Cellules HEK293T/17
550,00 €*
Les produits sont expédiés congelés dans de la glace carbonique dans des cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10 6 cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 106 cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Informations générales
| Description | La lignée cellulaire 293T/17 est une variante immortalisée de la lignée HEK293, dérivée de cellules rénales embryonnaires humaines et largement utilisée dans la recherche, en particulier dans l'étude et la production de vecteurs rétroviraux et lentiviraux. Cette lignée cellulaire a été modifiée pour exprimer l'antigène SV40 large T, ce qui renforce son utilité dans la production de vecteurs viraux. L'expression de l'antigène SV40 grand T est une caractéristique clé qui permet à ces cellules de répliquer des plasmides contenant l'origine de réplication SV40, ce qui augmente considérablement le rendement de l'ADN plasmidique dans les procédures de transfection transitoire. Cette caractéristique est particulièrement utile pour la production de vecteurs viraux. les cellules 293T/17 sont essentielles à la production de vecteurs viraux tels que les rétrovirus et les lentivirus. Elles produisent efficacement des particules virales grâce à leur capacité à amplifier les plasmides transfectés et à soutenir l'assemblage et la libération du virus. Cela en fait un outil essentiel dans la recherche sur la thérapie génique, où ces vecteurs sont utilisés pour introduire du matériel génétique dans les cellules hôtes. Les cellules présentent une efficacité de transfection élevée, cruciale pour l'introduction et l'expression réussies de l'ADN étranger lors de la construction du vecteur. Cette efficacité élevée permet d'étudier la fonction des gènes et de générer des protéines recombinantes de manière efficace. Les capacités robustes de la lignée cellulaire 293T/17 en font un outil précieux pour la recherche scientifique fondamentale et les applications thérapeutiques. Elle est largement utilisée en biologie moléculaire et en génie génétique pour l'expression des protéines, l'analyse de la fonction des gènes et le développement de nouvelles thérapies géniques. L'efficacité de la lignée cellulaire à produire des vecteurs viraux facilite les expériences nécessitant l'apport de matériel génétique, ce qui en fait une pierre angulaire dans le domaine de la virologie. La lignée cellulaire 293T/17 continue de jouer un rôle essentiel dans la compréhension de la fonction des gènes et dans le développement d'interventions thérapeutiques. |
|---|---|
| Organisme | Humain |
| Tissus | Rein embryonnaire |
| Applications | Cette lignée cellulaire est un choix optimal pour la transfection, le criblage à haut débit, la toxicologie et le développement de vaccins. |
| Synonymes | HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17 |
Caractéristiques
| L'âge | Fœtus |
|---|---|
| Genre | Femme |
| Morphologie | Épithéliale |
| Propriétés de croissance | Adhérent |
Données réglementaires
| Citation | HEK293T/17 (numéro de catalogue Cytion 305117) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1926 |
| Statut des OGM | OGM-S1 : Cette lignée cellulaire HEK293T/17 contient des séquences de l'antigène SV40 Large T, ce qui améliore la réplication du plasmide et l'efficacité de l'empaquetage. L'insert est présent de manière stable dans les cellules rénales embryonnaires transformées. Cette classification ne s'applique qu'en Allemagne et peut différer dans d'autres pays. |
Données biomoléculaires
| Expression de l'antigène | Antigène T SV40 |
|---|---|
| Virus | SV40 (exprime l'antigène T SV40) |
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Compléter le milieu avec 10% de FBS |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Sous-culture | Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Taux de fractionnement | 1:2 à 1:4 |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Congélation du milieu | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation. |
| Décongélation et culture des cellules |
|
| Atmosphère d'incubation | 37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée. |
| Revêtement des flacons | Pour une fixation et une viabilité optimales après décongélation, nous recommandons d'utiliser des flacons ou des plaques recouverts de collagène. |
| Procédure de congélation | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions de stockage | Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide. |
Contrôle de qualité / Profil génétique / HLA
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes. |
|---|---|
| Profil STR |
Amélogénine: x,x
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,14
D16S539: 9,13
D5S818: 8,9
D7S820: 11
TH01: 7,9.3
TPOX: 11
vWA: 16,19
D3S1358: 15,16,17
D21S11: 28,30.2
D18S51: 17,18
Penta E: 7,15
Penta D: 9,10
D8S1179: 11,12,14
FGA: 23
D6S1043: 11
D2S1338: 19
D12S391: 19,21
D19S433: 18
|
Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305117-070225 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 305117 |
Accord de transfert de matériel
Si vous avez l'intention d'utiliser les lignées cellulaires Cytion uniquement pour la recherche interne sur un seul site de recherche, veuillez remplir et signer notre accord de transfert de matériel (MTA) et le joindre à votre commande.
