Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiinia, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,5 g/L NaHCO3
Esittelyssä on Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, joka on Ham's F-12 -mediumin erikoismodifikaatio, joka on suunniteltu vastaamaan biologisen tutkimuksen ainutlaatuisia vaatimuksia. Tämä kehittynyt väliaine tarjoaa selviä etuja, sillä se tehostaa ihmisen primaaristen hepatosyyttien sekä rotan ja kanan maksasolujen viljelyä erityisesti vähennetyssä seerumipitoisuudessa.
Ham's F-12K (Kaighn's) Medium on huolellisesti muotoiltu soluviljelyolosuhteiden optimoimiseksi. Sen koostumus on rikastettu, ja se sisältää runsaasti välttämättömiä komponentteja, kuten aminohappoja ja natriumpyruvaattia, sekä lisäaineita, kuten putressiiniä, tymidiiniä, hypoksantiiniä ja sinkkiä. Näiden lisäysten avulla tutkijat voivat täydentää väliaineen minimaalisella seerumilla tai tietyille solutyypeille määritellyillä komponenteilla, mikä helpottaa täsmällisten koeolosuhteiden luomista.
Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ei sisällä proteiineja eikä kasvutekijöitä. Näin ollen kasvutekijöillä ja naudan sikiöseerumilla (FBS) täydentäminen on usein tarpeen, jolloin tutkijat voivat räätälöidä väliaineen tiettyjen solulinjojensa vaatimusten mukaiseksi. Optimaalisen suorituskyvyn saavuttamiseksi FBS:n pitoisuus on optimoitava huolellisesti kullekin solulinjalle, jotta varmistetaan optimaalinen kasvu ja toimivuus.
Fysiologisen pH:n ylläpitämiseksi Ham's F-12K (Kaighn's) -mediumissa käytetään natriumbikarbonaattipuskurijärjestelmää (2,5 g/l), mikä edellyttää kontrolloitua 5-10 %:n hiilidioksidipitoisuutta viljelyn aikana. Näin varmistetaan, että väliaineen pH pysyy solujen kasvun ja elinkelpoisuuden kannalta ihanteellisella alueella
Laadunvalvonta
- pH = 7,2 +/- 0,02 20-25 °C:ssa.
- Jokainen erä on testattu steriiliyden sekä mykoplasman ja bakteerien puuttumisen varalta.
Ylläpito
- Säilytetään jääkaapissa +2°C - +8°C:ssa pimeässä. Pakastaminen sekä lämmittäminen +37°C:seen asti vähentävät tuotteen laatua.
- Älä lämmitä elatusainetta yli 37°C:een tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä (esim. mikroaaltolaitteita).
- Jos vain osa väliaineesta halutaan käyttää, poista tämä määrä pullosta ja lämmitä se huoneenlämmössä.
- Kaikkien väliaineiden paitsi perusmediumin säilyvyysaika on 8 viikkoa valmistuspäivästä.
Koostumus
| Ainesosat | mg/l | |
| Epäorgaaniset suolat | Kalsiumkloridi x 2H2O | 135,24 |
| Kupari(II)sulfaatti x 5H2O | 0,00 | |
| Rauta(II)sulfaatti x 7H2O | 0,83 | |
| Magnesiumkloridi x 6H2O | 105,72 | |
| Magnesiumsulfaatti x 7H2O | 394,49 | |
| Kaliumkloridi | 283,29 | |
| Kaliumdivetyfosfaatti | 58,52 | |
| Natriumkloridi | 7597,20 | |
| dinatriumvetyfosfaatti vedetön |
115,02 | |
| Sinkkisulfaatti x 7H2O | 0,14 | |
| Muut aineosat | D(+)-glukoosi vedetön | 1260,00 |
| Hypoksantiini | 4,08 | |
| DL-α-Lipoiinihappo | 0,21 | |
| Fenolipunainen | 3,00 | |
| Putressiini x 2HCl | 0,32 | |
| Natriumpyruvaatti | 220,00 | |
| NaHCO3 | 2500,00 | |
| Tymidiini | 0,73 | |
| Aminohapot | L-alaniini | 17,82 |
| L-arginiini x HCl | 421,40 | |
| L-asparagiini x H2O | 30,02 | |
| L-asparagiinihappo | 26,62 | |
| L-kysteiini x HCl x H2O | 70,24 | |
| L-Glutamiini | 292,20 | |
| L-glutamiinihappo | 29,42 | |
| Glysiini | 15,01 | |
| L-histidiini x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-isoleusiini | 7,87 | |
| L-leusiini | 26,24 | |
| L-lysiini x HCl | 73,04 | |
| L-metioniini | 8,95 | |
| L-Fenyylialaniini | 9,91 | |
| L-proliini | 69,06 | |
| L-Seriini | 21,02 | |
| L-treoniini | 23,82 | |
| L-tryptofaani | 4,08 | |
| L-tyrosiini | 10,87 | |
| L-valiini | 23,42 | |
| Vitamiinit | D(+)-Biotiini | 0,07 |
| D-kalsiumpantotenaatti | 0,48 | |
| Koliinikloridi | 13,96 | |
| Foolihappo | 1,32 | |
| myo-Inositoli | 18,02 | |
| Nikotiiniamidi | 0,04 | |
| Pyridoksiini x HCl | 0,06 | |
| Riboflaviini | 0,04 | |
| Tiamiini x HCl | 0,34 | |
| B12-vitamiini | 1,36 |