Клетки HEK293-FAP

5 000,00 €*

Продуктите се доставят замразени в сух лед в криоепруви. Всяка криоепрува обикновено съдържа 3 × 10 ⁶ клетки за адхезивни линии или 5 × 10⁶ клетки за суспензионни линии (за подробности вижте сертификата за анализ на партидата).

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305419

Информационен лист за безопасност

Продуктов лист

Споразумение с трета страна

Описание	Отказ от отговорност: Цените, показани за клетъчни линии, са предназначени изключително за клиенти с нестопанска цел. Ако представлявате търговска организация, моля, свържете се с нас за алтернативни цени. Клетъчната линия HEK293-FAP е стабилна рекомбинантна клетъчна линия HEK293, създадена да експресира протеина за активиране на фибробласти (FAP) на високо ниво, приблизително 123 000 молекули на клетка. Тази клетъчна линия е разработена с помощта на технологията на inscreenex "landing pad", която осигурява прецизно и възпроизводимо интегриране на гена FAP в специфичен, предварително валидиран геномен локус. FAP, известен също като Seprase или DPPIV, е серинова протеаза, участваща в ремоделирането на извънклетъчния матрикс, което е особено важно в процеси като заздравяване на рани, възстановяване на тъкани и фиброза. FAP също така е силно регулиран в стромата на много епителни ракови заболявания, което го прави ценна цел за онкологични изследвания и потенциален биомаркер за фибробласти, свързани с рака. Експресията на FAP в тази клетъчна линия е потвърдена с помощта на поточна цитометрия с таргетно-специфично антитяло, което гарантира последователна и надеждна рецепторна плътност в цялата клетъчна популация.
Организъм	Човек
Тъкан	Фетален бъбрек

Възраст	Плод
Пол	Жена
Морфология	Подобни на епител
Свойства на растежа	Монослой, прилепнал

Цитиране	HEK293-FAP (каталожен номер 305419 на Cytion)
Ниво на биобезопасност	1
NCBI_TaxID	9606
Статус на ГМО	GMO-S1: Това производно на HEK293 съдържа конструкция за експресия на протеин за активиране на фибробласти (FAP) за изследване на рецепторната функция. Тази класификация се прилага само в Германия и може да се различава в други страни.

Изразени рецептори	FAP (Seprase или DPPIV)

Среда за култивиране	RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Добавки	Допълнете средата с 10% FBS, 1 mM натриев пируват, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 1 mg/ml.
Реагент за дисоциация	Трипсин-EDTA
Субкултивиране	За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C, докато клетките се отделят (5-10 минути). Наблюдавайте отделянето под микроскоп и при необходимост леко потупайте съда, за да освободите клетките. След като се отделят, добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %_CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Подновяване на флуидите	2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване	След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се слепнат за поне 24 часа. За най-добро прикрепване и жизнеспособност след размразяване на клетките препоръчваме да се използват колби или плаки с колагеново покритие за първоначалното посяване след криовъзстановяването. Колагеновото покритие не е необходимо за последващо рутинно култивиране на клетките.
Средство за замразяване	Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Размразяване и култивиране на клетките	Уверете се, че флаконът остава дълбоко замразен при доставката, тъй като клетките се транспортират със сух лед, за да се поддържат оптимални температури по време на транспортирането. При получаване или съхранявайте незабавно криовиолата при температури под -150 °C, за да осигурите запазване на клетъчната цялост, или преминете към стъпка 3, ако е необходимо незабавно култивиране. За незабавно култивиране бързо размразете флакона, като го потопите във водна баня с чиста вода и антимикробен агент с температура 37 °C, като разбърквате внимателно в продължение на 40-60 секунди, докато остане малка ледена бучка. Извършвайте всички следващи стъпки при стерилни условия в аспиратор, като преди отваряне дезинфекцирате криовиолата със 70% етанол. Внимателно отворете дезинфекцирания флакон и прехвърлете клетъчната суспензия в 15 ml центрофужна епруветка, съдържаща 8 ml хранителна среда със стайна температура, като разбъркате внимателно. Центрофугирайте сместа при 300 x g в продължение на 3 минути, за да отделите клетките, и внимателно изхвърлете супернатантата, съдържаща остатъчна замразяваща среда. Внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета в 10 ml прясна хранителна среда. За адхезивни клетки разделете суспензията между две колби Т25; за суспензионни култури прехвърлете цялата среда в една колба Т25, за да стимулирате ефективното взаимодействие и растеж на клетките. Придържайте се към установените протоколи за субкултивиране за непрекъснат растеж и поддържане на клетъчната линия, като гарантирате надеждни експериментални резултати.
Инкубационна атмосфера	37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.
Покритие на колбата	За оптимално прикрепване и жизнеспособност след размразяване препоръчваме да се използват колби или плаки с колагеново покритие.
Процедура за замразяване	Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед във валидирана, изолирана опаковка с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
Условия за доставка	Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед във валидирана, изолирана опаковка с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
Условия за съхранение	За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Стерилност	Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма. За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Моля, обърнете внимание, че тази клетъчна линия не е достъпна в рамките на стандартната MTA на Cytion, тъй като изисква споразумение с трета страна и/или е предмет на преговори с първоначалния лицензодател.

