RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3
Середовище RPMI 1640, також відоме як середовище RPMI, - це універсальне середовище для культивування клітин, яке широко використовується в біологічних дослідженнях для культивування різних клітин ссавців. Розроблене Джорджем Е. Муром, Робертом Е. Гернером та Х. Еддісоном Франкліном у 1966 році у відомому онкологічному центрі Розуелл-Парк, це середовище отримало свою назву завдяки тому, що його було створено в Меморіальному інституті Розуелл-Парк (RPMI).
Спочатку розроблене для підтримки росту лейкемічних клітин людини як у суспензійних, так і в моношарових культурах, середовище RPMI 1640 еволюціонувало завдяки модифікаціям дослідників і комерційних постачальників і стало придатним для широкого спектру клітин ссавців. Воно винятково сумісне з такими клітинними лініями, як HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, астроцитами та карциномами.
Середовище RPMI 1640 відрізняється від інших середовищ для культивування клітин завдяки своєму унікальному складу. Воно містить значну кількість фосфатів, амінокислот та вітамінів. Зокрема, до його складу входять біотин, вітамін В12 і ПАБК, які відсутні в мінімально необхідному середовищі Eagle або модифікованому середовищі Dulbecco. Крім того, середовище RPMI 1640 містить значно підвищену концентрацію вітамінів інозитолу та холіну. Однак воно не містить білків, ліпідів або факторів росту. Тому для забезпечення оптимальних умов для росту клітин зазвичай необхідне додавання 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS).
Буферна система середовища RPMI 1640 заснована на бікарбонаті натрію і потребує 5-10% CO2 для підтримання фізіологічного рівня рН. Включення відновника глутатіону ще більше відрізняє це середовище від інших.
Контроль якості
- Стерильно відфільтроване
Зберігання та термін придатності
- Зберігати при температурі від +2°C до +8°C, в захищеному від світла місці.
- Після відкриття зберігати при 4°C і використати протягом 6-8 тижнів.
Умови транспортування
- Температура навколишнього середовища
Обслуговування
- Зберігати в холодильнику при температурі від +2°C до +8°C у темряві. Уникайте заморожування та частого нагрівання до +37°C, оскільки це знижує якість продукту.
- Не нагрівайте середовище вище 37°C і не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі.
- Якщо потрібно використати лише частину засобу, відберіть необхідну кількість і підігрійте його до кімнатної температури перед застосуванням.
Склад
| Категорія | Компоненти | Концентрація (мг/л) |
| Амінокислоти | Гліцин | 10.00 |
| L-аланіл-L-глутамін | 434.40 | |
| L-аргінін | 200.00 | |
| L-аспарагін H2O | 56.82 | |
| L-аспарагінова кислота | 20.00 | |
| L-цистин 2HCl | 65.20 | |
| L-глутамінова кислота | 20.00 | |
| L-гістидин HCl H2O | 20.27 | |
| L-гідрокси-L-пролін | 20.00 | |
| L-ізолейцин | 50.00 | |
| L-лейцин | 50.00 | |
| L-лізин HCl | 40.00 | |
| L-метіонін | 15.00 | |
| L-фенілаланін | 15.00 | |
| L-пролін | 20.00 | |
| L-серин | 30.00 | |
| L-треонін | 20.00 | |
| L-триптофан | 5.00 | |
| L-тирозин 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-валін | 20.00 | |
| Вітаміни | p-Амінобензойна кислота | 1.00 |
| D-біотин | 0.20 | |
| Холіну хлорид | 3.00 | |
| D-Кальцію пантотенат | 0.25 | |
| Фолієва кислота | 1.00 | |
| міо-інозитол | 35.00 | |
| Нікотинамід | 1.00 | |
| Піридоксин HCl | 1.00 | |
| Рибофлавін | 0.20 | |
| Тіамін HCl | 1.00 | |
| Вітамін B12 | 0.005 | |
| Неорганічні солі | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Інші компоненти | D-глюкоза | 2000.00 |
| L-глутатіон відновлений | 1.00 | |
| Фенол червоний натрієва сіль | 5.30 |