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Produits requis
Produits requis
Milieu de congélation CM-1 - 50 mlVariantes de milieux de cryoconservation: 50 mlLe milieu de congélation CM-1 de Cytion est un milieu de cryoconservation de pointe conçu pour garantir le plus haut niveau de viabilité et de fonctionnalité des cellules après la décongélation. Ce milieu polyvalent convient à un large éventail de types de cellules, y compris les cellules humaines et animales, ce qui en fait un outil essentiel pour diverses applications de recherche. Formulé avec une combinaison méticuleusement équilibrée de cryoprotecteurs et de nutriments essentiels, le milieu de congélation CM-1 minimise la formation de cristaux de glace et le stress cellulaire pendant le processus de congélation, préservant ainsi l'intégrité cellulaire.
Les principales caractéristiques du milieu de congélation CM-1 sont les suivantes :
Large compatibilité: Efficace pour une large gamme de types de cellules, y compris les cellules primaires, les cellules souches et les lignées cellulaires établies.
Haute viabilité: Optimisé pour maximiser la récupération et la viabilité des cellules après décongélation, garantissant des résultats expérimentaux fiables.
Prêt à l'emploi: Pratiquement préparé et stérilisé pour une application immédiate, réduisant le temps de préparation et le risque de contamination.
Stabilité améliorée: Maintient des performances constantes dans des conditions de cryoconservation standard, garantissant des résultats reproductibles.
Longue durée de conservation: CM-1 est un milieu de cryoconservation contenant du sérum, prêt à l'emploi, qui peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à un an.
Utilisation du CM-1 pour la congélation des cellules
Pour utiliser le CM-1 pour congeler des cellules adhérentes ou en suspension, suivre les étapes suivantes
Pour les cellules adhérentes, les laver et les dissocier du substrat de culture. Pour les cellules en suspension, passer directement à l'étape suivante.
Compter les cellules pour s'assurer qu'elles ont la bonne concentration.
Centrifuger les cellules pour les culotter, puis les remettre en suspension dans le milieu de congélation CM-1.
Transférer les cellules remises en suspension dans des cryovials.
Utiliser une méthode de congélation lente avant de transférer les cellules pour un stockage à long terme
Méthode de congélation
Description
Etapes
❄️
Congélation manuelle
Méthode progressive impliquant une réduction graduelle de la température pour assurer la viabilité des cellules
1️⃣ Placer les cellules dans un milieu de congélation dans un congélateur à 4°C pendant 40 minutes.
2️⃣ Transférer dans un congélateur à -80°C pendant 24 heures.
3️⃣ Stocker les cellules dans de l'azote liquide pour une conservation à long terme
❄️
Utilisation de Mr. Frosty
Un appareil pratique qui permet de contrôler les taux de congélation sans alimentation électrique
1️⃣ Préparer les cellules dans des cryovials avec du milieu de congélation.
2️⃣ Placer les cryovials dans le récipient Mr. Frosty.
3️⃣ Conserver à -80°C pendant 24 heures avant de les transférer dans l'azote liquide
❄️
Congélateur à débit contrôlé
Un congélateur de haute précision de Thermo Fisher ou d'autres fabricants, conçu pour une réduction contrôlée de la température
1️⃣ Programmer l'appareil pour réduire progressivement la température.
2️⃣ Placer les cellules préparées dans le congélateur.
3️⃣ Après le cycle de congélation, transférer les cellules dans l'azote liquide
Stocker les cryovials à des températures inférieures à -130°C ou dans de l'azote liquide pour une conservation à long terme.
Ingrédients
Contient du FBS, du DMSO, du glucose et des sels
Pouvoir tampon : pH = 7,2 à 7,6
Le milieu de congélation CM-1 de Cytion offre une solution fiable pour la cryoconservation, garantissant une viabilité cellulaire et une fonctionnalité élevées après décongélation pour une large gamme d'applications de recherche.59,00 €*DMEM, w : 4,5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3,7 g/L NaHCO3, w : 1,0 mM Pyruvate de sodiumLe DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) est un milieu de base très polyvalent et largement utilisé, conçu pour favoriser la croissance d'une gamme variée de cellules de mammifères dans la recherche biologique. C'est un milieu idéal pour la culture de fibroblastes primaires, de neurones, de cellules gliales, de HUVEC, de cellules musculaires lisses, ainsi que de lignées cellulaires populaires telles que HeLa, 293, Cos-7 et PC-12.
