HuH7-solut

Cytionin Freeze Medium CM-1 on huipputekninen kryosäilytysmedium, joka on suunniteltu varmistamaan solujen elinkelpoisuuden ja toimivuuden korkein mahdollinen taso sulatuksen jälkeen. Tämä monipuolinen väliaine soveltuu monille eri solutyypeille, mukaan lukien ihmis
- ja eläinsolut, mikä tekee siitä välttämättömän työkalun erilaisiin tutkimussovelluksiin. Freeze Medium CM-1 on koostettu huolellisesti tasapainotetusta yhdistelmästä kryosuojakemikaaleja ja välttämättömiä ravintoaineita, ja se minimoi jääkiteiden muodostumisen ja solustressin jäädytysprosessin aikana, jolloin solujen eheys säilyy.
Freeze Medium CM-1:n tärkeimpiä ominaisuuksia ovat mm:

Laaja yhteensopivuus: Tehokas monenlaisille solutyypeille, mukaan lukien primaarisolut, kantasolut ja vakiintuneet solulinjat.
Korkea elinkelpoisuus: Optimoitu maksimoimaan solujen palautuminen ja elinkelpoisuus sulatuksen jälkeen, mikä takaa luotettavat koetulokset.
Käyttövalmis: Kätevästi valmisteltu ja steriloitu välitöntä käyttöä varten, mikä vähentää valmisteluaikaa ja kontaminaatioriskiä.
Parannettu stabiilisuus: Säilyttää tasaisen suorituskyvyn tavanomaisissa kryosäilytysolosuhteissa, mikä takaa toistettavat tulokset.
Pitkä säilyvyysaika: CM-1 on seerumia sisältävä, käyttövalmis kryosäilytysmedia, jota voidaan säilyttää jääkaapissa jopa vuoden ajan.


CM-1:n käyttö solujen pakastamiseen

Jos haluat käyttää CM-1:tä sekä adheesiosolujen että suspensiosolujen jäädyttämiseen, toimi seuraavasti

Adheesiosolut pestään ja irrotetaan viljelyalustasta. Jos kyseessä ovat suspensiosolut, siirry suoraan seuraavaan vaiheeseen.
Laske solut varmistaaksesi, että niiden pitoisuus on oikea.
Sentrifugoi solut pelletiksi ja suspendoi ne uudelleen CM-1-pakastusmediumiin.
Siirretään resuspendoidut solut kryopulloihin.
Käytä hidasta pakastusmenetelmää ennen solujen siirtämistä pitkäaikaissäilytykseen





Menetelmä
Kuvaus
Vaiheet





❄️
Manuaalinen jäädytys

Vaiheittainen menetelmä, jossa lämpötilaa alennetaan asteittain solujen elinkelpoisuuden varmistamiseksi

1️⃣ Aseta solut pakastusmediumiin 4 °C:n pakastimeen 40 minuutiksi.
2️⃣ Siirretään -80 °C:n pakastimeen 24 tunniksi.
3️⃣ Säilytä solut nestemäisessä typessä pitkäaikaissäilytystä varten



❄️
Mr. Frostyn käyttäminen

Kätevä laite, joka mahdollistaa hallitun pakastusnopeuden ilman sähkövirtaa

1️⃣ Valmistele solut kryopulloihin pakastusmediumilla.
2️⃣ Aseta kryopullot Mr. Frosty -astiaan.
3️⃣ Säilytä -80 °C:ssa 24 tuntia ennen siirtämistä nestemäiseen typpeen



❄️
Pakastin, jonka nopeus on säädetty

Thermo Fisherin tai muiden valmistajien korkean tarkkuuden pakastin, joka on suunniteltu lämpötilan hallittuun alentamiseen

1️⃣ Ohjelmoi laite alentamaan lämpötilaa asteittain.
2️⃣ Aseta valmistetut solut pakastimeen.
3️⃣ Siirrä solut pakastussyklin jälkeen nestemäiseen typpeen









Säilytä kryopullot alle -130 °C:n lämpötilassa tai nestemäisessä typessä pitkäaikaissäilytystä varten.


Ainesosat

Sisältää FBS:ää, DMSO:ta, glukoosia, suoloja
Puskurikyky: pH = 7,2-7,6


Cytionin Freeze Medium CM-1 tarjoaa luotettavan ratkaisun kryosäilytykseen, joka takaa solujen korkean elinkelpoisuuden ja toimivuuden sulatuksen jälkeen monenlaisissa tutkimussovelluksissa.

