Клітини MCF10A

Cytion's Freeze Medium CM-1
- це сучасне середовище для кріоконсервування, розроблене для забезпечення найвищого рівня життєздатності та функціональності клітин після розморожування. Це універсальне середовище підходить для широкого спектру типів клітин, включаючи клітини людини і тварин, що робить його незамінним інструментом для різноманітних наукових досліджень. Створене на основі ретельно збалансованої комбінації кріопротекторів та основних поживних речовин, середовище Freeze Medium CM-1 мінімізує утворення кристалів льоду та клітинний стрес під час процесу заморожування, зберігаючи таким чином клітинну цілісність.
Основні характеристики середовища Freeze Medium CM-1 включають

Широка сумісність: Ефективний для широкого спектру типів клітин, включаючи первинні клітини, стовбурові клітини та сформовані клітинні лінії.
Висока життєздатність: Оптимізовано для максимального відновлення та життєздатності клітин після розморожування, що забезпечує надійні результати експериментів.
Готовність до використання: Зручно готуються і стерилізуються для негайного застосування, скорочуючи час підготовки і ризик забруднення.
Підвищена стабільність: Підтримує стабільні характеристики за стандартних умов кріоконсервування, забезпечуючи відтворюваність результатів.
Тривалий термін зберігання: CM-1
- це готовий до використання сироватковий розчин для кріоконсервування, який можна зберігати в холодильнику до одного року.


Використання CM-1 для заморожування клітин

Щоб використовувати CM-1 для заморожування як адгезійних, так і суспензійних клітин, виконайте такі дії

Для адгезивних клітин промийте і відокремте їх від культурального субстрату. Для суспендованих клітин перейдіть до наступного кроку.
Підрахуйте клітини, щоб переконатися, що вони мають належну концентрацію.
Відцентрифугуйте клітини, щоб осадити їх, а потім ресуспендуйте в заморожувальному середовищі CM-1.
Перенесіть ресуспендовані клітини в кріопробірки.
Використовуйте метод повільного заморожування перед перенесенням клітин на довгострокове зберігання





Метод
Опис
Етапи





❄️
Ручне заморожування

Поетапний метод, що передбачає поступове зниження температури для забезпечення життєздатності клітин

1️⃣ Помістіть клітини в середовище для заморожування в морозильну камеру при 4°C на 40 хвилин.
2️⃣ Перенесіть в морозильну камеру при -80°C на 24 години.
3️⃣ Зберігайте клітини в рідкому азоті для тривалого збереження



❄️
Використання містера Фрості

Зручний пристрій, який дозволяє контролювати швидкість заморожування без використання електроенергії

1️⃣ Підготуйте клітини в кріопробірках із заморожувальним середовищем.
2️⃣ Помістіть кріовіали в контейнер Mr. Frosty.
3️⃣ Зберігайте при -80°C протягом 24 годин перед перенесенням у рідкий азот



❄️
Морозильник з контрольованою температурою

Високоточний морозильник Thermo Fisher або інших виробників, призначений для контрольованого зниження температури

1️⃣ Запрограмуйте пристрій на поступове зниження температури.
2️⃣ Помістіть підготовлені клітини в морозильну камеру.
3️⃣ Після циклу заморожування перенесіть клітини в рідкий азот









Зберігайте кріовіали при температурі нижче -130°C або в рідкому азоті для тривалого збереження.


Склад

Містить FBS, ДМСО, глюкозу, солі
Буферна ємність: pH = 7,2-7,6


Середовище CM-1 від Cytion пропонує надійне рішення для кріоконсервування, що забезпечує високу життєздатність клітин та їх функціональність після розморожування для широкого спектру дослідницьких завдань.

DMEM:Ham's F12 є широко визнаним і широко використовуваним базальним середовищем для культивування клітин у біологічних дослідженнях. Воно слугує основним джерелом поживних речовин для росту різних клітинних ліній ссавців, особливо при додаванні фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS).

