Среда 199, w: 2,7 mM стабилен глутамин, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Среда 199 е универсална и широко използвана среда за клетъчни култури, специално разработена за култивиране на първични експланти. Тази всеобхватна среда съчетава основни витамини, аминокиселини и други фактори, за да осигури напълно определен хранителен източник за различни видове клетки. Тя е особено подходяща за нетрансформирани клетки, което я прави безценен инструмент за биологични изследвания.
Среда 199 предлага редица приложения в областта. Тя може ефективно да поддържа комплекса кумулус-оцит (COC) и да подпомага ин витро съзряването на яйцеклетки. Освен това тя се използва при промиване на аспирационни линии по време на събиране на яйцеклетки от немски крави от породата Холщайн. Освен това среда 199 служи като отлична среда за култивиране на сърдечни ендотелни клетки, получени от плъхове. Тези приложения демонстрират гъвкавостта и приспособимостта на среда 199 към различни експериментални нужди.
История
Разработването на среда 199 през 50-те години на миналия век бележи значителен напредък в областта на средите за тъканни култури. Преди нейното въвеждане много среди за култивиране са разчитали на продукти от животински произход и тъканни екстракти. Морган и колегите му обаче правят революция в тази област, като формулират напълно определен хранителен източник за клетъчни култури. Чрез своите експерименти, включващи различни комбинации от витамини, аминокиселини и други фактори, те откриват изключителните свойства на среда 199, стимулираща растежа.
Контрол на качеството
- pH = 7,2 +/- 0,02 при 20-25°C.
- Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии.
Поддръжка
- Съхранявайте в хладилник на тъмно при температура от +2°C до +8°C. Замразяването и затоплянето до +37°С намаляват до минимум качеството на продукта.
- Не нагрявайте средата до повече от 37°С и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (напр. микровълнови уреди).
- Ако трябва да се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го загрейте на стайна температура.
- Срокът на годност на всяка среда, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство.
Състав
| Компоненти | mg/L | |
| Неорганични соли | Калциев хлорид x 2H2O | 264,92 |
| Железен (III) нитрат x 9H2O | 0,72 | |
| Магнезиев сулфат | 97,67 | |
| Калиев хлорид | 400,00 | |
| Натриев ацетат x 3H2O | 82,95 | |
| Натриев хлорид | 6,800.00 | |
| Натриев дихидрогенфосфат x H2O | 140,00 | |
| Други компоненти | Аденин сулфат | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Холестерол | 0,20 | |
| 2'-дезоксирибоза | 0,50 | |
| D(+)-глюкоза, безводна | 1,000.00 | |
| Глутатион (червен) | 0,05 | |
| Гуанин х HCl | 0,30 | |
| Хипоксантин | 0,30 | |
| Фенол червено | 10,00 | |
| D-рибоза | 0,50 | |
| Тимин | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Урацил | 0,30 | |
| Ксантин | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Аминокиселини | L-аланин | 25,00 |
| L-аргинин x HCl | 70,00 | |
| L-аспарагинова киселина | 30,00 | |
| L-цистеин x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-цистин | 20,00 | |
| Стабилен L-глутамин | 149,00 | |
| L-глутаминова киселина | 67,00 | |
| Глицин | 50,00 | |
| L-хистидин x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-хидроксипролин | 10,00 | |
| L-изолевцин | 20,00 | |
| L-Leucine | 60,00 | |
| L-лизин x HCl | 70,00 | |
| L-метионин | 15,00 | |
| L-фенилаланин | 25,00 | |
| L-пролин | 40,00 | |
| L-серин | 25,00 | |
| L-треонин | 30,00 | |
| L-триптофан | 10,00 | |
| L-тирозин | 40,00 | |
| L-валин | 25,00 | |
| Витамини | 4-аминобензоена киселина | 0,05 |
| Аскорбинова киселина | 0,05 | |
| D(+)-Биотин | 0,01 | |
| Калциферол | 0,10 | |
| D-калциев пантотенат | 0,01 | |
| Холин хлорид | 0,50 | |
| Фолиева киселина | 0,01 | |
| мио-Инозитол | 0,05 | |
| Менадион | 0,01 | |
| Никотинова киселина | 0.025 | |
| Никотинамид | 0.025 | |
| Пиридоксал х HCl | 0.025 | |
| Пиридоксол х HCl | 0.025 | |
| Рибофлавин | 0,01 | |
| DL-α-токоферол фосфат динатриева сол | 0,01 | |
| Тиамин х HCl | 0,01 | |
| Витамин А ацетат | 0,14 |