McCoys 5A besiyeri (modifiye), w: 3,0 g/L Glukoz, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Sodyum piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium, birincil hücre kültürlerinde virüslerin büyümesini ve çoğalmasını kolaylaştırmak için tasarlanmış, şiddetle tavsiye edilen ve özel bir besiyeridir. Çeşitli biyolojik araştırma uygulamalarında olağanüstü performansı ile önemli bir tanınırlık kazanmıştır.
McCoy's 5A Medium'un öne çıkan uygulamalarından biri, insan kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde kullanılmasıdır. Özellikle, lösin bakımından zengin tekrar içeren G-protein-bağlı reseptör (LGR5) ve kolon kanserinin metastazındaki rolü üzerine yapılan çalışmalarda kullanılmıştır. Bu besiyeri, HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ve TENN dahil olmak üzere çeşitli kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde etkili bir şekilde kullanılmıştır ve araştırmacıların kolon kanseri metastazının altında yatan mekanizmaları daha derinlemesine incelemelerini sağlamıştır.
Kanser araştırmalarındaki uygulamasına ek olarak, McCoy's 5A Ortamı osteoblastların incelenmesinde de vazgeçilmez olduğu kanıtlanmıştır. Standart hücre kültürü ortamlarında kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatitin iyon reaktivitesini araştıran araştırmacılar, osteoblastları kültürlemek için bu ortamı kullanmıştır. Bu uygulama, osteoblastlar ve kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatit arasındaki etkileşimlerin daha iyi anlaşılmasını kolaylaştırarak kemik araştırmaları alanındaki ilerlemelere katkıda bulunmuştur.
McCoy's 5A Ortamı, karaciğer tümör hücrelerine optimal destek sağlamak için Basal Medium Eagle'da bulunan amino asitleri modifiye ederek titizlikle formüle edilmiştir. Bu zenginleştirilmiş formülasyon, çeşitli yerleşik hücre hatlarının yanı sıra birincil hücreler için de uygun olmasını sağlayarak, çeşitli araştırma ortamlarında çok yönlülüğünü ve uygulanabilirliğini daha da artırmaktadır.
McCoy's 5A Medium, biyokimyasal ve fizyolojik etkilerini karaciğer tümör hücrelerinin ötesine genişletir. Kemik iliği, deri, diş eti, böbrek, omentum, adrenal, akciğer, dalak, sıçan embriyosu ve diğer hücre tiplerinin birincil kültürlerinde büyümeyi desteklemek için başarıyla kullanılmıştır. Bu geniş uygulama yelpazesi, kapsamlı biyolojik araştırmalar için çeşitli hücre tiplerinin büyümesini ve bakımını desteklemede McCoy's 5A Medium'un geniş kullanım alanını kanıtlamaktadır.
Formülasyon
Bu McCoy's 5A ortamı (modifiye), 3,0 g/L glikoz, stabil glutamin, 2,0 mM sodyum piruvat ve 2,2 g/L NaHCO3 içerir.
Kalite kontrol
- pH = 7,2 +/- 0,02, 20-25 °C'de.
- Her parti sterillik ve mikoplazma ve bakteri bulunmadığı konusunda test edilmiştir.
Saklama
- Karanlıkta +2°C ila +8°C arasında buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini en aza indirir.
- Ortamı 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın.
- Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
- Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, açılma tarihinden itibaren 6 ila 8 haftadır.
Bileşim
| Bileşenler | mg/L | |
| İnorganik Tuzlar | Kalsiyum klorür x 2H2O | 132,00 |
| Magnezyum sülfat | 97,67 | |
| Potasyum klorür | 400 | |
| Sodyum klorür | 6.460 | |
| Disodyum hidrojen fosfat (susuz) | 504,00 | |
| Diğer Bileşenler | D(+)-Glikoz (susuz) | 3.000 |
| Glutatyon (indirgenmiş) | 0 | |
| Et Peptonu | 600 | |
| Fenol kırmızısı sodyum tuzu | 11 | |
| Amino Asitler | L-Alanin | 13 |
| L-Arginin x HCl | 42,1 | |
| L-Asparagin x H2O | 45,03 | |
| L-Aspartik asit | 19,97 | |
| L-Sistein x HCl x H2O | 31,75 | |
| L-Glutamin (kararlı) | 21 | |
| L-Glutamik asit | 22 | |
| Glisin | 7,51 | |
| L-Histidin x HCl x H2O | 20,96 | |
| L-Hidroksiprolin | 19,67 | |
| L-İzolösin | 39,3 | |
| L-Lösin | 39,36 | |
| L-Lizin x HCl | 36,54 | |
| L-Metiyonin | 14,92 | |
| L-Fenilalanin | 16,52 | |
| L-Prolin | 17,27 | |
| L-Serin | 26,28 | |
| L-Treonin | 17,87 | |
| L-Triptofan | 3,06 | |
| L-Tirozin disodyum tuzu | 26,10 | |
| L-Valin | 17,57 | |
| Vitaminler | p-Aminobenzoik asit | 1 |
| Askorbik asit | 0,56 | |
| D(+)-Biotin | 0 | |
| D-Kalsiyum pantotenat | 0,2 | |
| Kolin klorür | 5 | |
| Folik asit | 10 | |
| Miyo-inositol | 36 | |
| Nikotinamid | 0,5 | |
| Nikotinik asit | 0 | |
| Piridoksal HCl | 0,5 | |
| Piridoksin HCl | 0,5 | |
| Riboflavin | 0 | |
| Tiamin HCl | 0 | |
| B12 vitamini | 2 |