Ця унікальна рецептура поєднує в собі модифіковане орлине середовище Dulbecco (DMEM) та поживну суміш Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) у точному співвідношенні 1:1. Додавання L-глутаміну ще більше покращує його склад.

DMEM, отриманий з Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), пропонує підвищену концентрацію амінокислот і вітамінів у порівнянні зі своїм попередником. На відміну від нього, Ham's F-12 базується на середовищі Ham's F-10, забезпечуючи додатковий набір необхідних компонентів.

Для підтримки оптимального росту клітин зазвичай до DMEM:Ham's F12 додають FBS у типовій концентрації 5-10%. Це додавання необхідне, оскільки в середовищі не вистачає гормонів росту, ліпідів та білків, які мають вирішальне значення для клітинного розвитку.

DMEM:Ham's F12 містить буферну систему рН і часто доповнюється феноловим червоним, індикатором рН. Культивовані клітини в DMEM:Ham's F12 або будь-якому середовищі, що використовує бікарбонатну буферну систему, потребують контрольованого середовища з вмістом CO2 5-10% для підтримання відповідного рівня pH.


Контроль якості

Стерильна фільтрація


Зберігання та термін придатності

Зберігати при температурі від +2°C до +8°C, в захищеному від світла місці.
Після відкриття зберігати при температурі 4°C і використати протягом 6-8 тижнів.


Умови транспортування

Температура навколишнього середовища


Обслуговування

Зберігати в холодильнику при температурі від +2°C до +8°C у темряві. Уникайте заморожування та частого нагрівання до +37°C, оскільки це знижує якість продукту.
Не нагрівайте середовище вище 37°C і не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі.
Якщо потрібно використати лише частину засобу, відберіть необхідну кількість і підігрійте його до кімнатної температури перед застосуванням.


Склад



Категорія
Компоненти
Концентрація (мг/л)


Амінокислоти
Гліцин
18.75


L-аланін
4.45


L-аргінін HCl
147.50


L-аспарагін H₂O
7.50


L-аспарагінова кислота
6.65


L-цистеїн HCl H₂O
17.56


L-цистин 2 HCl
31.29


L-глутамінова кислота
7.35


L-глутамін
365.00


L-гістидин HCl H₂O
31.48


L-ізолейцин
54.47


L-лейцин
59.05


L-лізин HCl
91.25


L-метіонін
17.24


L-фенілаланін
35.48


L-пролін
17.25


L-серин
26.25


L-треонін
53.45


L-триптофан
9.02


L-тирозину динатрієва сіль
48.10


L-валін
52.85


Вітаміни
D-біотин
0.0035


Холіну хлорид
8.98


D-Кальцію пантотенат
2.24


Фолієва кислота
2.66


міо-інозитол
12.60


Нікотинамід
2.02


Піридоксин HCl
0.031


Піридоксаль HCl
2.00


Рибофлавін
0.219


Тіамін HCl
2.17


Вітамін В12
0.68


Неорганічні солі
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Інші компоненти
D-глюкоза
3151.00


