RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/l NaHCO3
Médium RPMI 1640, známe aj ako médium RPMI, je veľmi univerzálne médium na kultiváciu buniek, ktoré sa široko využíva v biologickom výskume na kultiváciu rôznych buniek cicavcov. Toto médium, ktoré vyvinuli George E. Moore, Robert E. Gerner a H. Addison Franklin v roku 1966 v známom Roswell Park Comprehensive Cancer Center, získalo svoj názov podľa svojho pôvodu v Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Médium RPMI 1640, ktoré bolo pôvodne navrhnuté na podporu rastu ľudských leukemických buniek v suspenzných aj monovrstvových kultúrach, sa modifikáciami výskumníkov a komerčných dodávateľov vyvinulo tak, aby bolo vhodné pre rôzne druhy buniek cicavcov. Je výnimočne kompatibilné s bunkovými líniami, ako sú HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyty a karcinómy.
Médium RPMI 1640 sa odlišuje od ostatných médií na kultiváciu buniek vďaka svojmu jedinečnému zloženiu. Obsahuje značné množstvo fosfátov, aminokyselín a vitamínov. Najmä obsahuje biotín, vitamín B12 a PABA, ktoré sa v Eagle's Minimal Essential Medium alebo Dulbecco's Modified Eagle Medium nenachádzajú. Okrem toho RPMI 1640 Medium vykazuje výrazne zvýšené koncentrácie vitamínov inozitolu a cholínu. Neobsahuje však proteíny, lipidy ani rastové faktory. V dôsledku toho sa na zabezpečenie optimálnych podmienok pre rast buniek bežne vyžaduje doplnenie 10 % fetálneho hovädzieho séra (FBS).
Pufrovací systém média RPMI 1640 sa spolieha na hydrogenuhličitan sodný a na udržanie fyziologicky vhodného pH si vyžaduje 5 - 10 % CO2. Zahrnutie redukčného činidla glutatiónu ďalej odlišuje toto médium od ostatných.
Kontrola kvality
- Sterilne filtrované
Skladovanie a trvanlivosť
- Skladujte pri teplote +2 °C až +8 °C, chránené pred svetlom.
- Po otvorení skladujte pri teplote 4 °C a spotrebujte do 6 až 8 týždňov.
Podmienky prepravy
- Okolitá teplota
Údržba
- Uchovávajte v chlade pri teplote +2°C až +8°C v tme. Vyhnite sa zmrazovaniu a častému zahrievaniu na +37 °C, pretože sa tým znižuje kvalita výrobku.
- Neohrievajte médium na teplotu vyššiu ako 37 °C a nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, ako sú mikrovlnné zariadenia.
- Ak sa má použiť len časť média, odoberte požadované množstvo a pred použitím ho zohrejte na izbovú teplotu.
Zloženie
| Kategória | Zložky | Koncentrácia (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycín | 10.00 |
| L-alanyl-L-glutamín | 434.40 | |
| L-arginín | 200.00 | |
| L-asparagínH2O | 56.82 | |
| Kyselina L-aspartová | 20.00 | |
| L-cystín 2HCl | 65.20 | |
| Kyselina L-glutámová | 20.00 | |
| L-histidín HClH2O | 20.27 | |
| L-Hydroxy-L-Prolín | 20.00 | |
| L-izoleucín | 50.00 | |
| L-leucín | 50.00 | |
| L-Lyzín HCl | 40.00 | |
| L-metionín | 15.00 | |
| L-fenylalanín | 15.00 | |
| L-Prolín | 20.00 | |
| L-serín | 30.00 | |
| L-Treonín | 20.00 | |
| L-tryptofán | 5.00 | |
| L-Tyrozín 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-Valín | 20.00 | |
| Vitamíny | kyselina p-aminobenzoová | 1.00 |
| D-Biotín | 0.20 | |
| Cholín chlorid | 3.00 | |
| D-pantotenát vápenatý | 0.25 | |
| Kyselina listová | 1.00 | |
| myo-Inozitol | 35.00 | |
| Nikotínamid | 1.00 | |
| Pyridoxín HCl | 1.00 | |
| Riboflavín | 0.20 | |
| Tiamín HCl | 1.00 | |
| Vitamín B12 | 0.005 | |
| Anorganické soli | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Ostatné zložky | D-glukóza | 2000.00 |
| L-Glutatión redukovaný | 1.00 | |
| Fenolová červená sodná soľ | 5.30 |