Medium 199, w: 2,7 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Medium 199 on monipuolinen ja laajalti käytetty soluviljelyalusta, joka on erityisesti suunniteltu primaaristen kasvustojen viljelyyn. Tässä kattavassa väliaineessa yhdistyvät välttämättömät vitamiinit, aminohapot ja muut tekijät, jotka tarjoavat täysin määritellyn ravinnelähteen erilaisille solutyypeille. Se soveltuu erityisen hyvin muokkaamattomille soluille, mikä tekee siitä korvaamattoman arvokkaan välineen biologiseen tutkimukseen.
Medium 199 tarjoaa monenlaisia sovelluksia alalla. Sillä voidaan tehokkaasti ylläpitää kumulaari- ja munasolukompleksia (COC) ja tukea munasolujen in vitro -kypsymistä. Lisäksi sitä käytetään saksalaisilta holsteinlehmiltä kerättävien munasolujen huuhtelussa. Medium 199 on lisäksi erinomainen väliaine rotista peräisin olevien sydämen endoteelisolujen viljelyyn. Nämä sovellukset osoittavat Medium 199:n monipuolisuuden ja mukautuvuuden erilaisiin kokeellisiin tarpeisiin.
Historia
Medium 199:n kehittäminen 1950-luvulla merkitsi merkittävää edistystä kudosviljelyaineissa. Ennen sen käyttöönottoa monet kasvatusmediat perustuivat eläimistä peräisin oleviin tuotteisiin ja kudosuutteisiin. Morgan ja kollegat kuitenkin mullistivat alan muotoilemalla täysin määritellyn ravinnelähteen soluviljelmille. Kokeilemalla erilaisia vitamiinien, aminohappojen ja muiden tekijöiden yhdistelmiä he havaitsivat Medium 199:n poikkeukselliset kasvua edistävät ominaisuudet.
Laadunvalvonta
- pH = 7,2 +/- 0,02 20-25 °C:ssa.
- Jokainen erä on testattu steriiliyden sekä mykoplasman ja bakteerien puuttumisen varalta.
Ylläpito
- Säilytetään jääkaapissa +2°C - +8°C:ssa pimeässä. Pakastaminen ja lämmittäminen +37° C:een asti minimoi tuotteen laadun.
- Älä lämmitä elatusainetta yli 37° C:seen tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä (esim. mikroaaltolaitteita).
- Jos vain osa väliaineesta on tarkoitus käyttää, poista tämä määrä pullosta ja lämmitä se huoneenlämmössä.
- Kaikkien elatusaineiden, lukuun ottamatta peruselatusainetta, säilyvyysaika on 8 viikkoa valmistuspäivästä.
Koostumus
| Ainesosat | mg/l | |
| Epäorgaaniset suolat | Kalsiumkloridi x 2H2O | 264,92 |
| Rauta(III)nitraatti x 9H2O | 0,72 | |
| Magnesiumsulfaatti | 97,67 | |
| Kaliumkloridi | 400,00 | |
| Natriumasetaatti x 3H2O | 82,95 | |
| Natriumkloridi | 6,800.00 | |
| Natriumdivetyfosfaatti x H2O | 140,00 | |
| Muut komponentit | Adeniinisulfaatti | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Kolesteroli | 0,20 | |
| 2'-Deoksiriboosi | 0,50 | |
| D(+)-glukoosi vedetön | 1,000.00 | |
| Glutationi (punainen) | 0,05 | |
| Guaniini x HCl | 0,30 | |
| Hypoksantiini | 0,30 | |
| Fenolipunainen | 10,00 | |
| D-Riboosi | 0,50 | |
| Timiini | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Uracil | 0,30 | |
| Ksantiini | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Aminohapot | L-alaniini | 25,00 |
| L-arginiini x HCl | 70,00 | |
| L-asparagiinihappo | 30,00 | |
| L-kysteiini x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-kystiini | 20,00 | |
| L-Glutamiini vakaa | 149,00 | |
| L-glutamiinihappo | 67,00 | |
| Glysiini | 50,00 | |
| L-histidiini x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-hydroksiproliini | 10,00 | |
| L-isoleusiini | 20,00 | |
| L-leusiini | 60,00 | |
| L-lysiini x HCl | 70,00 | |
| L-metioniini | 15,00 | |
| L-Fenyylialaniini | 25,00 | |
| L-proliini | 40,00 | |
| L-Seriini | 25,00 | |
| L-treoniini | 30,00 | |
| L-tryptofaani | 10,00 | |
| L-tyrosiini | 40,00 | |
| L-valiini | 25,00 | |
| Vitamiinit | 4-Aminobentsoehappo | 0,05 |
| Askorbiinihappo | 0,05 | |
| D(+)-Biotiini | 0,01 | |
| Kalsiferoli | 0,10 | |
| D-kalsiumpantotenaatti | 0,01 | |
| Koliinikloridi | 0,50 | |
| Foolihappo | 0,01 | |
| myo-Inositoli | 0,05 | |
| Menadioni | 0,01 | |
| Nikotiinihappo | 0.025 | |
| Nikotiiniamidi | 0.025 | |
| Pyridoksaali x HCl | 0.025 | |
| Pyridoksoli x HCl | 0.025 | |
| Riboflaviini | 0,01 | |
| DL-α-tokoferolifosfaatin dinatriumsuola | 0,01 | |
| Tiamiini x HCl | 0,01 | |
| A-vitamiini asetaatti | 0,14 |