Celule HEK293 EBNA
650,00 EUR*
Produsele sunt expediate congelate în gheață carbonică în criotuburi. Fiecare criotub conține de obicei 3 × 10 6 celule pentru linii aderente sau 5 × 106 celule pentru linii în suspensie (consultați certificatul de analiză al lotului pentru detalii).
Informații generale
| Descriere | Linia celulară HEK293 EBNA este un derivat al liniei HEK293 originale, care la rândul ei a fost derivată din celule embrionare de rinichi uman cultivate în culturi de țesuturi. Această sublinie specială a fost modificată pentru a exprima stabil antigenul nuclear 1 al virusului Epstein-Barr (EBNA-1). Exprimarea EBNA-1 permite replicarea episomală a plasmidelor care poartă originea de replicare a EBV, ceea ce face ca celulele HEK293 EBNA să fie deosebit de valoroase pentru producerea de proteine recombinante și pentru studiile de expresie genică care implică vectori episomali. Celulele HEK293 EBNA păstrează multe dintre caracteristicile celulelor parentale HEK293, inclusiv aderența lor la plasticul de cultură celulară și creșterea lor robustă în medii standard de cultură celulară de mamifere. Adăugarea EBNA-1 le extinde utilitatea în cercetare și aplicații biotehnologice, deoarece sporește capacitatea celulelor de a propaga plasmide cu originea EBV de replicare a plasmidelor. Această caracteristică este esențială pentru producerea de proteine recombinante stabile, cu randament ridicat, ceea ce este esențial atât pentru scopuri de cercetare, cât și pentru producția la scară industrială. |
|---|---|
| Organism | Om |
| Țesut | Rinichi embrionar |
| Sinonime | HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA, HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA, 293/EBNA-1 |
Caracteristici
| Vârsta | Fetusul |
|---|---|
| Gen | Femei |
| Morfologie | Epitelial |
| Proprietăți de creștere | Aderent |
Date de reglementare
| Mențiune | HEK293 EBNA (număr de catalog Cytion 300264) |
|---|---|
| Nivelul de biosecuritate | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccesiune | CVCL_6974 |
| Statutul OMG | GMO-S1: Această linie celulară HEK293 EBNA conține secvențe de antigen nuclear EBV (EBNA) care permit replicarea episomală a plasmidelor derivate din EBV, fără a elibera particule virale infecțioase. Modificarea este prezentă în mod stabil în celulele derivate din rinichi embrionari. Această clasificare se aplică numai în Germania și poate diferi în alte țări. |
Date biomoleculare
| Expresia antigenului | EBNA1 |
|---|---|
| Viruși | Adenovirus 5 (transformant), EBV (exprimă EBNA1) |
Manipulare
| Mediu de cultură | DMEM, w: 4,5 g/L glucoză, w: 4 mM L-glutamină, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM piruvat de sodiu (număr articol Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplimente | Suplimentați mediul cu 10% FBS |
| Reactiv de disociere | Accutase |
| Subcultură | Îndepărtați mediul vechi de pe celulele aderente și spălați-le cu PBS care nu conține calciu și magneziu. Pentru flacoanele T25, se utilizează 3-5 ml de PBS, iar pentru flacoanele T75, 5-10 ml. Apoi, se acoperă celulele complet cu Accutase, folosind 1-2 ml pentru flacoanele T25 și 2,5 ml pentru flacoanele T75. Lăsați celulele la incubare la temperatura camerei timp de 8-10 minute pentru a le detașa. După incubare, amestecați ușor celulele cu 10 ml de mediu pentru a le resuspenda, apoi centrifugați la 300xg timp de 3 minute. Aruncați supernatantul, resuspendați celulele în mediu proaspăt și transferați-le în flacoane noi care conțin deja mediu proaspăt. |
| Înghețați mediul | Ca mediu de crioconservare, folosim mediu de creștere complet (inclusiv FBS) + 10% DMSO pentru o viabilitate adecvată după dezghețare sau CM-1 (număr de catalog Cytion 800100), care include osmoprotectanți optimizați și stabilizatori metabolici pentru a spori recuperarea și a reduce stresul indus de criogenie. |
| Decongelarea și cultivarea celulelor |
|
| Atmosfera de incubație | 37°C, 5%CO2, atmosferă umidificată. |
| Acoperirea flaconului | Pentru atașare optimă și viabilitate după decongelare, vă recomandăm să utilizați flacoane sau plăci acoperite cu colagen. |
| Procedura de congelare | Liniile celulare crioconservate sunt expediate pe gheață carbonică în ambalaje izolate, validate, cu suficient agent frigorific pentru a menține aproximativ -78 °C pe toată durata transportului. La primire, se inspectează imediat recipientul și se transferă fără întârziere fiolele în depozitul corespunzător. |