RPMI 1640 Medium, joka tunnetaan myös nimellä RPMI medium, on erittäin monipuolinen soluviljelyalusta, jota käytetään laajalti biologisessa tutkimuksessa erilaisten nisäkässolujen viljelyyn. George E. Moore, Robert E. Gerner ja H. Addison Franklin kehittivät sen vuonna 1966 maineikkaassa Roswell Park Comprehensive Cancer Centerissä, ja se on saanut nimensä Roswell Park Memorial Institute (RPMI) -nimisestä laitoksesta.
Alun perin se oli suunniteltu tukemaan ihmisen leukemiasolujen kasvua sekä suspensio
- että monokerrosviljelmissä, mutta tutkijoiden ja kaupallisten toimittajien tekemien muutosten myötä RPMI 1640 -medium on kehittynyt sopivaksi monille erilaisille nisäkässoluille. Se on poikkeuksellisen yhteensopiva sellaisten solulinjojen kanssa kuin HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrosyytit ja karsinoomat.
RPMI 1640 Medium erottuu muista soluviljelymedioista ainutlaatuisen koostumuksensa ansiosta. Se sisältää huomattavan määrän fosfaattia, aminohappoja ja vitamiineja. Erityisesti se sisältää biotiinia, B12-vitamiinia ja PABA:ta, joita ei ole Eagle's Minimal Essential Mediumissa tai Dulbecco's Modified Eagle Mediumissa. Lisäksi RPMI 1640 -mediassa on huomattavasti korkeammat inositoli
- ja koliinivitamiinien pitoisuudet. Se ei kuitenkaan sisällä proteiineja, lipidejä tai kasvutekijöitä. Näin ollen solujen kasvulle optimaalisten olosuhteiden luomiseksi tarvitaan yleensä 10 %:lla naudan sikiöseerumia (FBS).
RPMI 1640 -mediumin puskurointijärjestelmä perustuu natriumbikarbonaattiin, ja fysiologisesti sopivan pH:n ylläpitäminen edellyttää 5-10 %:n CO2-ympäristöä. Pelkistävän aineen, glutationin, sisältyminen tähän väliaineeseen erottaa tämän väliaineen edelleen muista.
Laadunvalvonta

Steriilisuodatettu


Varastointi ja säilyvyys

Säilytetään +2°C
- +8°C:ssa valolta suojattuna.
Kun se on avattu, säilytä 4 °C:ssa ja käytä 6-8 viikon kuluessa.


Toimitusolosuhteet

Ympäristön lämpötila


Huolto

Säilytettävä jääkaapissa +2°C
- +8°C:ssa pimeässä. Vältä pakastamista ja usein tapahtuvaa lämmittämistä +37°C:seen, koska se heikentää tuotteen laatua.
Älä lämmitä väliaineen lämpötilaa yli 37°C äläkä käytä kontrolloimattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltolaitteita.
Jos väliaineesta käytetään vain osa, poista tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpöiseksi ennen käyttöä.



Koostumus




Luokka
Ainesosat
Pitoisuus (mg/l)


Aminohapot
Glysiini
10.00



L-Alanyyli-L-Glutamiini
434.40



L-arginiini
200.00



L-asparagiiniH2O
56.82



L-asparagiinihappo
20.00



L-kystiini 2HCl
65.20



L-glutamiinihappo
20.00



L-histidiini HClH2O
20.27



L-hydroksi-L-proliini
20.00



L-isoleusiini
50.00



L-leusiini
50.00



L-lysiini HCl
40.00



L-metioniini
15.00



L-Fenyylialaniini
15.00



L-Proliini
20.00



L-Seriini
30.00



L-treoniini
20.00



L-tryptofaani
5.00



L-tyrosiini 2Na 2H2O
28.83



L-valiini
20.00


Vitamiinit
p-Aminobentsoehappo
1.00



D-Biotiini
0.20



Koliinikloridi
3.00



D-kalsium-pantotenaatti
0.25



Foolihappo
1.00



myo-Inositoli
35.00



Nikotiiniamidi
1.00



Pyridoksiini HCl
1.00



Riboflaviini
0.20



Tiamiini HCl
1.00



B12-vitamiini
0.005


Epäorgaaniset suolat
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Muut komponentit
D-glukoosi
2000.00



