Celice HuH7

Cytionov medij za zamrzovanje CM-1 je najsodobnejši medij za kriokonzervacijo, ki je zasnovan tako, da zagotavlja najvišjo raven vitalnosti in funkcionalnosti celic po odmrznitvi. To vsestransko gojišče je primerno za širok spekter vrst celic, vključno s človeškimi in živalskimi celicami, zato je bistveno orodje za različne raziskovalne aplikacije. Medij za zamrzovanje CM-1 je oblikovan s skrbno uravnoteženo kombinacijo krioprotektantov in bistvenih hranil, kar zmanjšuje nastajanje ledenih kristalov in celični stres med postopkom zamrzovanja ter tako ohranja celično celovitost.
Ključne značilnosti Freeze Medium CM-1 vključujejo:

Široka združljivost: Učinkovita za širok spekter celičnih vrst, vključno s primarnimi celicami, matičnimi celicami in uveljavljenimi celičnimi linijami.
Visoka sposobnost preživetja: Optimizirano za čim večjo obnovo in vitalnost celic po odmrzovanju, kar zagotavlja zanesljive rezultate poskusov.
Pripravljen za uporabo: Priročno pripravljene in sterilizirane za takojšnjo uporabo, kar zmanjšuje čas priprave in tveganje kontaminacije.
Izboljšana stabilnost: Ohranja dosledno delovanje v standardnih pogojih kriokonzervacije, kar zagotavlja ponovljive rezultate.
Dolg rok trajanja: CM-1 je za uporabo pripravljen medij za kriokonzervacijo, ki vsebuje serum in se lahko v hladilniku hrani do enega leta.


Uporaba CM-1 za zamrzovanje celic

Če želite uporabiti CM-1 za zamrzovanje adherentnih in suspenzijskih celic, sledite naslednjim korakom

Pri adherentnih celicah jih sperite in ločite od podlage za gojenje. Za suspenzijske celice nadaljujte neposredno z naslednjim korakom.
Preštejte celice, da zagotovite njihovo ustrezno koncentracijo.
Celice centrifugirajte, da jih oprašite, nato jih ponovno suspendirajte v gojišču za zamrzovanje CM-1.
Resuspendirane celice prenesite v kriovile.
Pred prenosom celic v dolgoročno skladiščenje uporabite metodo počasnega zamrzovanja





Metoda
Opis
Koraki





❄️
Ročno zamrzovanje

Postopna metoda, ki vključuje postopno zniževanje temperature, da se zagotovi vitalnost celic

1️⃣ Postavite celice v gojišče za zamrzovanje v zamrzovalnik pri 4 °C za 40 minut.
2️⃣ Za 24 ur prenesite v zamrzovalnik pri -80 °C.
3️⃣ Za dolgoročno shranjevanje shranite celice v tekočem dušiku



❄️
Uporaba pripomočka Mr. Frosty

Priročna naprava, ki omogoča nadzorovano hitrost zamrzovanja brez električne energije

1️⃣ Pripravite celice v kriovile z gojiščem za zamrzovanje.
2️⃣ Kriovile postavite v posodo Mr. Frosty.
3️⃣ Pred prenosom v tekoči dušik jih 24 ur hranite pri -80 °C



❄️
Zamrzovalnik z nadzorovano hitrostjo

Zelo natančen zamrzovalnik Thermo Fisher ali drugih proizvajalcev, namenjen nadzorovanemu zniževanju temperature

1️⃣ Napravo sprogramirajte tako, da postopoma znižuje temperaturo.
2️⃣ Pripravljene celice postavite v zamrzovalnik.
3️⃣ Po ciklu zamrzovanja prenesite celice v tekoči dušik









Kriovile shranite pri temperaturi pod -130 °C ali v tekočem dušiku za dolgoročno shranjevanje.


Sestavine

Vsebuje FBS, DMSO, glukozo, soli
Pufrirna sposobnost: pH = 7,2 do 7,6


Sredstvo za zamrzovanje CM-1 podjetja Cytion ponuja zanesljivo rešitev za kriokonzervacijo, ki zagotavlja visoko vitalnost in funkcionalnost celic po odmrznitvi za širok spekter raziskovalnih aplikacij.