Необходими продукти

Необходими продукти

Среда за замразяване CM-1 - 50 ml

Варианти на средата за криоконсервация: 50 мл

Средата за замразяване CM-1 на Cytion е най-съвременна среда за криоконсервация, предназначена да осигури най-високо ниво на жизнеспособност и функционалност на клетките след размразяване. Тази универсална среда е подходяща за широк спектър от клетъчни типове, включително човешки и животински клетки, което я прави основен инструмент за различни изследователски приложения. Формулирана с внимателно балансирана комбинация от криопротектори и основни хранителни вещества, средата за замразяване CM-1 свежда до минимум образуването на ледени кристали и клетъчния стрес по време на процеса на замразяване, като по този начин запазва клетъчната цялост.
Основните характеристики на Freeze Medium CM-1 включват:

Широка съвместимост: Ефективна за широк спектър от клетъчни типове, включително първични клетки, стволови клетки и установени клетъчни линии.
Висока жизнеспособност: Оптимизирана за максимално възстановяване на клетките след размразяването им и тяхната жизнеспособност, което гарантира надеждни експериментални резултати.
Готов за употреба: Удобно подготвени и стерилизирани за незабавно приложение, което намалява времето за подготовка и риска от замърсяване.
Повишена стабилност: Поддържа постоянна производителност при стандартни условия на криоконсервация, като осигурява възпроизводими резултати.
Дълъг срок на съхранение: CM-1 е готова за употреба среда за криоконсервация, съдържаща серум, която може да се съхранява в хладилник до една година.

Използване на CM-1 за замразяване на клетки

За да използвате CM-1 за замразяване на адхезивни и суспензионни клетки, следвайте следните стъпки

За адхерентни клетки ги измийте и ги отделете от субстрата за култивиране. За суспензионни клетки преминете директно към следващата стъпка.
Пребройте клетките, за да се уверите, че те са с подходяща концентрация.
Центрофугирайте клетките, за да ги пелетирате, след което ги ресуспендирайте в среда за замразяване CM-1.
Прехвърлете ресуспендираните клетки в криовиали.
Използвайте метод за бавно замразяване, преди да прехвърлите клетките за дългосрочно съхранение

Метод
Описание
Стъпки

❄️
Ръчно замразяване

Метод, включващ постепенно намаляване на температурата, за да се осигури жизнеспособността на клетките

1️⃣ Поставете клетките в среда за замразяване във фризер с температура 4 °C за 40 минути.
2️⃣ Прехвърлете във фризер с температура -80°C за 24 часа.
3️⃣ Съхранявайте клетките в течен азот за дългосрочно запазване

❄️
Използване на Mr. Frosty

Удобно устройство, което позволява контролирана скорост на замразяване без електрическо захранване