L-Glutationi pelkistetty
1.00



Fenolipunainen natriumsuola
5.30

Accutase Cell Dissociation Reagent
- hellävarainen vaihtoehto trypsiinille
Accutase on solujen irrotusliuos, joka mullistaa soluviljelyteollisuuden. Se on proteolyyttisten ja kollagenolyyttisten entsyymien seos, joka jäljittelee trypsiinin ja kollagenaasin toimintaa. Toisin kuin trypsiini, Accutase ei sisällä nisäkäs
- tai bakteerikomponentteja, ja se on paljon hellävaraisempi soluille, mikä tekee siitä ihanteellisen ratkaisun solujen rutiininomaiseen irrottamiseen tavanomaisista kudosviljelymuovitavaroista ja adheesiopinnoitetuista muovitavaroista. Tässä blogikirjoituksessa tarkastelemme Accutaasin hyötyjä ja käyttötapoja sekä sitä, miten se muuttaa soluviljelyä.
Accutasen edut
Accutaasilla on useita etuja perinteisiin trypsiiniliuoksiin verrattuna. Ensinnäkin sitä voidaan käyttää aina, kun tarvitaan minkä tahansa tarttuvan solulinjan hellävaraista ja tehokasta irrottamista, joten se korvaa suoraan trypsiinin. Toiseksi Accutase toimii erittäin hyvin alkion ja hermoston kantasoluissa, ja sen on osoitettu säilyttävän näiden solujen elinkelpoisuuden passageauksen jälkeen. Kolmanneksi Accutase säilyttää useimmat epitoopit myöhempää virtaussytometria-analyysia varten, joten se on ihanteellinen solupintamarkkerien analysointiin.
Lisäksi Accutasea ei tarvitse neutraloida, kun soluja passageerataan adherenttien solujen kanssa. Lisää väliaineen lisääminen solujen jakamisen jälkeen laimentaa Accutaasia niin, että se ei enää kykene irrottamaan soluja. Tämä poistaa inaktivointivaiheen tarpeen ja säästää soluviljelyteknikoiden aikaa. Accutasea ei myöskään tarvitse annostella, ja pullo säilyy jääkaapissa 2 kuukautta.
Accutaasin sovellukset
Accutase korvaa suoraan trypsiiniliuoksen, ja sitä voidaan käyttää solulinjojen passagointiin. Lisäksi Accutase toimii hyvin, kun soluja irrotetaan monien solujen pintamerkkiaineiden analysoimiseksi virtaussytometrialla ja solujen lajittelussa. Muita Accutase-käsittelyn jatkokäyttösovelluksia ovat solujen pintamarkkereiden analysointi, virusten kasvun määritys, solujen proliferaatio, kasvainsolujen migraatiomääritykset, rutiinisolupassagointi, tuotannon skaalaaminen (bioreaktori) ja virtaussytometria.
Accutaasin koostumus
Accutase ei sisällä nisäkäs
- tai bakteerikomponentteja, ja se on luonnollinen entsyymiseos, jolla on proteolyyttinen ja kollageenilyyttinen entsyymiaktiivisuus. Se on muotoiltu paljon pienemmällä pitoisuudella kuin trypsiini ja kollagenaasi, mikä tekee siitä vähemmän myrkyllisen ja hellävaraisemman, mutta yhtä tehokkaan.
Accutasen tehokkuus
Accutaasin on osoitettu olevan tehokas primääri
- ja kantasolujen irrottamisessa ja solujen korkean elinkelpoisuuden säilyttämisessä verrattuna eläinperäisiin entsyymeihin, kuten trypsiiniin. solut saadaan talteen 100-prosenttisesti 10 minuutin kuluttua, eikä solujen jättämisestä Accutaseen jopa 45 minuutiksi ole haittaa Accutasen automaattisen sulatuksen ansiosta.
Yhteenvetona
Yhteenvetona voidaan todeta, että Accutase on tehokas ratkaisu, joka on muuttamassa soluviljelyä. Hellävaraisen luonteensa, tehokkuutensa ja monipuolisuutensa ansiosta Accutase on ihanteellinen vaihtoehto trypsiinille. Jos etsit luotettavaa ja tehokasta ratkaisua solujen irrottamiseen, Accutase on ratkaisu sinulle.

Tuotteen yleiskatsaus
Tilavuus: 100 ml Säilytys: ≤-15°C Steriliteetti: Steriili suodatettu
Antibiootti-/antimykoottiliuos (100x) on steriili, käyttövalmis konsentraatti, joka on suunniteltu vähentämään mikrobikontaminaatioriskiä soluviljelyssä ja siihen liittyvissä laboratoriosovelluksissa. Tämä 100x-liuos sisältää vakiintuneen yhdistelmän penisilliiniä, streptomysiiniä ja amfoterisiini B:tä, joka tarjoaa laajakirjoisen antimikrobisen aktiivisuuden grampositiivisia ja gramnegatiivisia bakteereja, hiivoja ja säikeisiä sieniä vastaan. Valmiste soveltuu käytettäväksi eukaryoottisissa soluviljelmissä, bakteerialustoissa ja muissa kontaminaatioherkissä järjestelmissä, mikä tukee puhtaita ja johdonmukaisia laboratoriotoimintoja.
Käyttö ja hyödyt Rutiininomaisiin tutkimusprotokolliin optimoitua liuosta käytetään laajalti aseptisten olosuhteiden ylläpitämiseen soluviljelytyöprosesseissa. Se tarjoaa luotettavan suorituskyvyn kontaminaatioherkissä ympäristöissä ja auttaa tutkijoita vähentämään mikrobien liikakasvun riskiä vaarantamatta solujen terveyttä tai kokeiden toistettavuutta. Steriilisuodatettu koostumus poistaa tarpeen ylimääräisille liuotusvaiheille, mikä tukee virtaviivaista väliaineen valmistusta ja vähentää vaihtelua päivittäisissä laboratoriomenetelmissä.
Käyttö ja yhteensopivuus Saavuttaaksesi vakiotyöpitoisuudet laimenna liuos 1:100 täydelliseen kasvatusalustaan. Tuote on yhteensopiva monenlaisten nisäkässolulinjojen ja perusmedioiden kanssa. Jatkuvan varastosaatavuuden ansiosta tutkijat hyötyvät toimitusten luotettavasta jatkuvuudesta ja logistiikkasuunnittelun yksinkertaistamisesta. Liuos on säilytettävä ≤ -15 °C:ssa ja suojattava toistuvilta jäädytys-sulatussykleiltä stabiilisuuden säilyttämiseksi. Vain tutkimuskäyttöön. Ei käytettäväksi diagnostisissa tai terapeuttisissa toimenpiteissä. Ei käytettäväksi ihmisillä tai eläimillä.