Gojišče RPMI 1640, znano tudi kot gojišče RPMI, je zelo vsestransko gojišče za celične kulture, ki se pogosto uporablja v bioloških raziskavah za gojenje različnih celic sesalcev. To gojišče, ki so ga leta 1966 razvili George E. Moore, Robert E. Gerner in H. Addison Franklin v znanem centru Roswell Park Comprehensive Cancer Center, je dobilo ime po svojem izvoru na Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Sredstvo RPMI 1640, ki je bilo sprva zasnovano za podporo rasti človeških levkemičnih celic v suspenzijskih in enoslojnih kulturah, se je z modifikacijami raziskovalcev in komercialnih dobaviteljev razvilo in postalo primerno za različne celice sesalcev. Izjemno je združljivo s celičnimi linijami, kot so HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrociti in karcinomi.
Medij RPMI 1640 se zaradi svoje edinstvene sestave razlikuje od drugih medijev za celične kulture. Vsebuje veliko količino fosfatov, aminokislin in vitaminov. Predvsem vsebuje biotin, vitamin B12 in PABA, ki jih ni v Eaglovem minimalnem esencialnem mediju ali Dulbeccovem modificiranem mediju Eagle. Poleg tega ima RPMI 1640 Medium znatno povišane koncentracije vitaminov inozitola in holina. Vendar ne vsebuje beljakovin, lipidov ali rastnih dejavnikov. Zato je za zagotovitev optimalnih pogojev za rast celic običajno potrebno dodajanje 10 % fetalnega govejega seruma (FBS).
Pufrirni sistem medija RPMI 1640 temelji na natrijevem bikarbonatu in za vzdrževanje fiziološko primernega pH potrebuje 5-10 % CO2. Vključitev reducenta glutationa še dodatno razlikuje to gojišče od drugih.
Nadzor kakovosti

Sterilno filtriran


Shranjevanje in rok trajanja

Shranjujte pri temperaturi od +2 °C do +8 °C, zaščiteno pred svetlobo.
Po odprtju hranite pri 4 °C in porabite v 6-8 tednih.


Pogoji pošiljanja

Temperatura okolja


Vzdrževanje

Hranite v hladilniku pri temperaturi od +2 °C do +8 °C v temi. Izogibajte se zamrzovanju in pogostemu segrevanju na +37 °C, saj to zmanjša kakovost izdelka.
Medija ne segrevajte nad 37 °C in ne uporabljajte nenadzorovanih virov toplote, kot so mikrovalovne naprave.
Če želite uporabiti le del medija, pred uporabo odstranite potrebno količino in jo segrejte na sobno temperaturo.



Sestava




Kategorija
Sestavine
Koncentracija (mg/L)


Aminokisline
Glicin
10.00



L-alanil-L-glutamin
434.40



L-arginin
200.00



L-asparaginH2O
56.82



L-asparaginska kislina
20.00



L-cistin 2HCl
65.20



L-glutaminska kislina
20.00



L-histidin HClH2O
20.27



L-hidroksi-L-prolin
20.00



L-izolevcin
50.00



L-levcin
50.00



L-lizin HCl
40.00



L-metionin
15.00



L-fenilalanin
15.00



L-prolin
20.00



L-serin
30.00



L-treonin
20.00



L-triptofan
5.00



L-tirozin 2Na 2H2O
28.83



L-valin
20.00


Vitamini
p-aminobenzojska kislina
1.00



D-biotin
0.20



Holin klorid
3.00



D-kalcijev pantotenat
0.25



Folna kislina
1.00



mio-nizitol
35.00



Nikotinamid
1.00



Piridoksin HCl
1.00



Riboflavin
0.20



Tiamin HCl
1.00



Vitamin B12
0.005


Anorganske soli
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Druge sestavine
D-glukoza
2000.00