| Condiții de expediere | Liniile celulare crioconservate sunt expediate pe gheață carbonică în ambalaje izolate, validate, cu suficient agent frigorific pentru a menține aproximativ -78 °C pe toată durata transportului. La primire, se inspectează imediat recipientul și se transferă fără întârziere fiolele în depozitul corespunzător. |
| Condiții de depozitare | Pentru conservarea pe termen lung, flacoanele se plasează în azot lichid în fază de vapori la o temperatură cuprinsă între -150 și -196 °C. Păstrarea la -80 °C este acceptabilă doar ca o scurtă etapă intermediară înainte de transferul în azot lichid. |
Controlul calității / Profil genetic / HLA
| Sterilitate | Contaminarea cu micoplasmă este exclusă utilizând atât teste bazate pe PCR, cât și metode de detectare a micoplasmei bazate pe luminescență. Pentru a se asigura că nu există contaminare bacteriană, fungică sau de drojdie, culturile celulare sunt supuse unor inspecții vizuale zilnice. |
|---|
Certificat de analiză (CoA)
| Numărul lotului | Tip certificat | Data | Număr de catalog |
|---|---|---|---|
| 300264-280325 | Certificat de analiză | 23. May. 2025 | 300264 |
Acord de transfer de materiale
Dacă intenționați să utilizați liniile celulare Cytion exclusiv pentru cercetare internă într-un singur centru de cercetare, vă rugăm să completați și să semnați Acordul nostru de transfer de materiale (MTA) și să îl trimiteți împreună cu comanda dumneavoastră.
Pentru orice aplicații comerciale - inclusiv, dar fără a se limita la, lucrări contra cost, teste de control al calității, lansarea de produse, utilizare în scopuri diagnostice sau studii de reglementare - vă rugăm să completați Formularul de utilizare prevăzută, astfel încât să putem pregăti un acord adecvat, adaptat proiectului dumneavoastră.
Vă rugăm să rețineți: MTA se aplică numai anumitor linii celulare. Dacă această notificare și documentul MTA apar pe pagina unui produs, acordul este aplicabil. Pentru liniile celulare care nu sunt acoperite de MTA, nu va fi afișată nicio referință la acord. MTA nu este valabil pentru clienții din America, China sau Taiwan. Vă rugăm să contactați entitatea noastră din S.U.A. pentru a primi acordul corespunzător.
-
Produse necesare
Produse necesare
Mediu de congelare CM-1 - 50 mlVariante de medii de crioconservare: 50 mlMediul de congelare CM-1 de la Cytion este un mediu de crioconservare de ultimă generație, conceput pentru a asigura cel mai înalt nivel de viabilitate și funcționalitate celulară după dezghețare. Acest mediu versatil este potrivit pentru un spectru larg de tipuri de celule, inclusiv celule umane și animale, ceea ce îl face un instrument esențial pentru diverse aplicații de cercetare. Formulat cu o combinație meticulos echilibrată de crioprotectanți și nutrienți esențiali, Freeze Medium CM-1 minimizează formarea cristalelor de gheață și stresul celular în timpul procesului de congelare, păstrând astfel integritatea celulară.
Caracteristicile principale ale Freeze Medium CM-1 includ:
Compatibilitate largă: Eficient pentru o gamă largă de tipuri de celule, inclusiv celule primare, celule stem și linii celulare stabilite.
Viabilitate ridicată: Optimizat pentru a maximiza recuperarea și viabilitatea celulelor după dezghețare, asigurând rezultate experimentale fiabile.
Gata de utilizare: Preparate și sterilizate convenabil pentru aplicare imediată, reducând timpul de preparare și riscul de contaminare.
Stabilitate îmbunătățită: Menține performanța constantă în condiții standard de crioconservare, asigurând rezultate reproductibile.
Durată lungă de valabilitate: CM-1 este un mediu de crioconservare care conține ser, gata de utilizare, care poate fi păstrat în frigider timp de până la un an.
Utilizarea CM-1 pentru congelarea celulelor
Pentru a utiliza CM-1 pentru congelarea celulelor aderente și în suspensie, urmați acești pași
Pentru celulele aderente, spălați-le și disociați-le de substratul de cultură. Pentru celulele în suspensie, treceți direct la pasul următor.
Numărați celulele pentru a vă asigura că sunt la concentrația corespunzătoare.
Centrifugați celulele pentru a le granula, apoi resuspendați-le în mediul de congelare CM-1.
