DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 je všeobecne uznávané a široko používané základné médium v bunkových kultúrach na biologický výskum. Slúži ako základný zdroj živín pre rast rôznych bunkových línií cicavcov, najmä ak je doplnené o fetálne hovädzie sérum (FBS).
Toto jedinečné zloženie kombinuje Dulbeccovo modifikované orlie médium (DMEM) a Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) v presnom pomere 1:1. Prídavok L-glutamínu ďalej zlepšuje jeho zloženie.
DMEM, odvodený od Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), ponúka zvýšenú koncentráciu aminokyselín a vitamínov v porovnaní so svojím predchodcom. Naproti tomu Ham's F-12 je založené na médiu Ham's F-10 a poskytuje doplnkový súbor základných zložiek.
Na podporu optimálneho rastu buniek sa DMEM:Ham's F12 bežne dopĺňa FBS v typickej koncentrácii 5 - 10 %. Toto pridanie je potrebné, pretože v médiu chýbajú rastové hormóny, lipidy a proteíny, ktoré sú kľúčové pre vývoj buniek.
DMEM:Ham's F12 obsahuje systém pH pufra a často sa dopĺňa fenolovou červenou, indikátorom pH. Kultivácia buniek v DMEM:Ham's F12 alebo v akomkoľvek médiu využívajúcom hydrogénuhličitanový tlmivý systém si vyžaduje kontrolované prostredie s 5 - 10 % CO2, aby sa udržala vhodná úroveň pH.
Kontrola kvality
- Sterilne filtrované
Skladovanie a trvanlivosť
- Skladujte pri teplote +2 °C až +8 °C, chránené pred svetlom.
- Po otvorení skladujte pri teplote 4 °C a použite do 6 až 8 týždňov.
Podmienky prepravy
- Okolitá teplota
Údržba
- Uchovávajte v chlade pri teplote +2°C až +8°C v tme. Vyhnite sa zmrazovaniu a častému zohrievaniu na +37 °C, pretože sa tým znižuje kvalita výrobku.
- Neohrievajte médium na teplotu vyššiu ako 37 °C ani nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, napríklad mikrovlnné zariadenia.
- Ak sa má použiť len časť média, odoberte požadované množstvo a pred použitím ho zohrejte na izbovú teplotu.
Zloženie
| Kategória | Zložky | Koncentrácia (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycín | 18.75 |
| L-alanín | 4.45 | |
| L-arginín HCl | 147.50 | |
| L-Asparagín H₂O | 7.50 | |
| Kyselina L-aspartová | 6.65 | |
| L-cysteín HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystín 2 HCl | 31.29 | |
| Kyselina L-glutámová | 7.35 | |
| L-glutamín | 365.00 | |
| L-histidín HCl H₂O | 31.48 | |
| L-izoleucín | 54.47 | |
| L-leucín | 59.05 | |
| L-Lyzín HCl | 91.25 | |
| L-metionín | 17.24 | |
| L-fenylalanín | 35.48 | |
| L-Prolín | 17.25 | |
| L-serín | 26.25 | |
| L-Treonín | 53.45 | |
| L-tryptofán | 9.02 | |
| L-tyrozín disodná soľ | 48.10 | |
| L-Valín | 52.85 | |
| Vitamíny | D-biotín | 0.0035 |
| Cholín chlorid | 8.98 | |
| D-pantotenát vápenatý | 2.24 | |
| Kyselina listová | 2.66 | |
| myo-izozitol | 12.60 | |
| Nikotínamid | 2.02 | |
| Pyridoxín HCl | 0.031 | |
| Pyridoxal HCl | 2.00 | |
| Riboflavín | 0.219 | |
| Tiamín HCl | 2.17 | |
| Vitamín B12 | 0.68 | |
| Anorganické soli | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Ostatné zložky | D-glukóza | 3151.00 |
| Hypoxantín | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Kyselina linolová | 0.042 | |
| Kyselina lipoová | 0.105 | |
| Fenolová červená sodná soľ | 8.63 | |
| Putrescín 2 HCl | 0.081 | |
| Pyruvát sodný | 55.00 | |
| Tymidín | 0.365 |