Reducirani L-glutation
1.00



Natrijeva sol fenol rdečega
5.30

Reagent za disociacijo celic Accutase
- nežna alternativa tripsinu
Accutase je raztopina za ločevanje celic, ki revolucionarno spreminja industrijo celičnih kultur. Je mešanica proteolitičnih in kolagenolitičnih encimov, ki posnema delovanje tripsina in kolagenaze. Za razliko od tripsina Accutase ne vsebuje sesalskih ali bakterijskih sestavin in je do celic veliko nežnejša, zato je idealna rešitev za rutinsko ločevanje celic s standardne plastične posode za tkivne kulture in plastične posode z adhezijsko prevleko. V tem prispevku bomo raziskali prednosti in uporabo Accutase ter kako spreminja pravila igre v celičnih kulturah.
Prednosti Accutase
Accutase ima več prednosti pred tradicionalnimi raztopinami tripsina. Prvič, uporablja se lahko, kadar koli je potrebna nežna in učinkovita ločitev katere koli adherentne celične linije, zato je neposredna zamenjava za tripsin. Drugič, Accutase zelo dobro deluje na embrionalnih in nevronskih matičnih celicah in dokazano ohranja vitalnost teh celic po prehodu. Tretjič, Accutase ohrani večino epitopov za kasnejšo analizo s pretočno citometrijo, zaradi česar je idealna za analizo označevalcev celične površine.
Poleg tega Accutase ni treba nevtralizirati, ko se prenašajo adherentne celice. Dodajanje večje količine medija po razdelitvi celic razredči Accutase, tako da ta ne more več ločiti celic. S tem odpade potreba po postopku inaktivacije, tehniki celičnih kultur pa prihranijo čas. Accutase ni treba alikvotno odmerjati, steklenička pa je v hladilniku stabilna 2 meseca.
Uporaba Accutase
Accutase je neposreden nadomestek za raztopino tripsina in se lahko uporablja za pasažiranje celičnih linij. Poleg tega se Accutase dobro obnese pri ločevanju celic za analizo številnih označevalcev celične površine s pretočno citometrijo in za sortiranje celic. Druge nadaljnje uporabe obdelave z Accutase vključujejo analizo celičnih površinskih označevalcev, testiranje rasti virusov, proliferacijo celic, teste migracije tumorskih celic, rutinsko prehajanje celic, povečanje proizvodnje (bioreaktor) in pretočno citometrijo.
Sestava zdravila Accutase
Accutase ne vsebuje sesalskih ali bakterijskih sestavin in je naravna mešanica encimov s proteolitično in kolagenolitično encimsko aktivnostjo. Sestavljena je v veliko nižji koncentraciji kot tripsin in kolagenaza, zato je manj toksična in nežnejša, vendar enako učinkovita.
Učinkovitost zdravila Accutase
Dokazano je, da je akutaza učinkovita pri ločevanju primarnih in matičnih celic ter ohranjanju visoke vitalnosti celic v primerjavi z encimi živalskega izvora, kot je tripsin. po 10 minutah se obnovi 100 % celic, zaradi avtodigestije v kislini Accutase pa ni škode, če celice pustite v kislini Accutase do 45 minut.
Če povzamemo
Accutase je učinkovita rešitev, ki spreminja pravila igre na področju celičnih kultur. Zaradi svoje nežne narave, učinkovitosti in vsestranskosti je Accutase idealna alternativa tripsinu. Če iščete zanesljivo in učinkovito rešitev za ločevanje celic, je Accutase prava rešitev za vas.

Pregled izdelka
Prostornina: 100 ml Shranjevanje: ≤-15 °C Sterilnost: Sterilnost: Sterilno filtrirano
Antibiotična/antimikotična raztopina (100x ) je sterilen koncentrat, pripravljen za uporabo, namenjen zmanjšanju tveganja mikrobne kontaminacije v celičnih kulturah in sorodnih laboratorijskih aplikacijah. Ta raztopina 100x vsebuje uveljavljeno kombinacijo penicilina, streptomicina in amfotericina B, ki zagotavlja širok spekter protimikrobnega delovanja proti grampozitivnim in gramnegativnim bakterijam, kvasovkam in nitastim glivicam. Formulacija je primerna za uporabo v evkariontskih celičnih kulturah, bakterijskih gojiščih in drugih sistemih, občutljivih na kontaminacijo, ter podpira čiste in dosledne laboratorijske postopke.
Uporaba in prednosti Ta raztopina, optimizirana za rutinske raziskovalne protokole, se pogosto uporablja za vzdrževanje aseptičnih pogojev v delovnih postopkih celičnih kultur. Zagotavlja zanesljivo delovanje v okoljih, občutljivih na kontaminacijo, in raziskovalcem pomaga zmanjšati tveganje za prekomerno rast mikrobov, ne da bi pri tem ogrozili zdravje celic ali ponovljivost poskusov. Sterilno filtrirana formulacija odpravlja potrebo po dodatnih korakih solubilizacije, kar podpira poenostavljeno pripravo gojišč in zmanjšuje variabilnost vsakodnevnih laboratorijskih postopkov.
Uporaba in združljivost Za doseganje standardnih delovnih koncentracij raztopino razredčite v razmerju 1 : 100 v celotnem gojišču. Izdelek je združljiv s številnimi celičnimi linijami sesalcev in osnovnimi gojišči. Zaradi stalne razpoložljivosti zalog imajo raziskovalci koristi od zanesljive neprekinjene oskrbe in poenostavljenega načrtovanja logistike. Raztopino je treba hraniti pri ≤ -15 °C in jo zaščititi pred ponavljajočimi se cikli zamrzovanja in odmrzovanja, da se ohrani stabilnost. Samo za raziskovalno uporabo. Ni za uporabo v diagnostičnih ali terapevtskih postopkih. Ni za uporabo pri ljudeh ali živalih.

