DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) on erittäin monipuolinen ja laajalti käytetty perusmedium, joka on suunniteltu tukemaan erilaisten nisäkässolujen kasvua biologisessa tutkimuksessa. Se on ihanteellinen väliaine primaaristen fibroblastien, neuronien, gliasolujen, HUVEC-solujen, sileiden lihassolujen sekä suosittujen solulinjojen, kuten HeLa-, 293-, Cos-7- ja PC-12-solujen, viljelyyn.
DMEM erottuu muista väliaineista sen ainutlaatuisen koostumuksen ansiosta. Sen aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet ovat nelinkertaistuneet alkuperäiseen Eagle's Minimal Essential Mediumiin verrattuna. DMEM kehitettiin alun perin matalalla glukoosipitoisuudella (1 g/l) ja natriumpyruvaatilla, mutta sitä käytetään usein korkeammilla glukoosipitoisuuksilla joko natriumpyruvaatin kanssa tai ilman sitä. DMEM ei kuitenkaan sisällä proteiineja, rasvoja tai kasvutekijöitä, joten sitä on täydennettävä. Optimaalisen kasvun saavuttamiseksi DMEM:ää täydennetään yleensä 10 %:lla naudan sikiöseerumia (FBS). Lisäksi DMEM:ssä käytetään natriumbikarbonaattipuskurijärjestelmää, joka vaatii 5-10 % CO2-ympäristöä fysiologisen pH:n ylläpitämiseksi.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) on erittäin arvostettu solu- ja kudosviljelyssä käytettävien määriteltyjen väliaineiden joukossa, sillä se vastaa erilaisten tarttuvien solujen fenotyyppien kasvutarpeisiin. Se ylittää alkuperäisen, 1950-luvulla kanasolujen viljelyyn kehitetyn Eagle's Medium -mediumin Dulbecco's Modification -nimellä tunnetun parannetun lisäravinteen avulla. Tämä modifikaatio nostaa valittujen aminohappojen ja vitamiinien pitoisuutta merkittävästi jopa nelinkertaiseksi alkuperäiseen väliaineeseen verrattuna.
Soluviljelyn alalla DMEM:llä on tärkeä rooli kasvualustana eri solutyypeille, kuten primaarisoluille, kantasoluille ja muunnetuille soluille. Tutkijat käyttävät DMEM:n modifioitua versiota myös monenlaisiin tutkimussovelluksiin, kuten lääkkeiden löytämiseen, kudostekniikkaan ja solujen signaalireittien tutkimiseen.
Laadunvalvonta
- Steriilisuodatettu
Varastointi ja säilyvyys
- Säilytetään +2°C - +8°C:ssa valolta suojattuna.
- Kun se on avattu, säilytä 4°C:ssa ja käytä 6-8 viikon kuluessa.
Toimitusolosuhteet
- Ympäristön lämpötila
Huolto
- Säilytettävä jääkaapissa +2°C - +8°C:ssa pimeässä. Vältä pakastamista ja usein tapahtuvaa lämmittämistä +37°C:seen, koska se heikentää tuotteen laatua.
- Älä lämmitä väliaineen lämpötilaa yli 37°C äläkä käytä kontrolloimattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltolaitteita.
- Jos väliaineesta käytetään vain osa, poista tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpöiseksi ennen käyttöä.
Koostumus
| Luokka | Ainesosat | Pitoisuus (mg/l) |
| Aminohapot | Glysiini | 30.00 |
| L-arginiini HCl | 84.00 | |
| L-kystiini 2 HCl | 62.57 | |
| L-Glutamiini | 584.00 | |
| L-histidiini HClH2O | 42.00 | |
| L-isoleusiini | 105.00 | |
| L-leusiini | 105.00 | |
| L-lysiini HCl | 146.00 | |
| L-metioniini | 30.00 | |
| L-Fenyylialaniini | 66.00 | |
| L-Seriini | 42.00 | |
| L-treoniini | 95.00 | |
| L-tryptofaani | 16.00 | |
| L-tyrosiini 2 Na 2H2O | 103.79 | |
| L-valiini | 94.00 | |
| Vitamiinit | Koliinikloridi | 4.00 |
| D-kalsiumpantotenaatti | 4.00 | |
| Foolihappo | 4.00 | |
| myo-Inositoli | 7.20 | |
| Nikotiiniamidi | 4.00 | |
| Pyridoksaali-HCl | 4.00 | |
| Riboflaviini | 0.40 | |
| Tiamiini HCl | 4.00 | |
| Epäorgaaniset suolat | CaCl2 2H2O | 265.00 |
| Fe(NO3)3 9H2O | 0.10 | |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 200.10 | |
| NaCl | 6400.00 | |
| NaHCO3 | 3700.00 | |
| NaH2PO4 2H2O | 141.73 | |
| Muut komponentit | D-glukoosi | 4500.00 |
| Fenolipunainen natriumsuola | 15.90 | |
| Natriumpyruvaatti | 110.00 |