. Numai pentru utilizare în cercetare. A nu se utiliza în proceduri diagnostice sau terapeutice. Nu se utilizează la om sau la animale.45,00 EUR*PBSSoluție salină tamponată cu fosfat (PBS)
Soluția salină tamponată cu fosfat (PBS) este o soluție tampon utilizată pe scară largă în cercetarea biologică și chimică. Aceasta joacă un rol crucial în menținerea echilibrului pH-ului și a osmolarității în timpul diferitelor proceduri experimentale, inclusiv prelucrarea țesuturilor și cultura celulară. Soluția noastră PBS este formulată meticulos cu ingrediente de înaltă puritate pentru a asigura stabilitatea și fiabilitatea în fiecare experiment. Osmolaritatea și concentrațiile de ioni ale soluției noastre PBS le imită îndeaproape pe cele ale corpului uman, făcând-o izotonică și netoxică pentru majoritatea celulelor.
Compoziția soluției noastre PBS
Soluția noastră PBS este un amestec cu pH ajustat de soluții tampon fosfat de calitate ultrapură și soluții saline. La o concentrație de lucru 1X, aceasta conține:
8000 mg/L clorură de sodiu (NaCl)
200 mg/L Clorură de potasiu (KCl)
1150 mg/L Fosfat de sodiu dibazic anhidru (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfat de potasiu monobazic anhidru (KH2PO4)
Această compoziție asigură un pH optim și un echilibru ionic, adecvat pentru o gamă largă de aplicații biologice.
Aplicații ale soluției noastre PBS
Soluția noastră PBS este ideală pentru diverse aplicații în cercetarea biologică. Proprietățile sale izotonice și non-toxice o fac potrivită pentru diluarea substanțelor și clătirea recipientelor pentru celule. Soluțiile PBS care conțin EDTA sunt eficiente pentru desprinderea celulelor atașate și grupate. Cu toate acestea, metalele divalente, cum ar fi zincul, nu trebuie adăugate în PBS, deoarece pot provoca precipitații. În astfel de cazuri, sunt recomandate tampoanele Good. În plus, soluția noastră PBS este o alternativă acceptabilă la mediul de transport viral pentru transportul și depozitarea virușilor ARN, inclusiv SARS-CoV-2.
Controlul calității
Steril-filtrat
Depozitare și termen de valabilitate
A se păstra la +2°C până la +25°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la o temperatură cuprinsă între 2°C și 25°C și utilizați în termen de 24 de luni.
Condiții de transport
Temperatură ambiantă
Întreținere
Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.
Compoziție
Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)
Săruri
Clorură de potasiu
200
Fosfat de potasiu monobazic anhidru
200
Clorură de sodiu
8000
Fosfat de sodiu dibazic anhidru
115020,00 EUR* -
Produse conexe
Produse conexe