Cellules HEK293-FAP

5 000,00 €*

Les produits sont expédiés congelés dans de la glace carbonique dans des cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10 ⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes plus frais d'expédition

cryovial

Numéro de produit : 305419

Fiche de données de sécurité

Fiche produit

Accord avec les tiers

Description	Clause de non-responsabilité : Les prix affichés pour les lignées cellulaires sont exclusivement destinés aux clients à but non lucratif. Si vous représentez une entité commerciale, veuillez nous contacter pour obtenir d'autres prix. La lignée cellulaire HEK293-FAP est une lignée cellulaire recombinante stable HEK293 conçue pour exprimer la protéine d'activation des fibroblastes (FAP) à un niveau élevé, soit environ 123 000 molécules par cellule. Cette lignée cellulaire a été développée en utilisant la technologie "landing pad" d'inscreenex, assurant une intégration précise et reproductible du gène FAP à un locus génomique spécifique et pré-validé. La FAP, également connue sous le nom de Seprase ou DPPIV, est une sérine protéase impliquée dans le remodelage de la matrice extracellulaire, ce qui est particulièrement important dans des processus tels que la cicatrisation des plaies, la réparation des tissus et la fibrose. La FAP est également fortement régulée dans le stroma de nombreux cancers épithéliaux, ce qui en fait une cible précieuse pour la recherche en oncologie et un biomarqueur potentiel pour les fibroblastes associés au cancer. L'expression de la FAP dans cette lignée cellulaire a été confirmée par cytométrie de flux à l'aide d'un anticorps spécifique à la cible, ce qui garantit une densité de récepteurs cohérente et fiable dans l'ensemble de la population cellulaire.
Organisme	Humain
Tissus	Rein fœtal

L'âge	Fœtus
Genre	Femme
Morphologie	De type épithélial
Propriétés de croissance	Monocouche, adhérente

Citation	HEK293-FAP (numéro de catalogue Cytion 305419)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_TaxID	9606
Statut des OGM	OGM-S1 : Ce dérivé de HEK293 contient une construction d'expression de la protéine d'activation des fibroblastes (FAP) pour les études sur la fonction des récepteurs. Cette classification ne s'applique qu'en Allemagne et peut différer dans d'autres pays.

Récepteurs exprimés	FAP (Seprase ou DPPIV)