1️⃣ Подгответе клетките в криовиали със замразяваща среда.
2️⃣ Поставете криовиолите в контейнера на Mr. Frosty.
3️⃣ Съхранявайте при -80 °C за 24 часа, преди да прехвърлите в течен азот

❄️
Фризер с контролирана скорост

Високопрецизен фризер на Thermo Fisher или на други производители, предназначен за контролирано намаляване на температурата

1️⃣ Програмирайте устройството за постепенно намаляване на температурата.
2️⃣ Поставете подготвените клетки във фризера.
3️⃣ След цикъла на замразяване прехвърлете клетките в течен азот

Съхранявайте криовиолите при температури под -130 °C или в течен азот за дългосрочно съхранение.

Съставки

Съдържа FBS, DMSO, глюкоза, соли
Буфериращ капацитет: pH = 7,2 до 7,6

Средата за замразяване CM-1 на Cytion предлага надеждно решение за криоконсервация, като осигурява висока клетъчна жизнеспособност и функционалност след размразяване за широк спектър от изследователски приложения.

59,00 €*

RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3

Средата RPMI 1640, известна също като среда RPMI, е многофункционална среда за клетъчни култури, широко използвана в биологичните изследвания за култивиране на различни клетки от бозайници. Разработена от Джордж Е. Мур, Робърт Е. Гернер и Х. Адисън Франклин през 1966 г. в известния Комплексен център за ракови заболявания в Розуел Парк, тази среда получава името си от произхода си в Мемориалния институт в Розуел Парк (RPMI).
Първоначално създадена за поддържане на растежа на човешки левкемични клетки в суспензионни и монослойни култури, средата RPMI 1640 еволюира чрез модификации от изследователи и търговски доставчици, за да стане подходяща за разнообразни клетки на бозайници. Тя е изключително съвместима с клетъчни линии като HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, астроцити и карциноми.
Средата RPMI 1640 се отличава от другите среди за клетъчни култури поради уникалния си състав. Тя съдържа значително количество фосфати, аминокиселини и витамини. По-специално, тя включва биотин, витамин В12 и PABA, които отсъстват в Eagle's Minimal Essential Medium или Dulbecco's Modified Eagle Medium. Освен това средата RPMI 1640 показва значително повишени концентрации на витамините инозитол и холин. Тя обаче не съдържа протеини, липиди или растежни фактори. Поради това обикновено се налага добавяне на 10% фетален говежди серум (FBS), за да се осигурят оптимални условия за клетъчен растеж.
Буферната система на средата RPMI 1640 разчита на натриев бикарбонат и изисква 5-10% CO2 среда, за да се поддържа физиологично подходящо pH. Включването на редуциращия агент глутатион допълнително отличава тази среда от останалите.
Контрол на качеството

Стерилно филтрирани

Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +8°C, защитена от светлина.
След отваряне съхранявайте при 4°C и използвайте в рамките на 6-8 седмици.

Условия за транспортиране

Температура на околната среда

Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.

Състав

Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)

