Medium 199, w: 2,7 mM stabil Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Medium 199, birincil eksplantların yetiştirilmesi için özel olarak formüle edilmiş çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir hücre kültürü ortamıdır. Bu kapsamlı besiyeri, çeşitli hücre tipleri için tam olarak tanımlanmış bir besin kaynağı sağlamak üzere temel vitaminleri, amino asitleri ve diğer faktörleri bir araya getirir. Özellikle transformasyona uğramamış hücreler için uygundur ve biyolojik araştırmalar için paha biçilmez bir araçtır.
Medium 199 bu alanda bir dizi uygulama sunmaktadır. Kümülüs-oosit kompleksini (COC) etkili bir şekilde muhafaza edebilir ve oositlerin in vitro olgunlaşmasını destekleyebilir. Ayrıca, Alman Holstein ineklerinden ovum toplanması sırasında aspirasyon hatlarının durulanmasında kullanılır. Ayrıca, Medium 199 sıçanlardan elde edilen kardiyak endotelyal hücrelerin kültürü için mükemmel bir ortam görevi görmektedir. Bu uygulamalar, Medium 199'un çok yönlülüğünü ve çeşitli deneysel ihtiyaçlara uyarlanabilirliğini göstermektedir.
Tarihçe
1950'lerde Medium 199'un geliştirilmesi doku kültürü ortamlarında önemli bir ilerlemeye işaret etmiştir. Bu ürünün piyasaya sürülmesinden önce, birçok kültür ortamı hayvan kaynaklı ürünlere ve doku özlerine dayanıyordu. Ancak Morgan ve meslektaşları hücre kültürleri için tamamen tanımlanmış bir besin kaynağı formüle ederek bu alanda devrim yarattı. Vitaminlerin, amino asitlerin ve diğer faktörlerin farklı kombinasyonlarını içeren deneyleri sayesinde, Medium 199'un olağanüstü büyümeyi teşvik edici özelliklerini keşfettiler.
Kalite kontrol
- 20-25°C'de pH = 7,2 +/- 0,02.
- Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.
Bakım
- 2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37° C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
- Besiyerini 37° C'den daha fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
- Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
- Temel besiyeri dışındaki tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.
Kompozisyon
| Bileşenler | mg/L | |
| İnorganik Tuzlar | Kalsiyum klorür x 2H2O | 264,92 |
| Demir (III) nitrat x 9H2O | 0,72 | |
| Magnezyum sülfat | 97,67 | |
| Potasyum klorür | 400,00 | |
| Sodyum asetat x 3H2O | 82,95 | |
| Sodyum klorür | 6,800.00 | |
| Sodyum dihidrojen fosfat x H2O | 140,00 | |
| Diğer Bileşenler | Adenin sülfat | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Kolesterol | 0,20 | |
| 2'-Deoksiriboz | 0,50 | |
| D(+)-Glikoz susuz | 1,000.00 | |
| Glutatyon (kırmızı) | 0,05 | |
| Guanin x HCl | 0,30 | |
| Hipoksantin | 0,30 | |
| Fenol kırmızısı | 10,00 | |
| D-Riboz | 0,50 | |
| Timin | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Urasil | 0,30 | |
| Ksantin | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Amino Asitler | L-Alanin | 25,00 |
| L-Arginin x HCl | 70,00 | |
| L-Aspartik asit | 30,00 | |
| L-Sistein x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-Sistin | 20,00 | |
| L-Glutamin stabil | 149,00 | |
| L-Glutamik asit | 67,00 | |
| Glisin | 50,00 | |
| L-Histidin x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-Hidroksiprolin | 10,00 | |
| L-İzolösin | 20,00 | |
| L-Lösin | 60,00 | |
| L-Lizin x HCl | 70,00 | |
| L-Metiyonin | 15,00 | |
| L-Fenilalanin | 25,00 | |
| L-Proline | 40,00 | |
| L-Serin | 25,00 | |
| L-Threonine | 30,00 | |
| L-Triptofan | 10,00 | |
| L-Tirozin | 40,00 | |
| L-Valine | 25,00 | |
| Vitaminler | 4-Amino benzoik asit | 0,05 |
| Askorbik asit | 0,05 | |
| D(+)-Biyotin | 0,01 | |
| Kalsiferol | 0,10 | |
| D-Kalsiyum pantotenat | 0,01 | |
| Kolin klorür | 0,50 | |
| Folik asit | 0,01 | |
| miyo-İnositol | 0,05 | |
| Menadion | 0,01 | |
| Nikotinik asit | 0.025 | |
| Nikotinamid | 0.025 | |
| Piridoksal x HCl | 0.025 | |
| Piridoksol x HCl | 0.025 | |
| Riboflavin | 0,01 | |
| DL-α-Tokoferol fosfat disodyum tuzu | 0,01 | |
| Tiamin x HCl | 0,01 | |
| A Vitamini asetat | 0,14 |