Le DMEM se distingue des autres milieux par sa composition unique. Il contient une concentration impressionnante d'acides aminés et de vitamines, multipliée par quatre par rapport au milieu minimal essentiel d'Eagle. Initialement développé avec un faible taux de glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Notamment, le DMEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance, ce qui nécessite une supplémentation. Pour obtenir une croissance optimale, une approche courante consiste à compléter le DMEM avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). En outre, le DMEM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium, nécessitant un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis pour la culture de cellules et de tissus, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu Eagle original, mis au point dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation supplémentaire améliorée connue sous le nom de modification de Dulbecco. Cette modification multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et en vitamines par rapport au milieu d'origine.
Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d'applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.
Contrôle de la qualité
Filtré stérilement
Stockage et durée de conservation
Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.
Conditions d'expédition
Température ambiante
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)
Acides aminés
Glycine
30.00
L-Arginine HCl
84.00
L-Cystine 2 HCl
62.57
L-Glutamine
584.00
L-Histidine HClH2O
42.00
L-Isoleucine
105.00
L-Leucine
105.00
L-Lysine HCl
146.00
L-Méthionine
30.00
L-Phénylalanine
66.00
L-Sérine
42.00
L-Thréonine
95.00
L-Tryptophane
16.00
L-Tyrosine 2 Na 2H2O
103.79
L-Valine
94.00
Vitamines
Chlorure de choline
4.00
D-Pantothénate de calcium
4.00
Acide folique
4.00
myo-Inositol
7.20
Nicotinamide
4.00
Pyridoxal HCl
4.00
Riboflavine
0.40
Thiamine HCl
4.00
Sels inorganiques
CaCl2 2H2O
265.00
Fe(NO3)3 9H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Autres composants
D-Glucose
4500.00
Sel de sodium de rouge de phénol
15.90
Pyruvate de sodium
110.0025,00 €*AccutaseVariantes: 100 mlRéactif de dissociation cellulaire Accutase
- Une alternative douce à la trypsine
Accutase est une solution de détachement cellulaire qui révolutionne l'industrie de la culture cellulaire. Il s'agit d'un mélange d'enzymes protéolytiques et collagénolytiques qui imite l'action de la trypsine et de la collagénase. Contrairement à la trypsine, Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est beaucoup plus doux pour les cellules, ce qui en fait une solution idéale pour le détachement de routine des cellules du matériel plastique de culture tissulaire standard et du matériel plastique à revêtement adhésif. Dans cet article de blog, nous allons explorer les avantages et les utilisations d'Accutase et la façon dont il change la donne dans la culture cellulaire.
Avantages d'Accutase
Accutase présente plusieurs avantages par rapport aux solutions de trypsine traditionnelles. Tout d'abord, il peut être utilisé chaque fois qu'un détachement doux et efficace d'une lignée cellulaire adhérente est nécessaire, ce qui en fait un substitut direct à la trypsine. Deuxièmement, Accutase fonctionne extrêmement bien sur les cellules souches embryonnaires et neuronales, et il a été démontré qu'il maintient la viabilité de ces cellules après le passage. Troisièmement, Accutase préserve la plupart des épitopes pour une analyse ultérieure par cytométrie de flux, ce qui la rend idéale pour l'analyse des marqueurs de la surface cellulaire.
En outre, il n'est pas nécessaire de neutraliser Accutase lors du passage des cellules adhérentes. L'ajout de milieu après la séparation des cellules dilue Accutase de sorte qu'elle n'est plus en mesure de détacher les cellules. Ceci élimine le besoin d'une étape d'inactivation et permet aux techniciens de culture cellulaire de gagner du temps. Enfin, Accutase n'a pas besoin d'être aliquoté et un flacon est stable au réfrigérateur pendant 2 mois.
Applications d'Accutase
Accutase remplace directement la solution de trypsine et peut être utilisé pour le passage des lignées cellulaires. En outre, Accutase donne de bons résultats lors du détachement de cellules pour l'analyse de nombreux marqueurs de surface cellulaire par cytométrie de flux et pour le tri cellulaire. D'autres applications en aval du traitement par Accutase comprennent l'analyse des marqueurs de surface cellulaire, les essais de croissance virale, la prolifération cellulaire, les essais de migration des cellules tumorales, le passage de routine des cellules, l'augmentation de la production (bioréacteur) et la cytométrie de flux.
Composition d'Accutase
Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est un mélange enzymatique naturel avec une activité enzymatique protéolytique et collagénolytique. Il est formulé à une concentration beaucoup plus faible que la trypsine et la collagénase, ce qui le rend moins toxique et plus doux, mais tout aussi efficace.
Efficacité d'Accutase
Accutase s'est avéré efficace pour détacher les cellules primaires et les cellules souches et maintenir une viabilité cellulaire élevée par rapport aux enzymes d'origine animale telles que la trypsine. 100 % des cellules sont récupérées après 10 minutes, et il n'y a aucun inconvénient à laisser les cellules dans Accutase jusqu'à 45 minutes, grâce à l'autodigestion d'Accutase.