Аминокиселини
Глицин
10.00

L-аланил-L-глутамин
434.40

L-аргинин
200.00

L-аспарагинH2O
56.82

L-аспарагинова киселина
20.00

L-цистин 2HCl
65.20

L-глутаминова киселина
20.00

L-Histidine HClH2O
20.27

L-хидрокси-L-пролин
20.00

L-изолевцин
50.00

L-Leucine
50.00

L-лизин HCl
40.00

L-метионин
15.00

L-фенилаланин
15.00

L-пролин
20.00

L-серин
30.00

L-Threonine
20.00

L-триптофан
5.00

L-тирозин 2Na 2H2O
28.83

L-Valine
20.00

Витамини
р-аминобензоена киселина
1.00

D-биотин
0.20

Холин хлорид
3.00

D-калциев пантотенат
0.25

Фолиева киселина
1.00

мио-Инозитол
35.00

Никотинамид
1.00

Пиридоксин HCl
1.00

Рибофлавин
0.20

Тиамин HCl
1.00

Витамин В12
0.005

Неорганични соли
Ca(NO3)2 4H2O
100.00

KCl
400.00

MgSO4 7H2O
100.00

NaCl
6000.00

NaHCO3
2000.00

Na2HPO4
800.00

Други компоненти
D-глюкоза
2000.00

L-глутатион, редуциран
1.00

Фенол червено натриева сол
5.30

25,00 €*

Accutase

Варианти: 100 ml

Реагент за клетъчна дисоциация Accutase
- щадяща алтернатива на трипсина
Accutase е разтвор за отделяне на клетки, който прави революция в производството на клетъчни култури. Това е смес от протеолитични и колагенолитични ензими, която имитира действието на трипсин и колагеназа. За разлика от трипсина Accutase не съдържа никакви бозайнически или бактериални компоненти и е много по-щадящ за клетките, което го прави идеално решение за рутинно отделяне на клетки от стандартни пластмасови съдове за тъканни култури и пластмасови съдове с адхезионно покритие. В тази публикация в блога ще разгледаме ползите и приложенията на Accutase и как тя променя правилата на играта в клетъчните култури.
Предимства на Accutase
Accutase има няколко предимства пред традиционните разтвори на трипсин. Първо, тя може да се използва винаги, когато е необходимо нежно и ефикасно отделяне на всяка адхезивна клетъчна линия, което я прави директен заместител на трипсина. Второ, Accutase работи изключително добре с ембрионални и невронни стволови клетки и е доказано, че запазва жизнеспособността на тези клетки след пасиране. Трето, Accutase запазва повечето епитопи за последващ анализ с поточна цитометрия, което я прави идеална за анализ на маркери на клетъчната повърхност.
Освен това Accutase не трябва да се неутрализира при пасиране на адхерентни клетки. Добавянето на повече среда след разделянето на клетките разрежда Accutase, така че тя вече не е в състояние да отдели клетките. Това елиминира нуждата от стъпка за инактивиране и спестява време на техниците, занимаващи се с клетъчни култури. И накрая, не е необходимо Accutase да се аликвотира, а една бутилка е стабилна в хладилника в продължение на 2 месеца.
Приложения на Accutase
Accutase е директен заместител на разтвора на трипсин и може да се използва за пасиране на клетъчни линии. Освен това Accutase се представя добре при отделяне на клетки за анализ на много маркери на клетъчната повърхност с помощта на поточна цитометрия и за сортиране на клетки. Други приложения надолу по веригата на обработка с Accutase включват анализ на маркери на клетъчната повърхност, анализ на растежа на вируси, клетъчна пролиферация, анализи на миграцията на туморни клетки, рутинно пасиране на клетки, увеличаване на производството (биореактор) и поточна цитометрия.
Състав на Accutase
Accutase не съдържа компоненти от бозайници или бактерии и представлява естествена ензимна смес с протеолитична и колагенолитична ензимна активност. Тя е формулирана в много по-ниска концентрация от трипсина и колагеназата, което я прави по-малко токсична и по-нежна, но също толкова ефективна.
Ефективност на Accutase
Доказано е, че Accutase е ефективна при отделянето на първични и стволови клетки и поддържането на висока клетъчна жизнеспособност в сравнение с ензими от животински произход, като трипсин. 100 % от клетките се възстановяват след 10 минути и няма вреда от оставянето на клетките в Accutase до 45 минути, благодарение на авторазграждането на Accutase.
В обобщение
В заключение, Accutase е мощно решение, което променя правилата на играта в клетъчните култури. Със своята щадяща природа, ефективност и гъвкавост Accutase е идеалната алтернатива на трипсина. Ако търсите надеждно и ефикасно решение за отделяне на клетки, Accutase е решението за вас.