Гіпоксантин
2.40


HEPES
3574.50


Лінолева кислота
0.042


Ліпоєва кислота
0.105


Фенол червоний натрієва сіль
8.63


Путресцин 2 HCl
0.081


Піруват натрію
55.00


Тимідин
0.365

Реагент для дисоціації клітин Accutase
- м'яка альтернатива трипсину
Аккутаза
- це розчин для відокремлення клітин, який революціонізує індустрію клітинних культур. Це суміш протеолітичних і колагенолітичних ферментів, яка імітує дію трипсину і колагенази. На відміну від трипсину, Аккутаза не містить жодних ссавців або бактеріальних компонентів і набагато м'якше діє на клітини, що робить її ідеальним рішенням для рутинного відділення клітин від стандартного пластикового посуду для культури тканин і пластикового посуду з адгезивним покриттям. У цій статті ми розповімо про переваги та застосування Accutase, а також про те, як вона змінює правила гри в культурі клітин.
Переваги Accutase
Аккутаза має кілька переваг над традиційними розчинами трипсину. По-перше, її можна використовувати, коли потрібно м'яко та ефективно відокремити будь-яку прилиплу клітинну лінію, що робить її прямою заміною трипсину. По-друге, Аккутаза надзвичайно добре працює на ембріональних і нейронних стовбурових клітинах, і було показано, що вона підтримує життєздатність цих клітин після пасажування. По-третє, Accutase зберігає більшість епітопів для подальшого аналізу методом проточної цитофлуориметрії, що робить її ідеальною для аналізу маркерів клітинної поверхні.
Крім того, Аккутазу не потрібно нейтралізувати при пасажуванні адгезованих клітин. Додавання більшої кількості середовища після поділу клітин розбавляє Accutase, тому вона більше не здатна відокремлювати клітини. Це усуває необхідність в інактивації та економить час для техніків, які працюють з культурами клітин. Нарешті, Аккутазу не потрібно аліквотувати, а флакон стабільно зберігається в холодильнику протягом 2 місяців.
Застосування Аккутази
Аккутаза є прямою заміною розчину трипсину і може використовуватися для пасажування клітинних ліній. Крім того, Аккутаза добре проявляє себе при відділенні клітин для аналізу багатьох маркерів клітинної поверхні за допомогою проточної цитофлуориметрії, а також для сортування клітин. Інші сфери застосування Accutase включають аналіз маркерів клітинної поверхні, аналіз росту вірусів, проліферацію клітин, аналіз міграції пухлинних клітин, рутинне пасажування клітин, масштабування виробництва (біореактор) і проточну цитометрію.
Склад аккутази
Аккутаза не містить компонентів ссавців або бактерій і є природною ферментною сумішшю з протеолітичною та колагенолітичною активністю. Вона має набагато нижчу концентрацію, ніж трипсин і колагеназа, що робить її менш токсичною і м'якшою, але такою ж ефективною.
Ефективність Аккутази
Аккутаза виявилася ефективнішою у відділенні первинних і стовбурових клітин та підтримці високої життєздатності клітин порівняно з ферментами тваринного походження, такими як трипсин. 100% клітин відновлюються через 10 хвилин, і немає ніякої шкоди, якщо залишити клітини в Accutase до 45 хвилин, завдяки автоперетравленню Accutase.
Підсумовуючи
На закінчення, Accutase
- це потужне рішення, яке змінює правила гри в культурі клітин. Завдяки своїй м'якій дії, ефективності та універсальності, Аккутаза є ідеальною альтернативою трипсину. Якщо ви шукаєте надійне та ефективне рішення для відокремлення клітин, Аккутаза
- це рішення для вас.

Огляд продукту
Об'єм: 100 мл Зберігання: ≤-15°C Стерильність: Стерильно відфільтрований
Розчин антибіотика/антимікотика (100х )
- це стерильний, готовий до використання концентрат, призначений для зменшення ризику мікробного забруднення в культурі клітин та інших лабораторних дослідженнях. Цей 100-кратний розчин містить добре відому комбінацію пеніциліну, стрептоміцину та амфотерицину В, що забезпечує антимікробну активність широкого спектру дії проти грампозитивних і грамнегативних бактерій, дріжджів та нитчастих грибів. Препарат підходить для використання в культурах еукаріотичних клітин, бактеріальних середовищах та інших чутливих до забруднення системах, підтримуючи чистоту та послідовність лабораторних операцій.
Застосування та переваги Оптимізоване для рутинних дослідницьких протоколів, це рішення широко використовується для підтримання асептичних умов у робочих процесах з клітинними культурами. Воно забезпечує надійну роботу в чутливих до забруднення середовищах, допомагаючи дослідникам зменшити ризик надмірного росту мікроорганізмів без шкоди для здоров'я клітин і відтворюваності експериментів. Стерильно відфільтрований склад усуває необхідність у додаткових етапах розчинення, сприяючи спрощеній підготовці середовищ і зменшуючи варіабельність щоденних лабораторних процедур.
Використання та сумісність Для досягнення стандартних робочих концентрацій розведіть розчин у співвідношенні 1:100 у вашому поживному середовищі. Продукт сумісний з широким спектром клітинних ліній ссавців і базальних середовищ. Завдяки постійній наявності на складі, дослідники отримують вигоду від надійного безперервного постачання та спрощеного планування логістики. Розчин слід зберігати при ≤ -15 °C і захищати від повторних циклів заморожування-розморожування для збереження стабільності. Тільки для дослідницьких цілей. Не для використання в діагностичних або терапевтичних процедурах. Не застосовувати для лікування людей або тварин.

