DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucoză, w: 2,5 mM L-Glutamină, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Piruvat de sodiu, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 este un mediu bazal recunoscut pe scară largă și utilizat pe scară largă în cultura celulară pentru cercetarea biologică. Acesta servește ca sursă fundamentală de nutrienți pentru creșterea diferitelor linii de celule de mamifere, în special atunci când este suplimentat cu ser fetal bovin (FBS).
Această formulă unică combină Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) și Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) într-un raport precis 1:1. Adaosul de L-glutamină îmbunătățește și mai mult compoziția sa.
DMEM, derivat din Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), oferă o concentrație crescută de aminoacizi și vitamine comparativ cu predecesorul său. În schimb, Ham's F-12 se bazează pe mediul Ham's F-10, oferind un set complementar de componente esențiale.
Pentru a susține creșterea celulară optimă, este o practică obișnuită să se suplimenteze DMEM:Ham's F12 cu FBS la o concentrație tipică de 5-10%. Acest adaos este necesar deoarece mediul este lipsit de hormoni de creștere, lipide și proteine esențiale pentru dezvoltarea celulară.
DMEM:Ham's F12 încorporează un sistem tampon de pH și este adesea suplimentat cu roșu de fenol, un indicator de pH. Celulele cultivate în DMEM:Ham's F12 sau în orice mediu care utilizează sistemul tampon de bicarbonat necesită un mediu controlat de CO2 de 5-10% pentru a menține niveluri adecvate de pH.
Controlul calității
- Steril-filtrat
Depozitare și termen de valabilitate
- A se păstra la +2°C până la +8°C, ferit de lumină.
- Odată deschis, depozitați la 4°C și utilizați în termen de 6-8 săptămâni.
Condiții de transport
- Temperatură ambiantă
Întreținere
- Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
- Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
- În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.
Compoziție
| Categoria | Componente | Concentrație (mg/L) |
| Aminoacizi | Glicină | 18.75 |
| L-Alanină | 4.45 | |
| L-arginină HCl | 147.50 | |
| L-Asparagină H₂O | 7.50 | |
| Acid L-Aspartic | 6.65 | |
| L-cisteină HCl H₂O | 17.56 | |
| L-cistină 2 HCl | 31.29 | |
| Acid L-glutamic | 7.35 | |
| L-Glutamină | 365.00 | |
| L-histidină HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucină | 54.47 | |
| L-Leucină | 59.05 | |
| L-lizină HCl | 91.25 | |
| L-Metionină | 17.24 | |
| L-fenilalanină | 35.48 | |
| L-Prolină | 17.25 | |
| L-serină | 26.25 | |
| L-Treonină | 53.45 | |
| L-triptofan | 9.02 | |
| L-tirozină sare disodică | 48.10 | |
| L-Valină | 52.85 | |
| Vitamine | D-Biotină | 0.0035 |
| Clorură de colină | 8.98 | |
| Pantotenat D-calcic | 2.24 | |
| Acid folic | 2.66 | |
| mio-Inositol | 12.60 | |
| Nicotinamidă | 2.02 | |
| Piridoxină HCl | 0.031 | |
| Piridoxal HCl | 2.00 | |
| Riboflavină | 0.219 | |
| Tiamină HCl | 2.17 | |
| Vitamina B12 | 0.68 | |
| Săruri anorganice | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Alte componente | D-glucoză | 3151.00 |
| Hipoxantină | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Acid linoleic | 0.042 | |
| Acid lipoic | 0.105 | |
| Fenol roșu sare de sodiu | 8.63 | |
| Putrescină 2 HCl | 0.081 | |
| Piruvat de sodiu | 55.00 | |
| Timidină | 0.365 |