En résumé
En conclusion, Accutase est une solution puissante qui change la donne dans le domaine de la culture cellulaire. Grâce à sa nature douce, son efficacité et sa polyvalence, Accutase est l'alternative idéale à la trypsine. Si vous recherchez une solution fiable et efficace pour le détachement cellulaire, Accutase est la solution qu'il vous faut.75,00 €*Solution antibiotique/antimycosique (100x)Aperçu du produit
Volume : 100 ml Stockage : ≤-15°C Stérilité : Filtration stérile
Lasolution antibiotique/antimycosique (100x) est un concentré stérile, prêt à l'emploi, conçu pour réduire les risques de contamination microbienne dans les cultures cellulaires et les applications de laboratoire connexes. Cette solution 100x contient une combinaison bien établie de pénicilline, de streptomycine et d'amphotéricine B, qui fournit une activité antimicrobienne à large spectre contre les bactéries Gram-positives et Gram-négatives, les levures et les champignons filamenteux. La formulation convient aux cultures de cellules eucaryotes, aux milieux bactériens et à d'autres systèmes sensibles à la contamination, ce qui favorise des opérations de laboratoire propres et cohérentes.
Applications et avantages Optimisée pour les protocoles de recherche de routine, cette solution est largement utilisée pour maintenir des conditions aseptiques dans les flux de culture cellulaire. Elle offre des performances fiables dans les environnements sensibles à la contamination, aidant les chercheurs à réduire le risque de prolifération microbienne sans compromettre la santé des cellules ou la reproductibilité des expériences. La formulation stérile-filtrée élimine le besoin d'étapes de solubilisation supplémentaires, ce qui permet de rationaliser la préparation des milieux et de réduire la variabilité des procédures de laboratoire quotidiennes.
Utilisation et compatibilité Pour obtenir des concentrations de travail standard, diluer la solution au 1:100 dans votre milieu de culture complet. Le produit est compatible avec une large gamme de lignées cellulaires de mammifères et de milieux de base. Grâce à la disponibilité constante des stocks, les chercheurs bénéficient d'une continuité d'approvisionnement fiable et d'une planification logistique simplifiée. La solution doit être conservée à une température ≤ -15 °C et protégée des cycles répétés de congélation-décongélation pour maintenir sa stabilité. Réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures diagnostiques ou thérapeutiques. Ne pas utiliser chez l'homme ou l'animal.45,00 €*PBSSolution saline tamponnée au phosphate (PBS)
La solution saline tamponnée au phosphate (PBS) est une solution tampon largement utilisée dans la recherche biologique et chimique. Elle joue un rôle crucial dans le maintien de l'équilibre du pH et de l'osmolarité au cours de diverses procédures expérimentales, y compris le traitement des tissus et la culture cellulaire. Notre solution PBS est méticuleusement formulée avec des ingrédients de haute pureté afin de garantir la stabilité et la fiabilité de chaque expérience. L'osmolarité et les concentrations d'ions de notre PBS imitent étroitement celles du corps humain, ce qui la rend isotonique et non toxique pour la plupart des cellules.
Composition de notre solution PBS
Notre solution PBS est un mélange de tampons phosphatés et de solutions salines de qualité supérieure dont le pH est ajusté. À une concentration de travail de 1X, elle contient :
8000 mg/L de chlorure de sodium (NaCl)
200 mg/L Chlorure de potassium (KCl)
1150 mg/L phosphate de sodium dibasique anhydre (Na2HPO4)
200 mg/L Phosphate de potassium monobasique anhydre (KH2PO4)
Cette composition assure un pH et un équilibre ionique optimaux, convenant à une large gamme d'applications biologiques.
Applications de notre solution PBS
Notre solution PBS est idéale pour diverses applications dans la recherche biologique. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent appropriée pour la dilution de substances et le rinçage de récipients cellulaires. Les solutions PBS contenant de l'EDTA sont efficaces pour désengager les cellules attachées et agglutinées. Cependant, les métaux divalents tels que le zinc ne doivent pas être ajoutés au PBS, car ils peuvent provoquer une précipitation. Dans ce cas, les tampons Good's sont recommandés. En outre, notre solution PBS est une alternative acceptable au milieu de transport viral pour le transport et le stockage des virus à ARN, y compris le SARS-CoV-2.
Contrôle de la qualité
Filtré stérilement
Stockage et durée de conservation
Stocker entre +2°C et +25°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver entre 2°C et 25°C et utiliser dans les 24 mois.
Conditions d'expédition
Température ambiante
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)
Sels
Chlorure de potassium
200
Phosphate de potassium monobasique anhydre
200
Chlorure de sodium
8000
Phosphate de sodium dibasique anhydre
115020,00 €* -
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