Milieu de culture	RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Suppléments	Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 1 mM de pyruvate de sodium, 10 mM de HEPES, 1 % de NEAA. Ajouter de la généticine (G418-Sulfat) pour obtenir une concentration finale de 1 mg/ml.
Réactif de dissociation	Trypsine-EDTA
Sous-culture	Pour la culture de routine de cellules adhérentes : Aspirer l'ancien milieu de culture des cellules adhérentes et les laver avec du PBS pour éliminer tout milieu restant. Après avoir aspiré le PBS, ajouter le volume approprié de solution de Trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (par exemple, 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incuber à température ambiante ou à 37°C jusqu'à ce que les cellules se détachent (5-10 minutes). Surveiller le détachement au microscope et tapoter doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajouter du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettre doucement les cellules en suspension et transférer une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placer le récipient dans un incubateur réglé à 37°C avec 5% de_CO2, et changer le milieu tous les 2-3 jours.
Taux de fractionnement	Un rapport de 1:2 est recommandé pour le premier fractionnement après décongélation. Un rapport de 1:5 à 1:10 est recommandé pour la culture de routine.
Renouvellement des fluides	2 à 3 fois par semaine
Récupération après dégel	Après décongélation, diviser les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures. Pour un meilleur attachement et une meilleure viabilité après la décongélation des cellules, nous recommandons d'utiliser des flacons ou des plaques recouverts de collagène pour l'ensemencement initial après la cryo-récupération. L'enrobage de collagène n'est pas nécessaire pour la culture de routine ultérieure des cellules.
Congélation du milieu	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Décongélation et culture des cellules	Confirmer que le flacon est toujours congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche pour maintenir des températures optimales pendant le transport. Dès réception, soit conserver immédiatement le cryovial à des températures inférieures à -150°C pour assurer la préservation de l'intégrité cellulaire, soit passer à l'étape 3 si une mise en culture immédiate est nécessaire. Pour une mise en culture immédiate, décongeler rapidement le flacon en l'immergeant dans un bain-marie à 37°C avec de l'eau propre et un agent antimicrobien, en l'agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste qu'un petit amas de glace. Effectuer toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux, en désinfectant le cryovial avec de l'éthanol à 70 % avant de l'ouvrir. Ouvrir soigneusement le flacon désinfecté et transférer la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant doucement. Centrifuger le mélange à 300 x g pendant 3 minutes pour séparer les cellules et jeter soigneusement le surnageant contenant le milieu de congélation résiduel. Remettre doucement en suspension le culot cellulaire dans 10 ml de milieu de culture frais. Pour les cellules adhérentes, répartir la suspension entre deux flacons de culture T25 ; pour les cultures en suspension, transférer tout le milieu dans un seul flacon T25 afin de favoriser une interaction et une croissance efficaces des cellules. Respecter les protocoles de sous-culture établis pour une croissance et un entretien continus de la lignée cellulaire, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables.
Atmosphère d'incubation	37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.
Revêtement des flacons	Pour une fixation et une viabilité optimales après décongélation, nous recommandons d'utiliser des flacons ou des plaques recouverts de collagène.
Procédure de congélation	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions de stockage	Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Stérilité	La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Veuillez noter que cette lignée cellulaire n'est pas disponible dans le cadre d'un CTM standard de Cytion, car elle nécessite un accord avec un tiers et/ou fait l'objet d'une négociation avec le donneur de licence original.

Produits requis

Produits requis

Milieu de congélation CM-1 - 50 ml

Variantes de milieux de cryoconservation: 50 ml

Le milieu de congélation CM-1 de Cytion est un milieu de cryoconservation de pointe conçu pour garantir le plus haut niveau de viabilité et de fonctionnalité des cellules après la décongélation. Ce milieu polyvalent convient à un large éventail de types de cellules, y compris les cellules humaines et animales, ce qui en fait un outil essentiel pour diverses applications de recherche. Formulé avec une combinaison méticuleusement équilibrée de cryoprotecteurs et de nutriments essentiels, le milieu de congélation CM-1 minimise la formation de cristaux de glace et le stress cellulaire pendant le processus de congélation, préservant ainsi l'intégrité cellulaire.
Les principales caractéristiques du milieu de congélation CM-1 sont les suivantes :

Large compatibilité: Efficace pour une large gamme de types de cellules, y compris les cellules primaires, les cellules souches et les lignées cellulaires établies.
Haute viabilité: Optimisé pour maximiser la récupération et la viabilité des cellules après décongélation, garantissant des résultats expérimentaux fiables.
Prêt à l'emploi: Pratiquement préparé et stérilisé pour une application immédiate, réduisant le temps de préparation et le risque de contamination.
Stabilité améliorée: Maintient des performances constantes dans des conditions de cryoconservation standard, garantissant des résultats reproductibles.
Longue durée de conservation: CM-1 est un milieu de cryoconservation contenant du sérum, prêt à l'emploi, qui peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à un an.

