Среда McCoys 5A (модифицирана), w: 3,0 g/L глюкоза, w: стабилен глутамин, w: 2,0 mM натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium е силно препоръчителна и специализирана среда, предназначена да улесни растежа и репликацията на вируси в първични клетъчни култури. Тя е спечелила значително признание за изключителната си ефективност в различни биологични изследователски приложения.
Едно от най-известните приложения на McCoy's 5A Medium е използването му в култивирането на клетъчни линии от човешки колоректален карцином. По-специално, тя е била използвана в проучването на G-протеин-свързан рецептор, съдържащ богати на левцин повторения (LGR5), и неговата роля в метастазирането на колоректалния карцином. Тази среда е била ефективно използвана в култивирането на няколко клетъчни линии на колоректален карцином, включително HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b и TENN, което позволява на изследователите да се задълбочат в механизмите, лежащи в основата на метастазирането на колоректалния карцином.
В допълнение към приложението си в изследванията на рака, средата McCoy's 5A се е доказала като незаменима в изследването на остеобластите. Изследователи, изучаващи йонната реактивност на хидроксиапатита с калциев дефицит в стандартни среди за клетъчна култура, са използвали тази среда за култивиране на остеобласти. Това приложение е улеснило по-доброто разбиране на взаимодействията между остеобластите и хидроксиапатита с калциев дефицит, допринасяйки за напредъка в областта на изследванията на костите.
Средата McCoy's 5A е внимателно формулирана чрез модифициране на аминокиселините, съдържащи се в Basal Medium Eagle, за да осигури оптимална подкрепа за туморните клетки на черния дроб. Тази обогатена формула я прави подходяща за широка гама от установени клетъчни линии, както и за първични клетки, което допълнително повишава нейната гъвкавост и приложимост в различни изследователски условия.
McCoy's 5A Medium разширява своите биохимични и физиологични ефекти отвъд туморните клетки на черния дроб. Тя е била успешно използвана за подпомагане на растежа в първични култури на костен мозък, кожа, венци, бъбреци, омент, надбъбречни жлези, бели дробове, далак, ембриони на плъхове и други видове клетки. Този широк спектър от приложения доказва широката полезност на McCoy's 5A Medium за подпомагане на растежа и поддържането на различни видове клетки за всеобхватни биологични изследвания.
Формула
Тази среда McCoy's 5A (модифицирана) съдържа 3,0 g/L глюкоза, стабилен глутамин, 2,0 mM натриев пируват и 2,2 g/L NaHCO3.
Контрол на качеството
- pH = 7,2 +/- 0,02 при 20-25 °C.
- Всяка партида е тествана за стерилност и отсъствие на микоплазма и бактерии.
Съхранение
- Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно място. Замразяването и затоплянето до +37°C намаляват качеството на продукта.
- Не загрявайте средата до повече от 37°C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (например микровълнови уреди).
- Ако ще се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го затоплете до стайна температура.
- Срокът на годност за всички среди, с изключение на основната среда, е 6 до 8 седмици от датата на отваряне.
Състав
| Съставки | mg/L | |
| Неорганични соли | Калциев хлорид x 2H2O | 132,00 |
| Магнезиев сулфат | 97,67 | |
| Калиев хлорид | 400 | |
| Натриев хлорид | 6460 | |
| Динатриев хидроген фосфат (безводен) | 504 | |
| Други компоненти | D(+)-глюкоза (безводен) | 3 000 |
| Глутатион (редуциран) | 0 | |
| Месен пептон | 600 | |
| Фенол червена натриева сол | 11 | |
| Аминокиселини | L-аланин | 13 |
| L-аргинин x HCl | 42,14 | |
| L-аспарагин x H2O | 45,03 | |
| L-аспарагинова киселина | 19,97 | |
| L-цистеин x HCl x H2O | 31,75 | |
| L-глутамин (стабилен) | 219,15 | |
| L-глутаминова киселина | 22 | |
| Глицин | 7 | |
| L-хистидин x HCl x H2O | 20,96 | |
| L-хидроксипролин | 19,67 | |
| L-изолевцин | 39,3 | |
| L-левцин | 39,36 | |
| L-лизин x HCl | 36,54 | |
| L-метионин | 14,92 | |
| L-фенилаланин | 16,52 | |
| L-пролин | 17,27 | |
| L-серин | 26,28 | |
| L-треонин | 17,87 | |
| L-триптофан | 3,06 | |
| L-тирозин динатриева сол | 26,10 | |
| L-валин | 17,57 | |
| Витамини | p-Аминобензоена киселина | 1 |
| Аскорбинова киселина | 0,56 | |
| D(+)-Биотин | 0,20 | |
| D-калциев пантотенат | 0,20 | |
| Холин хлорид | 5 | |
| Фолиева киселина | 10 | |
| Мио-инозитол | 36 | |
| Никотинамид | 0 | |
| Никотинова киселина | 0,5 | |
| Пиридоксал HCl | 0,5 | |
| Пиридоксин HCl | 0,50 | |
| Рибофлавин | 0,20 | |
| Тиамин HCl | 0 | |
| Витамин В12 | 2 |