DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 on laajalti tunnustettu ja laajalti käytetty soluviljelyn perusmedia biologisessa tutkimuksessa. Se toimii perustavanlaatuisena ravintoaineiden lähteenä erilaisten nisäkässolulinjojen kasvulle, erityisesti silloin, kun sitä täydennetään Fetal Bovine Serumilla (FBS).
Tässä ainutlaatuisessa koostumuksessa yhdistyvät Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ja Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) tarkassa suhteessa 1:1. L-glutamiinin lisääminen parantaa sen koostumusta entisestään.
DMEM, joka on johdettu EMEM:stä (Eagle's Minimal Essential Medium), tarjoaa suuremman aminohappo- ja vitamiinipitoisuuden kuin edeltäjänsä. Sen sijaan Ham's F-12 perustuu Ham's F-10 -mediumiin, ja se tarjoaa täydentävän joukon välttämättömiä komponentteja.
Solujen optimaalisen kasvun tukemiseksi on yleinen käytäntö täydentää DMEM:Ham's F12:ta FBS:llä, jonka tyypillinen pitoisuus on 5-10 %. Tämä lisäys on välttämätön, koska väliaineesta puuttuvat kasvuhormonit, lipidit ja proteiinit, jotka ovat ratkaisevia solujen kehitykselle.
DMEM:Ham's F12 sisältää pH-puskurijärjestelmän, ja sitä täydennetään usein pH-indikaattorilla, fenolipunalla. DMEM:Ham's F12:ssa tai missä tahansa bikarbonaattipuskurijärjestelmää käyttävässä elatusaineessa viljellyt solut tarvitsevat 5-10 %:n hiilidioksidipitoisuuden, jotta pH-tasot pysyvät sopivina.
Laadunvalvonta
- Steriilisuodatettu
Varastointi ja säilyvyys
- Säilytetään +2°C - +8°C:ssa valolta suojattuna.
- Kun avattu, säilytetään 4°C:ssa ja käytetään 6-8 viikon kuluessa.
Toimitusolosuhteet
- Ympäristön lämpötila
Huolto
- Säilytettävä jääkaapissa +2°C - +8°C:ssa pimeässä. Vältä pakastamista ja usein tapahtuvaa lämmittämistä +37°C:seen, koska se heikentää tuotteen laatua.
- Älä lämmitä väliaineen lämpötilaa yli 37°C äläkä käytä kontrolloimattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltolaitteita.
- Jos väliaineesta käytetään vain osa, poista tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpöiseksi ennen käyttöä.
Koostumus
| Luokka | Ainesosat | Pitoisuus (mg/l) |
| Aminohapot | Glysiini | 18.75 |
| L-alaniini | 4.45 | |
| L-arginiini HCl | 147.50 | |
| L-asparagiini H₂O | 7.50 | |
| L-asparagiinihappo | 6.65 | |
| L-kysteiini HCl H₂O | 17.56 | |
| L-kystiini 2 HCl | 31.29 | |
| L-glutamiinihappo | 7.35 | |
| L-Glutamiini | 365.00 | |
| L-histidiini HCl H₂O | 31.48 | |
| L-isoleusiini | 54.47 | |
| L-leusiini | 59.05 | |
| L-lysiini HCl | 91.25 | |
| L-metioniini | 17.24 | |
| L-Fenyylialaniini | 35.48 | |
| L-proliini | 17.25 | |
| L-Seriini | 26.25 | |
| L-treoniini | 53.45 | |
| L-tryptofaani | 9.02 | |
| L-tyrosiinin dinatriumsuola | 48.10 | |
| L-valiini | 52.85 | |
| Vitamiinit | D-Biotiini | 0.0035 |
| Koliinikloridi | 8.98 | |
| D-kalsiumpantotenaatti | 2.24 | |
| Foolihappo | 2.66 | |
| myo-Inositoli | 12.60 | |
| Nikotiiniamidi | 2.02 | |
| Pyridoksiini HCl | 0.031 | |
| Pyridoksaali-HKl | 2.00 | |
| Riboflaviini | 0.219 | |
| Tiamiini HCl | 2.17 | |
| B12-vitamiini | 0.68 | |
| Epäorgaaniset suolat | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Muut komponentit | D-glukoosi | 3151.00 |
| Hypoksantiini | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolihappo | 0.042 | |
| Lipoiinihappo | 0.105 | |
| Fenolipunainen natriumsuola | 8.63 | |
| Putressiini 2 HCl | 0.081 | |
| Natriumpyruvaatti | 55.00 | |
| Tymidiini | 0.365 |