Transferați celulele resuspendate în crioale.
Utilizați o metodă de congelare lentă înainte de a transfera celulele pentru depozitare pe termen lung
Metodă
Descriere
Etape
❄️
Înghețarea manuală
O metodă pas cu pas care implică reducerea treptată a temperaturii pentru a asigura viabilitatea celulelor
1️⃣ Puneți celulele în mediu de congelare într-un congelator la 4°C timp de 40 de minute.
2️⃣ Se transferă la un congelator la -80°C timp de 24 de ore.
3️⃣ Depozitați celulele în azot lichid pentru conservare pe termen lung
❄️
Utilizarea Mr. Frosty
Un dispozitiv convenabil care permite ratele de congelare controlate fără energie electrică
1️⃣ Pregătiți celulele în crioale cu mediu de congelare.
2️⃣ Așezați criovialele în recipientul Mr. Frosty.
3️⃣ Păstrați la -80°C timp de 24 de ore înainte de a transfera în azot lichid
❄️
Congelator cu rată controlată
Un congelator de înaltă precizie de la Thermo Fisher sau de la alți producători conceput pentru reducerea controlată a temperaturii
1️⃣ Programați dispozitivul pentru a reduce treptat temperatura.
2️⃣ Introduceți celulele pregătite în congelator.
3️⃣ După ciclul de congelare, transferați celulele în azot lichid
Depozitați criovialele la temperaturi sub -130°C sau în azot lichid pentru conservare pe termen lung.
Ingrediente
Conține FBS, DMSO, glucoză, săruri
Capacitate de tamponare: pH = 7,2 până la 7,6
Mediul de congelare CM-1 de la Cytion oferă o soluție fiabilă pentru crioconservare, asigurând o viabilitate celulară ridicată și funcționalitate post-dezgheț pentru o gamă largă de aplicații de cercetare.59,00 EUR*DMEM, w: 4,5 g/L Glucoză, w: 4 mM L-Glutamină, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Piruvat de sodiuDMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) este un mediu bazal foarte versatil și utilizat pe scară largă, conceput pentru a susține creșterea unei game variate de celule de mamifere în cercetarea biologică. Este un mediu ideal pentru cultivarea fibroblastelor primare, a neuronilor, a celulelor gliale, a HUVEC-urilor, a celulelor musculare netede, precum și a liniilor celulare populare precum HeLa, 293, Cos-7 și PC-12.
Ceea ce diferențiază DMEM de alte medii este compoziția sa unică. Acesta conține o creștere impresionantă de patru ori a concentrației de aminoacizi și vitamine în comparație cu Eagle's Minimal Essential Medium original. Dezvoltat inițial cu un nivel scăzut de glucoză (1 g/L) și piruvat de sodiu, DMEM este frecvent utilizat cu niveluri mai ridicate de glucoză, fie cu piruvat de sodiu, fie fără acesta. În special, DMEM nu conține proteine, lipide sau factori de creștere, fiind necesară suplimentarea. Pentru a obține o creștere optimă, o abordare comună este suplimentarea DMEM cu 10% ser fetal bovin (FBS). În plus, DMEM utilizează un sistem tampon de bicarbonat de sodiu, care necesită un mediu cu 5-10% CO2 pentru a menține un pH fiziologic.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) este foarte apreciat printre mediile definite pentru cultura de celule și țesuturi, răspunzând nevoilor de creștere ale diferitelor fenotipuri de celule aderente. Acesta depășește mediul Eagle original, dezvoltat în anii 1950 pentru cultivarea celulelor de pui, prin formularea suplimentară îmbunătățită cunoscută sub numele de modificarea Dulbecco. Această modificare mărește semnificativ conținutul de aminoacizi și vitamine selecționate, de până la patru ori față de mediul original.
În domeniul culturii de celule, DMEM joacă un rol vital ca mediu de creștere pentru diferite tipuri de celule, inclusiv celule primare, celule stem și celule transformate. De asemenea, cercetătorii utilizează versiunea modificată a DMEM pentru o gamă largă de aplicații de cercetare, cum ar fi descoperirea de medicamente, ingineria țesuturilor și studiul căilor de semnalizare celulară.
Controlul calității
Steril-filtrat
Depozitare și termen de valabilitate
A se păstra la +2°C până la +8°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la 4°C și utilizați în termen de 6-8 săptămâni.
Condiții de transport
Temperatură ambiantă
Întreținere
Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.