75,00 €*

Антибиотичен/антимикотичен разтвор (100x)

Преглед на продукта
Обем: 100 ml Съхранение: ≤-15°C Стерилност: Стерилно филтриран
Антибиотик/антимикотичен разтвор (100x ) е стерилен, готов за употреба концентрат, предназначен за намаляване на рисковете от микробно замърсяване в клетъчни култури и свързани с тях лабораторни приложения. Този разтвор 100x съдържа утвърдена комбинация от пеницилин, стрептомицин и амфотерицин В
- осигуряваща широк спектър на антимикробна активност срещу грам-положителни и грам-отрицателни бактерии, дрожди и нишковидни гъбички. Формулата е подходяща за използване в еукариотни клетъчни култури, бактериални среди и други чувствителни към замърсяване системи, като подпомага чистите и последователни лабораторни операции.
Приложение и предимства Оптимизиран за рутинни изследователски протоколи, този разтвор се използва широко за поддържане на асептични условия в работните процеси на клетъчни култури. То предлага надеждна работа в чувствителни към замърсяване среди, като помага на изследователите да намалят риска от свръхрастеж на микроорганизми, без да се компрометира здравето на клетките или възпроизводимостта на експериментите. Стерилно-филтрираният състав елиминира необходимостта от допълнителни етапи на разтваряне, като подпомага рационализираното приготвяне на среди и намалява променливостта в ежедневните лабораторни процедури.
Употреба и съвместимост За да постигнете стандартни работни концентрации, разредете разтвора в съотношение 1:100 в пълна хранителна среда. Продуктът е съвместим с широк спектър от клетъчни линии на бозайници и базови среди. С постоянната наличност на склад изследователите се възползват от надеждна непрекъснатост на доставките и опростено логистично планиране. За да се запази стабилността, разтворът трябва да се съхранява при ≤ -15 °C и да се предпазва от многократни цикли на замразяване и размразяване. Само за изследователска употреба. Не е предназначен за използване в диагностични или терапевтични процедури. Не е предназначен за употреба при хора или животни.

45,00 €*

PBS

Разтвор на фосфатно-буфериран физиологичен разтвор (PBS)
Фосфатно-буферираният физиологичен разтвор (PBS) е широко използван буферен разтвор в биологичните и химичните изследвания. Той играе решаваща роля за поддържане на pH баланса и осмоларността по време на различни експериментални процедури, включително обработка на тъкани и клетъчни култури. Нашият разтвор на PBS е щателно формулиран с висококачествени съставки, за да се гарантира стабилност и надеждност при всеки експеримент. Осмоларността и концентрацията на йони в нашия разтвор PBS са близки до тези в човешкото тяло, което го прави изотоничен и нетоксичен за повечето клетки.

Състав на нашия разтвор на PBS
Нашият разтвор на PBS е смес от свръхчисти фосфатни буфери и физиологични разтвори с коригирано pH. В работна концентрация 1Х той съдържа:

8000 mg/L Натриев хлорид (NaCl)
200 mg/L Калиев хлорид (KCl)
1150 mg/L Натриев фосфат двуосновен безводен (Na2HPO4)
200 mg/L Калиев фосфат монобазичен безводен (KH2PO4)

Този състав осигурява оптимално рН и йонно равновесие, подходящи за широк спектър от биологични приложения.

Приложения на нашия разтвор на PBS
Нашият разтвор на PBS е идеален за различни приложения в биологичните изследвания. Неговите изотонични и нетоксични свойства го правят подходящ за разреждане на вещества и за изплакване на клетъчни контейнери. Разтворите PBS, съдържащи EDTA, са ефективни за отделяне на прикрепени и слепени клетки. Въпреки това към PBS не трябва да се добавят двувалентни метали, като например цинк, тъй като това може да доведе до утаяване. В такива случаи се препоръчват буферите на Good's. Освен това нашият разтвор на PBS е приемлива алтернатива на вирусната транспортна среда за транспортиране и съхранение на РНК вируси, включително SARS-CoV-2.

Контрол на качеството

Стерилно филтриран

Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +25°C, защитени от светлина.
След отваряне съхранявайте при 2°C до 25°C и използвайте в рамките на 24 месеца.

Условия за транспортиране

Температура на околната среда

Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.

Състав

Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)

Соли
Калиев хлорид
200

Калиев фосфат монобазичен безводен
200

Натриев хлорид
8000

Натриев фосфат двуосновен безводен
1150

20,00 €*