Фосфатно-буферний розчин (PBS)
Фосфатно-буферний розчин (PBS)
- це буферний розчин, який широко використовується в біологічних і хімічних дослідженнях. Він відіграє важливу роль у підтримці балансу рН та осмолярності під час різних експериментальних процедур, включаючи обробку тканин та культивування клітин. Наш буферний розчин PBS ретельно розроблений з використанням високочистих інгредієнтів для забезпечення стабільності та надійності в кожному експерименті. Осмолярність та концентрація іонів нашого PBS наближені до людського організму, що робить його ізотонічним та нетоксичним для більшості клітин.

Склад нашого розчину PBS
Наш розчин PBS
- це відрегульована за рівнем рН суміш фосфатних буферів надвисокої чистоти та фізіологічних розчинів. У 1-кратній робочій концентрації він містить

8000 мг/л хлориду натрію (NaCl)
200 мг/л хлориду калію (KCl)
1150 мг/л фосфат натрію двоосновний безводний (Na2HPO4)
200 мг/л фосфат калію одноосновний безводний (KH2PO4)

Цей склад забезпечує оптимальний рН та іонний баланс, що підходить для широкого спектру біологічних застосувань.

Застосування нашого розчину PBS
Наш розчин PBS ідеально підходить для різних застосувань у біологічних дослідженнях. Його ізотонічні та нетоксичні властивості роблять його придатним для розведення речовин і промивання клітинних контейнерів. Розчини PBS, що містять ЕДТА, ефективні для видалення прикріплених і злиплих клітин. Однак не слід додавати до PBS двовалентні метали, такі як цинк, оскільки це може призвести до випадання осаду. У таких випадках рекомендується використовувати буфери Good's. Крім того, наш розчин PBS є прийнятною альтернативою вірусному транспортному середовищу для транспортування та зберігання РНК-вірусів, включаючи SARS-CoV-2.

Контроль якості

Стерильно відфільтрований


Зберігання та термін придатності

Зберігати при температурі від +2°C до +25°C, в захищеному від світла місці.
Після відкриття зберігати при температурі від 2°C до 25°C і використати протягом 24 місяців.


Умови транспортування

Температура навколишнього середовища


Обслуговування

Зберігати в холодильнику при температурі від +2°C до +8°C у темряві. Уникайте заморожування та частого нагрівання до +37°C, оскільки це знижує якість продукту.
Не нагрівайте середовище вище 37°C і не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі.
Якщо потрібно використати лише частину засобу, відберіть необхідну кількість і підігрійте його до кімнатної температури перед застосуванням.

Склад



Категорія
Компоненти
Концентрація (мг/л)


Солі
Калій хлористий
200



Калій фосфат одноосновний безводний
200



Натрій хлористий
8000



Натрій фосфат двоосновний безводний
1150

Організм	Людина
Тканина	Груди
Хвороба	Аденокарцинома

Організм	Людина
Тканина	Груди
Хвороба	Аденокарцинома