Raztopina fiziološke raztopine s puferjem fosfata (PBS)
S fosfatom puferirana fiziološka raztopina (PBS) je široko uporabljena puferska raztopina v bioloških in kemijskih raziskavah. Ima ključno vlogo pri ohranjanju ravnovesja pH in osmolarnosti med različnimi eksperimentalnimi postopki, vključno z obdelavo tkiv in gojenjem celic. Naša raztopina PBS je skrbno pripravljena iz sestavin visoke čistosti, kar zagotavlja stabilnost in zanesljivost pri vsakem poskusu. Osmolarnost in koncentracije ionov v naši raztopini PBS natančno posnemajo tiste v človeškem telesu, zato je izotonična in nestrupena za večino celic.

Sestava naše raztopine PBS
Naša raztopina PBS je mešanica fosfatnih pufrov in fizioloških raztopin ultračiste kakovosti, ki ji je prilagojen pH. V 1-kratni delovni koncentraciji vsebuje:

8000 mg/L natrijevega klorida (NaCl)
200 mg/L kalijev klorid (KCl)
1150 mg/L natrijev fosfat dvodazni brezvodni (Na2HPO4)
200 mg/L Kalijev fosfat enobazni brezvodni (KH2PO4)

Ta sestava zagotavlja optimalno pH in ionsko ravnovesje, primerno za širok spekter bioloških aplikacij.

Uporaba naše raztopine PBS
Naša raztopina PBS je idealna za različne aplikacije v bioloških raziskavah. Zaradi izotoničnih in netoksičnih lastnosti je primerna za redčenje snovi in izpiranje celičnih posod. Raztopine PBS, ki vsebujejo EDTA, so učinkovite za odstranjevanje pritrjenih in zlepljenih celic. Vendar se PBS ne sme dodajati dvovalentnih kovin, kot je cink, saj lahko povzroči obarjanje. V takih primerih se priporočajo Goodovi pufri. Poleg tega je naša raztopina PBS sprejemljiva alternativa mediju za prenos virusov za prenos in shranjevanje virusov RNA, vključno z virusom SARS-CoV-2.

Nadzor kakovosti

Sterilno filtriran


Shranjevanje in rok uporabnosti

Shranjujte pri temperaturi od +2 °C do +25 °C, zaščiteni pred svetlobo.
Po odprtju hranite pri temperaturi od 2 °C do 25 °C in porabite v 24 mesecih.


Pogoji pošiljanja

Temperatura okolja


Vzdrževanje

Hranite v hladilniku pri temperaturi od +2 °C do +8 °C v temi. Izogibajte se zamrzovanju in pogostemu segrevanju na +37 °C, saj to zmanjša kakovost izdelka.
Medija ne segrevajte nad 37 °C in ne uporabljajte nenadzorovanih virov toplote, kot so mikrovalovne naprave.
Če želite uporabiti le del medija, pred uporabo odstranite potrebno količino in jo segrejte na sobno temperaturo.

Sestava



Kategorija
Sestavine
Koncentracija (mg/L)


Soli
Kalijev klorid
200



Kalijev fosfat monobazni brezvodni
200



Natrijev klorid
8000



Natrijev fosfat dvobazni brezvodni
1150