Compoziție
Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)
Aminoacizi
Glicină
30.00
L-arginină HCl
84.00
L-cistină 2 HCl
62.57
L-Glutamină
584.00
L-histidină HClH2O
42.00
L-Isoleucină
105.00
L-Leucină
105.00
L-lizină HCl
146.00
L-Metionină
30.00
L-fenilalanină
66.00
L-serină
42.00
L-Treonină
95.00
L-triptofan
16.00
L-tirozină 2 Na 2H2O
103.79
L-Valină
94.00
Vitamine
Clorură de colină
4.00
Pantotenat D-calcic
4.00
Acid folic
4.00
mio-Inositol
7.20
Nicotinamidă
4.00
Piridoxal HCl
4.00
Riboflavină
0.40
Tiamină HCl
4.00
Săruri anorganice
CaCl2 2H2O
265.00
Fe(NO3)3 9H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Alte componente
D-glucoză
4500.00
Fenol roșu sare de sodiu
15.90
Piruvat de sodiu
110.0025,00 EUR*AccutaseVariante: 100 mlReactiv de disociere celulară Accutase
- o alternativă delicată la tripsină
Accutase este o soluție de disociere celulară care revoluționează industria culturilor celulare. Este un amestec de enzime proteolitice și colagenolitice care imită acțiunea tripsinei și a colagenazei. Spre deosebire de tripsină, Accutase nu conține componente de mamifere sau bacteriene și este mult mai blândă cu celulele, ceea ce o face o soluție ideală pentru detașarea de rutină a celulelor de pe materialele plastice standard pentru cultura țesuturilor și de pe materialele plastice acoperite cu aderență. În această postare pe blog, vom explora beneficiile și utilizările Accutase și modul în care acesta schimbă regulile jocului în cultura celulară.
Avantajele Accutase
Accutase are mai multe avantaje față de soluțiile tradiționale de tripsină. În primul rând, poate fi utilizat ori de câte ori este necesară detașarea blândă și eficientă a oricărei linii de celule aderente, ceea ce îl face un înlocuitor direct al tripsinei. În al doilea rând, Accutase funcționează extrem de bine pe celulele stem embrionare și neuronale și s-a demonstrat că menține viabilitatea acestor celule după transfer. În al treilea rând, Accutase păstrează majoritatea epitopilor pentru analiza citometrică în flux ulterioară, ceea ce o face ideală pentru analiza markerilor de suprafață celulară.
În plus, Accutase nu trebuie să fie neutralizat la trecerea celulelor aderente. Adăugarea mai multor medii după divizarea celulelor diluează Accutase astfel încât acesta nu mai este capabil să detașeze celulele. Acest lucru elimină necesitatea unei etape de inactivare și economisește timp pentru tehnicienii de culturi celulare. În cele din urmă, Accutase nu trebuie să fie alicotat, iar un flacon este stabil în frigider timp de 2 luni.
Aplicații ale Accutase
Accutase este un înlocuitor direct pentru soluția de tripsină și poate fi utilizat pentru trecerea liniilor celulare. În plus, Accutase funcționează bine la detașarea celulelor pentru analiza multor markeri de suprafață celulară prin citometrie în flux și pentru sortarea celulelor. Alte aplicații în aval ale tratamentului cu Accutase includ analiza markerilor de suprafață celulară, testul de creștere a virusurilor, proliferarea celulară, testele de migrare a celulelor tumorale, trecerea celulară de rutină, creșterea producției (bioreactor) și citometria în flux.
Compoziția Accutase
Accutase nu conține componente mamifere sau bacteriene și este un amestec enzimatic natural cu activitate enzimatică proteolitică și colagenolitică. Este formulat la o concentrație mult mai mică decât tripsina și colagenaza, ceea ce îl face mai puțin toxic și mai blând, dar la fel de eficient.
Eficiența Accutase
Accutase s-a dovedit a fi eficient în detașarea celulelor primare și stem și menținerea unei viabilități celulare ridicate în comparație cu enzimele de origine animală, cum ar fi tripsina. 100% din celule sunt recuperate după 10 minute și nu există niciun rău în lăsarea celulelor în Accutase timp de până la 45 de minute, datorită autodigestionării Accutase.