Utilisation du CM-1 pour la congélation des cellules

Pour utiliser le CM-1 pour congeler des cellules adhérentes ou en suspension, suivre les étapes suivantes

Pour les cellules adhérentes, les laver et les dissocier du substrat de culture. Pour les cellules en suspension, passer directement à l'étape suivante.
Compter les cellules pour s'assurer qu'elles ont la bonne concentration.
Centrifuger les cellules pour les culotter, puis les remettre en suspension dans le milieu de congélation CM-1.
Transférer les cellules remises en suspension dans des cryovials.
Utiliser une méthode de congélation lente avant de transférer les cellules pour un stockage à long terme

Méthode de congélation
Description
Etapes

❄️
Congélation manuelle

Méthode progressive impliquant une réduction graduelle de la température pour assurer la viabilité des cellules

1️⃣ Placer les cellules dans un milieu de congélation dans un congélateur à 4°C pendant 40 minutes.
2️⃣ Transférer dans un congélateur à -80°C pendant 24 heures.
3️⃣ Stocker les cellules dans de l'azote liquide pour une conservation à long terme

❄️
Utilisation de Mr. Frosty

Un appareil pratique qui permet de contrôler les taux de congélation sans alimentation électrique

1️⃣ Préparer les cellules dans des cryovials avec du milieu de congélation.
2️⃣ Placer les cryovials dans le récipient Mr. Frosty.
3️⃣ Conserver à -80°C pendant 24 heures avant de les transférer dans l'azote liquide

❄️
Congélateur à débit contrôlé

Un congélateur de haute précision de Thermo Fisher ou d'autres fabricants, conçu pour une réduction contrôlée de la température

1️⃣ Programmer l'appareil pour réduire progressivement la température.
2️⃣ Placer les cellules préparées dans le congélateur.
3️⃣ Après le cycle de congélation, transférer les cellules dans l'azote liquide

Stocker les cryovials à des températures inférieures à -130°C ou dans de l'azote liquide pour une conservation à long terme.

Ingrédients

Contient du FBS, du DMSO, du glucose et des sels
Pouvoir tampon : pH = 7,2 à 7,6

Le milieu de congélation CM-1 de Cytion offre une solution fiable pour la cryoconservation, garantissant une viabilité cellulaire et une fonctionnalité élevées après décongélation pour une large gamme d'applications de recherche.

59,00 €*

RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3

Le milieu RPMI 1640, également connu sous le nom de milieu RPMI, est un milieu de culture cellulaire très polyvalent, largement utilisé dans la recherche biologique pour cultiver diverses cellules de mammifères. Développé par George E. Moore, Robert E. Gerner et H. Addison Franklin en 1966 au célèbre Roswell Park Comprehensive Cancer Center, ce milieu tire son nom de son origine au Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
Contrôle de la qualité

Filtré stérilement

Stockage et durée de conservation

Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.

Conditions d'expédition

Température ambiante

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.

Composition

Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)