Fosfaattipuskuroitu keittosuolaliuos (PBS-liuos)
Fosfaattipuskuroitu suolaliuos (PBS) on laajalti käytetty puskuriliuos biologisessa ja kemiallisessa tutkimuksessa. Sillä on ratkaiseva merkitys pH-tasapainon ja osmolaarisuuden ylläpitämisessä erilaisten kokeellisten toimenpiteiden aikana, mukaan lukien kudosten käsittely ja soluviljely. PBS-liuoksemme on valmistettu huolellisesti erittäin puhtaista ainesosista vakauden ja luotettavuuden varmistamiseksi jokaisessa kokeessa. PBS-liuoksemme osmolaarisuus ja ionipitoisuudet jäljittelevät läheisesti ihmiskehon osmolaarisuutta ja ionipitoisuuksia, joten se on isotoninen ja myrkytön useimmille soluille.

PBS-liuoksemme koostumus
PBS-liuoksemme on pH-säädetty sekoitus erittäin puhdasta laatua olevia fosfaattipuskureita ja suolaliuoksia. Se sisältää 1-kertaisena käyttökonsentraationa:

8000 mg/l natriumkloridia (NaCl)
200 mg/l kaliumkloridia (KCl)
1150 mg/L natriumfosfaattidibasinen vedetön (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumfosfaatti, monobasinen, vedetön (KH2PO4)

Tämä koostumus takaa optimaalisen pH
- ja ionitasapainon, joka soveltuu monenlaisiin biologisiin sovelluksiin.

PBS-liuoksemme käyttökohteet
PBS-liuoksemme soveltuu erinomaisesti erilaisiin biologisen tutkimuksen sovelluksiin. Sen isotonisten ja myrkyttömien ominaisuuksien ansiosta se soveltuu aineiden laimentamiseen ja solusäiliöiden huuhteluun. EDTA:ta sisältävät PBS-liuokset irrottavat tehokkaasti kiinnittyneet ja kyhmyiset solut. PBS:ään ei kuitenkaan pitäisi lisätä kaksiarvoisia metalleja, kuten sinkkiä, sillä ne voivat aiheuttaa saostumista. Tällaisissa tapauksissa suositellaan Goodin puskureita. Lisäksi PBS-liuoksemme on hyväksyttävä vaihtoehto virusten kuljetusalustalle RNA-virusten, kuten SARS-CoV-2:n, kuljetuksessa ja säilytyksessä.

Laadunvalvonta

Steriilisuodatettu


Varastointi ja säilyvyys

Säilytetään +2 °C:n ja +25 °C:n välillä valolta suojattuna.
Kun se on avattu, säilytä 2°C-25°C:ssa ja käytä 24 kuukauden kuluessa.


Kuljetusolosuhteet

Ympäristön lämpötila


Huolto

Säilytettävä jääkaapissa +2°C
- +8°C:ssa pimeässä. Vältä pakastamista ja usein tapahtuvaa lämmittämistä +37°C:een, koska se heikentää tuotteen laatua.
Älä lämmitä väliaineen lämpötilaa yli 37°C äläkä käytä kontrolloimattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltolaitteita.
Jos väliaineesta käytetään vain osa, poista tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpöiseksi ennen käyttöä.

Koostumus



Luokka
Ainesosat
Pitoisuus (mg/l)


Suolat
Kaliumkloridi
200



Kaliumfosfaattimonobasinen vedetön kaliumfosfaatti
200



Natriumkloridi
8000



Vedetön dibasinen natriumfosfaatti
1150