În concluzie
În concluzie, Accutase este o soluție puternică care schimbă regulile jocului în cultura celulară. Cu natura sa blândă, eficiența și versatilitatea sa, Accutase este alternativa ideală la tripsină. Dacă sunteți în căutarea unei soluții fiabile și eficiente pentru detașarea celulelor, Accutase este soluția pentru dumneavoastră.75,00 EUR*Soluție antibiotică/antimicotică (100x)Prezentare generală a produsului
Volum: 100 ml Depozitare: ≤-15°C Sterilitate: Steril-filtrat
Antibiotic/Antimicotic Solution (100x) este un concentrat steril, gata de utilizare, conceput pentru a reduce riscurile de contaminare microbiană în culturile celulare și în aplicațiile de laborator conexe. Această soluție 100x conține o combinație bine stabilită de penicilină, streptomicină și amfotericină B
- care asigură o activitate antimicrobiană cu spectru larg împotriva bacteriilor Gram-pozitive și Gram-negative, drojdiilor și ciupercilor filamentoase. Formularea este adecvată pentru utilizarea în culturi de celule eucariote, medii bacteriene și alte sisteme sensibile la contaminare, sprijinind operațiunile de laborator curate și consecvente.
Aplicație și beneficii Optimizată pentru protocoalele de cercetare de rutină, această soluție este utilizată pe scară largă pentru menținerea condițiilor aseptice în fluxurile de lucru din culturile celulare. Aceasta oferă performanțe fiabile în medii sensibile la contaminare, ajutând cercetătorii să reducă riscul de creștere microbiană excesivă fără a compromite sănătatea celulelor sau reproductibilitatea experimentelor. Formularea filtrată steril elimină necesitatea unor etape suplimentare de solubilizare, susținând pregătirea raționalizată a mediilor și reducând variabilitatea procedurilor zilnice de laborator.
Utilizare și compatibilitate Pentru a obține concentrații de lucru standard, diluați soluția 1:100 în mediul de cultură complet. Produsul este compatibil cu o gamă largă de linii celulare de mamifere și medii bazale. Datorită disponibilității constante a stocurilor, cercetătorii beneficiază de o continuitate fiabilă a aprovizionării și de o planificare logistică simplificată. Soluția trebuie depozitată la ≤ -15 °C și protejată de cicluri repetate de îngheț-dezgheț pentru a menține stabilitatea. Numai pentru utilizare în cercetare. A nu se utiliza în proceduri diagnostice sau terapeutice. Nu se utilizează la om sau la animale.45,00 EUR*PBSSoluție salină tamponată cu fosfat (PBS)
Soluția salină tamponată cu fosfat (PBS) este o soluție tampon utilizată pe scară largă în cercetarea biologică și chimică. Aceasta joacă un rol crucial în menținerea echilibrului pH-ului și a osmolarității în timpul diferitelor proceduri experimentale, inclusiv prelucrarea țesuturilor și cultura celulară. Soluția noastră PBS este formulată meticulos cu ingrediente de înaltă puritate pentru a asigura stabilitatea și fiabilitatea în fiecare experiment. Osmolaritatea și concentrațiile de ioni ale soluției noastre PBS le imită îndeaproape pe cele ale corpului uman, făcând-o izotonică și netoxică pentru majoritatea celulelor.
Compoziția soluției noastre PBS
Soluția noastră PBS este un amestec cu pH ajustat de soluții tampon fosfat de calitate ultrapură și soluții saline. La o concentrație de lucru 1X, aceasta conține:
8000 mg/L clorură de sodiu (NaCl)
200 mg/L Clorură de potasiu (KCl)
1150 mg/L Fosfat de sodiu dibazic anhidru (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfat de potasiu monobazic anhidru (KH2PO4)
Această compoziție asigură un pH optim și un echilibru ionic, adecvat pentru o gamă largă de aplicații biologice.
Aplicații ale soluției noastre PBS
Soluția noastră PBS este ideală pentru diverse aplicații în cercetarea biologică. Proprietățile sale izotonice și non-toxice o fac potrivită pentru diluarea substanțelor și clătirea recipientelor pentru celule. Soluțiile PBS care conțin EDTA sunt eficiente pentru desprinderea celulelor atașate și grupate. Cu toate acestea, metalele divalente, cum ar fi zincul, nu trebuie adăugate în PBS, deoarece pot provoca precipitații. În astfel de cazuri, sunt recomandate tampoanele Good. În plus, soluția noastră PBS este o alternativă acceptabilă la mediul de transport viral pentru transportul și depozitarea virușilor ARN, inclusiv SARS-CoV-2.
Controlul calității
Steril-filtrat
Depozitare și termen de valabilitate
A se păstra la +2°C până la +25°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la o temperatură cuprinsă între 2°C și 25°C și utilizați în termen de 24 de luni.
Condiții de transport
Temperatură ambiantă
Întreținere
Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.
Compoziție
Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)
Săruri
Clorură de potasiu
200
Fosfat de potasiu monobazic anhidru
200
Clorură de sodiu
8000
Fosfat de sodiu dibazic anhidru
115020,00 EUR* -
Produse conexe
Produse conexe