Acides aminés
Glycine
10.00

L-Alanyl-L-Glutamine
434.40

L-Arginine
200.00

L-AsparagineH2O
56.82

Acide L-Aspartique
20.00

L-Cystine 2HCl
65.20

Acide L-Glutamique
20.00

L-Histidine HClH2O
20.27

L-Hydroxy-L-Proline
20.00

L-Isoleucine
50.00

L-Leucine
50.00

L-Lysine HCl
40.00

L-Méthionine
15.00

L-Phénylalanine
15.00

L-Proline
20.00

L-Sérine
30.00

L-Thréonine
20.00

L-Tryptophane
5.00

L-Tyrosine 2Na 2H2O
28.83

L-Valine
20.00

Vitamines
acide p-amino-benzoïque
1.00

D-Biotine
0.20

Chlorure de choline
3.00

D-Pantothénate de calcium
0.25

Acide folique
1.00

myo-Inositol
35.00

Nicotinamide
1.00

Pyridoxine HCl
1.00

Riboflavine
0.20

Thiamine HCl
1.00

Vitamine B12
0.005

Sels inorganiques
Ca(NO3)2 4H2O
100.00

KCl
400.00

MgSO4 7H2O
100.00

NaCl
6000.00

NaHCO3
2000.00

Na2HPO4
800.00

Autres composants
D-Glucose
2000.00

L-Glutathion réduit
1.00

Sel de sodium du rouge de phénol
5.30

25,00 €*

Accutase

Variantes: 100 ml

Réactif de dissociation cellulaire Accutase
- Une alternative douce à la trypsine
Accutase est une solution de détachement cellulaire qui révolutionne l'industrie de la culture cellulaire. Il s'agit d'un mélange d'enzymes protéolytiques et collagénolytiques qui imite l'action de la trypsine et de la collagénase. Contrairement à la trypsine, Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est beaucoup plus doux pour les cellules, ce qui en fait une solution idéale pour le détachement de routine des cellules du matériel plastique de culture tissulaire standard et du matériel plastique à revêtement adhésif. Dans cet article de blog, nous allons explorer les avantages et les utilisations d'Accutase et la façon dont il change la donne dans la culture cellulaire.
Avantages d'Accutase
Accutase présente plusieurs avantages par rapport aux solutions de trypsine traditionnelles. Tout d'abord, il peut être utilisé chaque fois qu'un détachement doux et efficace d'une lignée cellulaire adhérente est nécessaire, ce qui en fait un substitut direct à la trypsine. Deuxièmement, Accutase fonctionne extrêmement bien sur les cellules souches embryonnaires et neuronales, et il a été démontré qu'il maintient la viabilité de ces cellules après le passage. Troisièmement, Accutase préserve la plupart des épitopes pour une analyse ultérieure par cytométrie de flux, ce qui la rend idéale pour l'analyse des marqueurs de la surface cellulaire.
En outre, il n'est pas nécessaire de neutraliser Accutase lors du passage des cellules adhérentes. L'ajout de milieu après la séparation des cellules dilue Accutase de sorte qu'elle n'est plus en mesure de détacher les cellules. Ceci élimine le besoin d'une étape d'inactivation et permet aux techniciens de culture cellulaire de gagner du temps. Enfin, Accutase n'a pas besoin d'être aliquoté et un flacon est stable au réfrigérateur pendant 2 mois.
Applications d'Accutase
Accutase remplace directement la solution de trypsine et peut être utilisé pour le passage des lignées cellulaires. En outre, Accutase donne de bons résultats lors du détachement de cellules pour l'analyse de nombreux marqueurs de surface cellulaire par cytométrie de flux et pour le tri cellulaire. D'autres applications en aval du traitement par Accutase comprennent l'analyse des marqueurs de surface cellulaire, les essais de croissance virale, la prolifération cellulaire, les essais de migration des cellules tumorales, le passage de routine des cellules, l'augmentation de la production (bioréacteur) et la cytométrie de flux.
Composition d'Accutase
Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est un mélange enzymatique naturel avec une activité enzymatique protéolytique et collagénolytique. Il est formulé à une concentration beaucoup plus faible que la trypsine et la collagénase, ce qui le rend moins toxique et plus doux, mais tout aussi efficace.
Efficacité d'Accutase
Accutase s'est avéré efficace pour détacher les cellules primaires et les cellules souches et maintenir une viabilité cellulaire élevée par rapport aux enzymes d'origine animale telles que la trypsine. 100 % des cellules sont récupérées après 10 minutes, et il n'y a aucun inconvénient à laisser les cellules dans Accutase jusqu'à 45 minutes, grâce à l'autodigestion d'Accutase.
En résumé
En conclusion, Accutase est une solution puissante qui change la donne dans le domaine de la culture cellulaire. Grâce à sa nature douce, son efficacité et sa polyvalence, Accutase est l'alternative idéale à la trypsine. Si vous recherchez une solution fiable et efficace pour le détachement cellulaire, Accutase est la solution qu'il vous faut.

75,00 €*

Solution antibiotique/antimycosique (100x)

Aperçu du produit
Volume : 100 ml Stockage : ≤-15°C Stérilité : Filtration stérile
Lasolution antibiotique/antimycosique (100x) est un concentré stérile, prêt à l'emploi, conçu pour réduire les risques de contamination microbienne dans les cultures cellulaires et les applications de laboratoire connexes. Cette solution 100x contient une combinaison bien établie de pénicilline, de streptomycine et d'amphotéricine B, qui fournit une activité antimicrobienne à large spectre contre les bactéries Gram-positives et Gram-négatives, les levures et les champignons filamenteux. La formulation convient aux cultures de cellules eucaryotes, aux milieux bactériens et à d'autres systèmes sensibles à la contamination, ce qui favorise des opérations de laboratoire propres et cohérentes.
Applications et avantages Optimisée pour les protocoles de recherche de routine, cette solution est largement utilisée pour maintenir des conditions aseptiques dans les flux de culture cellulaire. Elle offre des performances fiables dans les environnements sensibles à la contamination, aidant les chercheurs à réduire le risque de prolifération microbienne sans compromettre la santé des cellules ou la reproductibilité des expériences. La formulation stérile-filtrée élimine le besoin d'étapes de solubilisation supplémentaires, ce qui permet de rationaliser la préparation des milieux et de réduire la variabilité des procédures de laboratoire quotidiennes.
Utilisation et compatibilité Pour obtenir des concentrations de travail standard, diluer la solution au 1:100 dans votre milieu de culture complet. Le produit est compatible avec une large gamme de lignées cellulaires de mammifères et de milieux de base. Grâce à la disponibilité constante des stocks, les chercheurs bénéficient d'une continuité d'approvisionnement fiable et d'une planification logistique simplifiée. La solution doit être conservée à une température ≤ -15 °C et protégée des cycles répétés de congélation-décongélation pour maintenir sa stabilité. Réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures diagnostiques ou thérapeutiques. Ne pas utiliser chez l'homme ou l'animal.

45,00 €*

PBS

Solution saline tamponnée au phosphate (PBS)
La solution saline tamponnée au phosphate (PBS) est une solution tampon largement utilisée dans la recherche biologique et chimique. Elle joue un rôle crucial dans le maintien de l'équilibre du pH et de l'osmolarité au cours de diverses procédures expérimentales, y compris le traitement des tissus et la culture cellulaire. Notre solution PBS est méticuleusement formulée avec des ingrédients de haute pureté afin de garantir la stabilité et la fiabilité de chaque expérience. L'osmolarité et les concentrations d'ions de notre PBS imitent étroitement celles du corps humain, ce qui la rend isotonique et non toxique pour la plupart des cellules.

Composition de notre solution PBS
Notre solution PBS est un mélange de tampons phosphatés et de solutions salines de qualité supérieure dont le pH est ajusté. À une concentration de travail de 1X, elle contient :

8000 mg/L de chlorure de sodium (NaCl)
200 mg/L Chlorure de potassium (KCl)
1150 mg/L phosphate de sodium dibasique anhydre (Na2HPO4)
200 mg/L Phosphate de potassium monobasique anhydre (KH2PO4)

Cette composition assure un pH et un équilibre ionique optimaux, convenant à une large gamme d'applications biologiques.

Applications de notre solution PBS
Notre solution PBS est idéale pour diverses applications dans la recherche biologique. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent appropriée pour la dilution de substances et le rinçage de récipients cellulaires. Les solutions PBS contenant de l'EDTA sont efficaces pour désengager les cellules attachées et agglutinées. Cependant, les métaux divalents tels que le zinc ne doivent pas être ajoutés au PBS, car ils peuvent provoquer une précipitation. Dans ce cas, les tampons Good's sont recommandés. En outre, notre solution PBS est une alternative acceptable au milieu de transport viral pour le transport et le stockage des virus à ARN, y compris le SARS-CoV-2.

Contrôle de la qualité

Filtré stérilement

Stockage et durée de conservation

Stocker entre +2°C et +25°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver entre 2°C et 25°C et utiliser dans les 24 mois.

Conditions d'expédition

Température ambiante

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.

Composition

Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)

Sels
Chlorure de potassium
200

Phosphate de potassium monobasique anhydre
200

Chlorure de sodium
8000

Phosphate de sodium dibasique anhydre
1150

20,00 €*